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小麥分子標(biāo)記及其在鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀中的應(yīng)用_3

文檔序號:9927869閱讀:來源:國知局
基因型小麥間的每穗小穗數(shù)無顯著差異;AlAl基因型小麥的單株穗數(shù)極顯著低 于A3A3基因型小麥,AlAl和A3A3基因型分別與A2A2基因型小麥的單株穗數(shù)無顯著差異; AlAl與A2A2基因型小麥的千粒重均顯著高于A3A3基因型小麥,AlAl與A2A2基因型小麥間的 千粒重?zé)o顯著差異。說明本發(fā)明中的CAPS-7A能夠在選育小麥具有優(yōu)異產(chǎn)量性狀中起作用。
[0092] 表3、小麥自然群體1中=種基因型產(chǎn)量相關(guān)性狀統(tǒng)計(jì)結(jié)果 「m〇q1
注:小寫和大寫字母分別代表不同基因型小麥之間性狀差異顯著(P<0.05)和極顯 著(P<0.01)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 小麥分子標(biāo)記在鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀中的應(yīng)用; 所述小麥分子標(biāo)記,為以小麥的基因組DNA為模板、采用引物對P進(jìn)行擴(kuò)增得到的DNA分 子;所述引物對P由名稱為pl和P2的單鏈DNA組成,所述pi為與小麥基因組DNA中序列1的第 70位上游特異結(jié)合的單鏈DNA,所述p2為與小麥基因組DNA中序列1的第241位下游特異結(jié)合 的單鏈DNA。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于:所述pl為序列4所示的單鏈DNA,所述p2為 序列5所示的單鏈DNA。3. 鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的引物對,為權(quán)利要求域2中所述引物對P。4. 鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的成套試劑,由權(quán)利要求1或2中所述引物對P與 限制性內(nèi)切酶Nco I組成。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用,或權(quán)利要求3所述的引物對,或權(quán)利要求4所述的成 套試劑,其特征在于:所述小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀為小麥千粒重、每穗小穗數(shù)和/或單株穗數(shù)。6. 鑒定或輔助鑒定小麥基因型的方法,所述基因型為A1A1基因型、A2A2基因型、A3A3基 因型、A1A2基因型、A1A3基因型和A2A3基因型,所述方法為下述L、M、N或0: L、 包括如下L1)和L2): L1)以待測小麥基因組DNA為模板,利用權(quán)利要求1或2中所述引物對P進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到 PCR產(chǎn)物; L2)檢測步驟L1)得到的PCR產(chǎn)物的序列,如果所述PCR產(chǎn)物含有XI所示的DNA片段但不 含有X2或X3所示的DNA片段,所述待測小麥為A1A1基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物含有所述 X2所示的DNA片段且不含有所述XI或所述X3所示的DNA片段,所述待測小麥為A2A2基因型小 麥;如果所述PCR產(chǎn)物含有所述X3所示的DNA片段且不含有所述XI或所述X2所示的DNA片段, 所述待測小麥為A3A3基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物含有所述XI和所述X2所示的DNA片段且 不含有所述X3所示的DNA片段,所述待測小麥為A1A2基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物含有所 述XI和所述X3所示的DNA片段且不含有所述X2所示的DNA片段,所述待測小麥為A1A3基因型 小麥;如果所述PCR產(chǎn)物含有所述X2和所述X3所示的DNA片段且不含有所述XI所示的DNA片 段,所述待測小麥為A2A3基因型小麥; 所述XI為序列1的第70位-第240位; 所述X2為序列2的第70位-第240位; 所述X3為序列3的第70位-第254位; M、 包括如下Ml)和M2): Ml)以待測小麥基因組DNA為模板,利用權(quán)利要求2中所述引物對P進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到PCR 產(chǎn)物; M2)檢測步驟Ml)得到的PCR產(chǎn)物的序列,如果所述PCR產(chǎn)物的序列為序列1,所述待測小 麥為A1A1基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物的序列為序列2,所述待測小麥為A2A2基因型小麥; 如果所述PCR產(chǎn)物的序列為序列3,所述待測小麥為A3A3基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物的序 列為序列1和序列2,所述待測小麥為A1A2基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物的序列為序列1和 序列3,所述待測小麥為A1A3基因型小麥;如果所述PCR產(chǎn)物的序列為序列2和序列3,所述待 測小麥為A2A3基因型小麥; N、 包括如下N1)和N2): N1)以待測小麥基因組DNA為模板,利用權(quán)利要求2中所述引物對P進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到PCR 產(chǎn)物,采用限制性內(nèi)切酶Ncol處理所述PCR產(chǎn)物得到酶切產(chǎn)物; N2)檢測步驟N1)得到的酶切產(chǎn)物的大小,如果所述酶切產(chǎn)物為一條294bp的DNA片段, 所述待測小麥為A1A1基因型小麥;如果所述酶切產(chǎn)物為兩條大小分別為215bp和79bp的DNA 片段,所述待測小麥為A2A2基因型小麥;如果所述酶切產(chǎn)物為兩條大小分別為229bp和78bp 