人體爆發(fā)力水平檢測試劑盒和方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及基因檢測,具體涉及人體爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] 運(yùn)動能力的遺傳學(xué)規(guī)律為運(yùn)動員的科學(xué)選材提供了理論依據(jù),教練員可W根據(jù)不 同專項(xiàng)運(yùn)動員對運(yùn)動機(jī)能的不同要求,將郝些具有從事某些運(yùn)動特殊天賦的少年兒童選拔 出來,并給予科學(xué)的訓(xùn)練,使他們先天的能力得到充分的發(fā)揮和發(fā)展。因此,運(yùn)動員選材必 須根據(jù)不同運(yùn)動員的專項(xiàng)特征,W郝些遺傳度較高的指標(biāo)作為選材依據(jù),才能使運(yùn)動員選 材科學(xué)化。
[0003] 爆發(fā)力類項(xiàng)目主要包括短沖、跳躍、投擲和舉重四組項(xiàng)目,它們的突出特點(diǎn)是要求 運(yùn)動員在短暫的時間內(nèi),最大限度地發(fā)揮出體能潛力。該項(xiàng)群的生理特點(diǎn)是肌肉活動的強(qiáng) 度大,大腦皮層興奮過程占優(yōu)勢,并W無氧供能為主要供能形式,送些都是體能選材的依 據(jù)。
[0004] 傳統(tǒng)選材主要是依據(jù)形態(tài),家族遺傳,個人生理指標(biāo)等。但在面對青少年運(yùn)動員的 選材時,送些傳統(tǒng)方法不具有預(yù)判性,無法發(fā)掘個體真正的潛能。隨著分子生物學(xué)的日新月 異,人們發(fā)現(xiàn)基因與個體的運(yùn)動機(jī)能存在著天然的密切聯(lián)系。國內(nèi)外已經(jīng)有無數(shù)的文獻(xiàn)發(fā) 表,關(guān)注送一領(lǐng)域。在應(yīng)用層面上,國外發(fā)達(dá)國家已經(jīng)開始在專業(yè)運(yùn)動領(lǐng)域采取基因檢測的 手段來服務(wù)于體育人才的選拔和培養(yǎng)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 有鑒于此,本發(fā)明提供了一種人體爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒,該試劑盒對受測 者的相關(guān)基因進(jìn)行檢測,分析得到爆發(fā)力水平的基因基礎(chǔ),評估個體是否適合從事與爆發(fā) 力相關(guān)的體育項(xiàng)目,為專業(yè)體育機(jī)構(gòu)和教練提供選拔運(yùn)動員的科學(xué)依據(jù)。對于大眾健身鍛 煉來講,為個體提供個人潛在的運(yùn)動能力評估,幫助個體更好的選擇適合自身體質(zhì)條件的 的運(yùn)動項(xiàng)目,從而更有效合理的發(fā)揮自身優(yōu)勢,達(dá)到鍛煉目的。且PCR擴(kuò)增反應(yīng)在同一臺 PCR儀上同步進(jìn)行并具備檢測的高效性、特異性。
[0006] -種爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒,包括盒體及盒體內(nèi)單獨(dú)存放的試劑,存放的試 劑包括: (1)針對7個基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組(W下引物序列方向均為5'端至3' 端); 針對SNPrs699的引物組:
針對SNP rsl815739的引物組:
針對SNP rs 16892496的引物組:
針對SNP rs4253778的引物組:
針對SNP rs2010963的引物組:
針對SNP rs731236的引物組:
針對SNP rs 1800795的引物組
(2) PCR擴(kuò)增試劑; (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0007] 本發(fā)明提供的人體爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒的有益效果是;通過PCR引物的設(shè) 計(jì)使多個PCR擴(kuò)增反應(yīng)在同一臺PCR儀上同步進(jìn)行,對受測者的相關(guān)基因進(jìn)行檢測,并實(shí)現(xiàn) 檢測的高效性、特異性,分析得到爆發(fā)力水平的基因基礎(chǔ),評估個體是否適合從事與爆發(fā)力 相關(guān)的體育項(xiàng)目,為專業(yè)體育機(jī)構(gòu)和教練提供選拔運(yùn)動員的科學(xué)依據(jù)。對于大眾健身鍛煉 來講,為個體提供個人潛在的運(yùn)動能力評估,幫助個體更好的選擇適合自身體質(zhì)條件的的 運(yùn)動項(xiàng)目,從而更有效合理的發(fā)揮自身優(yōu)勢,達(dá)到鍛煉目的。
