一種從廣玉蘭葉連續(xù)高效提取小白菊內(nèi)酯的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從植物中提取活性成分的方法，尤其是涉及一種以新鮮廣玉蘭葉為原料連續(xù)高效提取特有活性成分小白菊內(nèi)酯的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]玉蘭為木蘭科木蘭屬植物，原產(chǎn)于南美洲，分布在北美洲以及中國(guó)大陸的長(zhǎng)江流域以南、北京、蘭州等地，已由人工引種嫁接栽培，其葉為入藥部位，主治外感風(fēng)寒、頭痛鼻塞、脘腹脹痛、嘔吐腹瀉、高血壓、偏頭痛等。小白菊內(nèi)酯是一種倍半萜稀內(nèi)酯化合物，被證實(shí)為藥理活性最好的成分。小白菊內(nèi)酯具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，研究表明，小白菊內(nèi)酯能夠摧毀急性骨髓性白血病細(xì)胞，對(duì)研制白血病新藥大有幫助；可有針對(duì)性地消滅引發(fā)急性和慢性骨髓性白血病的干細(xì)胞，從根本上遏制疾病的發(fā)生；可用于治療偏頭痛及風(fēng)濕性炎等多種疾??；可用于驅(qū)風(fēng)劑，治療腸胃脹；可用于通經(jīng)劑，殺蟲劑(寄生蟲)；可用于減輕腎痛，頭暈和早上嘔吐現(xiàn)象；還可以幫助改善感冒、發(fā)燒時(shí)的不適癥狀等。就目前情況看，因植物中小白菊內(nèi)酯的含量低且提取工藝復(fù)雜，國(guó)內(nèi)外小白菊內(nèi)酯的價(jià)格都普遍偏高，但需求情況仍呈現(xiàn)供不應(yīng)求的狀態(tài)，說明小白菊內(nèi)酯在醫(yī)藥領(lǐng)域的需求是炙手可熱的，且貢獻(xiàn)非常重要。
[0003]目前，國(guó)內(nèi)有關(guān)從玉蘭葉中提取小白菊內(nèi)酯的專利已有4項(xiàng)，但各自存在著不同的問題:
[0004]公開號(hào)為CN101190258的專利是一種從玉蘭葉和/花中提取富含小白菊內(nèi)酯的總倍半萜內(nèi)酯類化合物的方法。該專利也采用干玉蘭為原料，純化過程中使用300目硅膠柱吸附洗脫，存在與公開號(hào)為103524520A的專利同樣的問題。此外，該專利采用玉蘭葉/和花干燥粉碎，先用水浸泡，去除水提液來防止萃取時(shí)乳化現(xiàn)象產(chǎn)生，原料中微溶于水有效成份完全廢棄，造成浪費(fèi)。
[0005]公開號(hào)為CN101190259的專利介紹了從玉蘭葉和/花中提取廣玉蘭總內(nèi)酯提取物的方法。工藝原理同CN101190258基本相同，存在相同缺陷。
[0006]公開號(hào)為CN102241684A的專利介紹了從廣玉蘭根皮中提取內(nèi)酯提取小白菊內(nèi)酯物的方法，而廣玉蘭作為多年生木本植物，通過實(shí)生苗進(jìn)行繁殖，生長(zhǎng)周期極長(zhǎng)，無法短時(shí)間大量繁育，因此，實(shí)際園林生產(chǎn)中主要通過嫁接繁殖，常用木蘭(木筆、辛夷)作砧木，而木蘭(木筆、辛夷)根皮中幾乎不含有小白菊內(nèi)酯，因此，在實(shí)際生產(chǎn)中很難獲得大量原料，導(dǎo)致該專利技術(shù)在實(shí)際生產(chǎn)中根本沒有應(yīng)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:針對(duì)國(guó)內(nèi)現(xiàn)有從玉蘭葉中提取小白菊內(nèi)酯存在的各種問題，提供一種從廣玉蘭葉連續(xù)高效提取小白菊內(nèi)酯的方法。