的DNA片段,所述待測小麥為A3A3基因型小麥;如果所述酶切產(chǎn)物為三條大小分別為294bp、 215bp和79bp的DNA片段,所述待測小麥為A1A2基因型小麥;如果所述酶切產(chǎn)物為三條大小 分別為294bp、229bp和78bp的DNA片段,所述待測小麥為A1A3基因型小麥;如果所述酶切產(chǎn) 物為四條大小分別為215bp、79bp、229bp和78bp的DNA片段,所述待測小麥為A2A3基因型小 麥; 0、 檢測待測小麥基因組DNA中對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列,如果 對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列為01 ),所述待測小麥為A1A1基因型小麥; 如果對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列為02),所述待測小麥為A2A2基因型 小麥;如果對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列為03),所述待測小麥為A3A3基 因型小麥;如果對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列為所述01)和所述02),所 述待測小麥為A1A2基因型小麥;如果對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的DNA片段的序列為所 述01)和所述03),所述待測小麥為A1A3基因型小麥;如果對應(yīng)于序列1的第70位-第240位的 DNA片段的序列為所述02)和所述03),所述待測小麥為A2A3基因型小麥; 所述01)為序列1的第70位-第240位; 所述02)為序列2的第70位-第240位; 所述03)為序列3的第70位-第254位。7. 鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法,為下述1 )、2)或3): 1) 鑒定或輔助鑒定小麥千粒重性狀的方法,包括按照權(quán)利要求6所述方法鑒定待測小 麥的基因型,根據(jù)待測小麥的基因型確定所述待測小麥的千粒重性狀:A1A1基因型待測小 麥的千粒重高于或候選高于A3A3基因型待測小麥的千粒重,A2A2基因型待測小麥的千粒重 高于或候選高于A3A3基因型待測小麥的千粒重; 2) 鑒定或輔助鑒定小麥每穗小穗數(shù)性狀的方法,包括按照權(quán)利要求6所述方法鑒定待 測小麥的基因型,根據(jù)待測小麥的基因型確定所述待測小麥的每穗小穗數(shù)性狀:A1A1基因 型待測小麥的每穗小穗數(shù)小于或候選小于A3A3基因型待測小麥的每穗小穗數(shù),A2A2基因型 待測小麥的每穗小穗數(shù)小于或候選小于A3A3基因型待測小麥的每穗小穗數(shù); 3) 鑒定或輔助鑒定小麥單株穗數(shù)性狀的方法,包括按照權(quán)利要求6所述方法鑒定待測 小麥的基因型,根據(jù)待測小麥的基因型確定所述待測小麥的單株穗數(shù)性狀:A1A1基因型待 測小麥的單株穗數(shù)小于或候選小于A3A3基因型待測小麥的單株穗數(shù)。8. 權(quán)利要求1中所述小麥分子標(biāo)記。9. 下述I-VI中的任一種: 1、 權(quán)利要求3或5所述引物對在下述Z1-Z5任一種中的應(yīng)用; Z1、鑒定或輔助鑒定小麥基因型; Z2、制備鑒定或輔助鑒定小麥基因型產(chǎn)品; Z3、鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀;所述小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀為小麥千粒重、每穗小 穗數(shù)和/或單株穗數(shù); Z4、制備鑒定或輔助鑒定所述小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀產(chǎn)品; Z5、小麥育種; Π 、權(quán)利要求4或5所述成套試劑在上述Z1-Z5任一種中的應(yīng)用; ΙΠ 、權(quán)利要求6所述鑒定或輔助鑒定小麥基因型的方法在上述Z3或Z5中的應(yīng)用; IV、 權(quán)利要求7所述鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法在上述Z5中的應(yīng)用; V、 權(quán)利要求1中所述小麥分子標(biāo)記在上述Z5中的應(yīng)用; VI、 檢測權(quán)利要求1中所述小麥分子標(biāo)記的物質(zhì)在上述Z1-Z5任一種中的應(yīng)用。10.小麥育種方法,按照權(quán)利要求6所述的方法鑒定小麥的基因型,選擇A1A1基因型、 A2A2基因型或A3A3基因型的小麥作為親本進(jìn)行育種。
【專利摘要】本發(fā)明公開了小麥分子標(biāo)記及其在鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀中的應(yīng)用。本發(fā)明公開的小麥分子標(biāo)記,為以小麥的基因組DNA為模板、采用引物對P進(jìn)行擴(kuò)增得到的DNA分子;引物對P由名稱為p1和p2的單鏈DNA組成,p1為與小麥基因組DNA中序列1的第70位上游特異結(jié)合的單鏈DNA,p2為與小麥基因組DNA中序列1的第241位下游特異結(jié)合的單鏈DNA;根據(jù)小麥分子標(biāo)記對小麥進(jìn)行基因型分型,共可以得到三種均為純合型的基因型,即A1A1基因型、A2A2基因型和A3A3基因型。實(shí)驗(yàn)證明,小麥的A1A1、A2A2與A3A3基因型與小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀——每穗小穗數(shù)、單株穗數(shù)和千粒重相關(guān),可以用于在培育高產(chǎn)量小麥品種。
【IPC分類】C12Q1/68, C12N15/11
【公開號】CN105713990
【申請?zhí)枴緾N201610284832
【發(fā)明人】景蕊蓮, 徐偉娜, 張斌, 劉霞, 昌小平
【申請人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所
【公開日】2016年6月29日
【申請日】2016年4月29日
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