【附圖說明】
[0008] 圖I是反應(yīng)產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖。
【具體實(shí)施方式】
[0009] 爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒,包括盒體及盒體內(nèi)單獨(dú)存放的試劑,存放的試劑包 括: (1)針對7個基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組(W下引物序列方向均為5'端至3' 玉山\ 乂而): 針對SNPrs699的引物組:
(3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0010] 下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明提供的方法予W進(jìn)一步的說明。
[0011] 本實(shí)施例對測試者采用爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒同時檢測7個基因的SNP多 態(tài)位點(diǎn),并根據(jù)基因分型結(jié)果,分析得到爆發(fā)力水平的基因基礎(chǔ),評估個體是否適合從事與 爆發(fā)力相關(guān)的體育項(xiàng)目,為專業(yè)體育機(jī)構(gòu)和教練提供選拔運(yùn)動員的科學(xué)依據(jù)。對于大眾健 身鍛煉來講,為個體提供個人潛在的運(yùn)動能力評估,幫助個體更好的選擇適合自身體質(zhì)條 件的的運(yùn)動項(xiàng)目,從而更有效合理的發(fā)揮自身優(yōu)勢,達(dá)到鍛煉目的。
[0012] 使用到的爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒內(nèi)試劑由W下組成: 針對7個基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組(W下引物序列方向均為5'端至3'端); 針對SNPrs699的引物組:
(2) PCR擴(kuò)增試劑;IOXPCR緩沖液,該P(yáng)CR緩沖液為IOOmM Tris-肥I P冊.3, 500mM KC1,15mM MgC12 ;dNTPs混合物,該dNTPs混合物為H磯酸鳥嘿嶺脫氧核巧酸dGTP,H磯 酸腺嘿嶺脫氧核巧酸dATP,H磯酸胸腺嚼巧脫氧核巧酸dTTP,H磯酸胞嚼巧脫氧核巧酸 dCTP四種核巧酸,各組分濃度為2. 5mM ;5U/y 1熱啟動Taq酶。
[001引(3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑諒脂糖、TAE緩沖液、DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)、Goldview 染色液和DNA上樣緩沖液,該緩沖液W漠酪藍(lán)為指示劑稀釋至IX后使用。
[0014] 使用上述爆發(fā)力水平基因檢測試劑盒按如下步驟進(jìn)行檢測: (1)提取樣本基因組DNA。
[0015] 采集該測試者唾液,向l-2ml唾液樣品中加入500ul提取緩沖溶液,該DNA提取 緩沖溶液溶劑為50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化Cl,反復(fù)吹打混勻 后,SOOOXg離必5分鐘,棄去上清,此步驟重復(fù)一次;得到的沉淀中加入500ul裂解液, 該裂解液溶劑為50mM化is-肥lpH7.4,50mM化is-肥lpH7.4,150mM化Cl,lmM邸TA,l% Triton x-100,l%Sodium deoxycholate,0. 1%SDS,蛋白酶 K20mg/mL,徹底懸浮沉淀并 充分混勻后,室溫放置30分鐘,期間來回顛倒離必管數(shù)次;得到的混合液中,加入濃度為 lOmg/mLRNA酶的水溶液IOy L,37°C下靜置IOmin ;得到的上清液中,加入等體積苯酪-氯 仿混合溶液,苯酪和氯仿體積比為1 : 1,充分混勻,混合液4°C,12000 X g離必5分鐘,上清 液移入干凈離必管內(nèi);加入等體積苯氛-氯仿-異戊醇混合溶液,苯酪、氯仿和異戊醇體積 比為25 : 24 : 1,充分混勻后,4°C,12000Xg離必5分鐘,上清液移入干凈離必管內(nèi);加 入等體積氯仿-異戊醇混合溶液,充分混勻后,4°C,12000Xg離必5分鐘,上清液移入干 凈離必管內(nèi);加入0. 6倍體積的冰浴異丙醇溶液及0. 1倍的3mol/L醋酸鋼溶液,-2(TC靜 置60分鐘后,4°C,12000 X g離必10分鐘,棄上清液;得到的沉淀物中加入0. 5血70 %己醇 清洗沉淀物,4°C,12000 X g離必5分鐘,棄上清液,此步驟重復(fù)一次;得到的沉淀物自然風(fēng) 干,加入20 U