[0008]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:一種從廣玉蘭葉連續(xù)高效提取小白菊內(nèi)酯的方法，該方法步驟如下:
(1)原料預(yù)處理:以新鮮廣玉蘭葉為原料，將廣玉蘭鮮葉打漿破碎，按lg葉漿加2mL體積濃度為80%-95%的極性有機(jī)試劑的比例，于葉漿中加入極性有機(jī)試劑，常溫下冷浸泡12-24h ；
(2)恒溫梯度串聯(lián)提取:取3-5個(gè)提取罐串聯(lián)，將冷浸后的葉漿按提取罐個(gè)數(shù)等分后分別置入各提取罐中，按lg葉漿加8mL體積濃度為80%-95%的極性有機(jī)試劑的比例，于第一提取罐的葉漿中加入極性有機(jī)試劑作為提取劑，加熱至溫度為65°C -70°C，保持該溫度浸提20-30min后，將第一提取罐的提取液抽取到第二罐提取中作為提取劑，加熱至溫度為65°C -70°C，保持該溫度浸提20-30min，再將第二提取罐的提取液抽取至第三提取罐中作為提取劑，加熱至溫度為65°C -70°C，保持該溫度浸提20-30min，依此類推直至最后一個(gè)提取罐的葉漿在上一個(gè)提取罐的提取液的作用下于65-70°C浸提20-30min，得到的提取液200目離心過濾；再于第一提取罐中按lg濾渣加8mL體積濃度為80%_95%的極性有機(jī)試劑的比例，于第一提取罐的濾渣中加入極性有機(jī)試劑按前述方法重復(fù)串聯(lián)提取一次，合并兩次的濾液；其中，上述提及的離心過濾為三足離心布袋過濾。
[0009](3)微波真空減壓濃縮回收試劑:將提取到的濾液進(jìn)行微波真空減壓濃縮回收極性有機(jī)試劑后，得到提取浸膏；其中，微波真空減壓濃縮是指真空減壓濃縮時(shí)溫度采用微波加熱至溫度為55°C -65°C，真空度為0.08Mpa。
[0010](4)水洗除雜:于提取浸膏中加入去離子水配制成PM10的料液，靜置24h-72h，過濾去除濾液，得到水洗除雜浸膏；
(5)萃取純化:于水洗除雜浸膏中加入為浸膏重量6-10倍的非極性有機(jī)試劑，邊加溫邊攪拌至溫度為35°C -40°C，繼續(xù)攪拌2-3分鐘至浸膏完全溶解，靜置萃取24h后將上層輕液與下層重液分離；
(6)微波真空減壓濃縮回收試劑:將上層輕液進(jìn)行微波真空減壓濃縮以回收非極性有機(jī)試劑，得到浸膏；其中，微波真空減壓濃縮是指真空減壓濃縮時(shí)溫度采用微波加熱，至溫度為55°C -65°C，真空度為0.08Mpa。
[0011](7)脫色:于浸膏中加入去離子水配制成PM8-10的料液，加入為料液重量10%的脫色劑，攪拌均勻，進(jìn)行吸附脫色；真空抽濾過300目(必要時(shí)，濾液可再加入一次脫色劑重復(fù)脫色一次)，再經(jīng)過板框過濾器過濾，濾液經(jīng)真空減壓濃縮至得到固形物含量> 60%的濃縮液，其中，真空減壓濃縮時(shí)溫度采用微波加熱，至溫度為55°C _65°C，真空度為0.08Mpa。
[0012](8)干燥:將濃縮液真空干燥至含水量小于5%，得到純度達(dá)到95%的小白菊內(nèi)酯；其中，真空干燥時(shí)的溫度為55°C -60°C。
[0013]其中，上述提及的極性有機(jī)試劑為甲醇、乙醇或戊醇；上述提及的非極性有機(jī)試劑為乙酸乙酯或氯仿；上述提及的脫色劑為活性炭。
[0014]上述提取方法完成后，可進(jìn)一步將廢棄的廢渣、廢液利用，按下述方法制成不同小白菊內(nèi)酯含量的低純度產(chǎn)品，實(shí)現(xiàn)有效成分的最大限度提取利用，如:
于上述步驟(2)中浸提完成后的第一提取罐的料渣中，按lg料渣加8mL去離子水的比例加入去離子水，于100°C浸提60min，再將第一提取罐的提取液抽取到第二提取罐中作為提取劑，于100°C浸提60min，接著將第二提取罐的提取液抽取至第三提取罐中作為提取劑，于100°C浸提60min，依此類推直至最后一個(gè)提取罐中的料渣在上一個(gè)提取罐的提取液的作用下于100°C浸提60min，得到的提取液200目離心過濾后，進(jìn)行真空減壓濃縮，當(dāng)固形物含量達(dá)到35%-40%時(shí)出料，得到干燥成粉后小白菊內(nèi)酯達(dá)到1%的液態(tài)小白菊內(nèi)酯。其中，真空減壓濃縮時(shí)的溫度采用微波加熱，至溫度為55-60°C ;上述提及的離心過濾為三足離心布袋過濾。
[0015]將上述步驟(4)中過濾出的濾液經(jīng)過三足離心過濾后，取濾液送真空減壓濃縮，再噴霧干燥，得到純度達(dá)到5%的小白菊內(nèi)酯。其中，所述真空減壓濃縮時(shí)的溫度采用微波加熱，至溫度為55 °C -60 °C。
[0016]將上述步驟(5)中分離得到的下層重液進(jìn)行真空減壓濃縮回收非極性有機(jī)試劑后，真空干燥至含水量小于5%，得到純度達(dá)到10%的小白菊內(nèi)酯；其中，真空減壓濃縮時(shí)真空度為0.08Mpa，溫度采用微波加熱升溫，至溫度為55°C -65°C ;真空干燥時(shí)的溫度為55。。-60。。。
[0017]本文中提及的微波加熱升溫，是于現(xiàn)有真空減壓濃縮設(shè)備中裝設(shè)微波發(fā)射裝置(微波發(fā)射裝置為現(xiàn)有技術(shù))，以微波加熱代替?zhèn)鹘y(tǒng)的蒸汽加熱，在真空條件下，實(shí)現(xiàn)物料快速升溫蒸發(fā)。
[0018]本發(fā)明主要進(jìn)行了以下改進(jìn):
1、采用新鮮玉蘭葉為原料進(jìn)行小白菊內(nèi)酯的提取，減少有效成分的損失(結(jié)合參見圖1及圖2，圖1中箭頭所指玉蘭干葉的小白菊內(nèi)酯含量0.105%遠(yuǎn)低于圖2中箭頭所指鮮玉蘭葉的小白菊內(nèi)酯含量0.643%)ο新鮮玉蘭樹葉不僅有效成分含量高且價(jià)格便宜、來源廣泛、容易獲取，為工業(yè)化大批量生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
[0019]2、采用恒溫梯度串聯(lián)提取方法進(jìn)行小白菊內(nèi)酯的提取。恒溫梯度串聯(lián)提取是將3-5個(gè)提取罐串聯(lián)進(jìn)行浸提，前一提取罐浸提完成后，分離提取液加入到下一個(gè)提取罐繼續(xù)浸提，浸提過程是在恒溫條件下進(jìn)行，提取液中有效成分的濃度逐級(jí)梯度遞增，最終使提取液中有效成分的濃度達(dá)到最高水平。實(shí)際生產(chǎn)中，濾渣可進(jìn)行多次提取，且經(jīng)過2-3次重復(fù)提取后，可將第一提取罐中的物料更換為新原料，以第二提取罐為初始提取罐，加入新提取劑，依次浸提，此時(shí)，浸提次序變?yōu)榈诙?、第三、第四、第五、第一，第一提取罐最后浸提。按同樣的原理更換原料、浸提液及浸提次序，可使生產(chǎn)連續(xù)進(jìn)行。
[0020]采用恒溫梯度串聯(lián)提取方法，所串聯(lián)的罐越多，浸提次數(shù)越多，與每一罐分別提取的傳統(tǒng)工藝相比，在使用等量提取劑的情況下，提取效率可得到有效提高，且生產(chǎn)連續(xù)性好，后續(xù)濃縮、蒸發(fā)回收溶劑的效能也將提高，可有效降低生產(chǎn)成本。
[0021]3、采用微波加熱方式，即在一般真空減壓濃縮