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一種檢測多肽中N,N-二異丙基碳二亞胺的方法與流程

文檔序號:11824168閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種檢測多肽中N,N-二異丙基碳二亞胺的方法,分別用pH≤5的溶液溶解待測多肽樣品和N,N-二異丙基碳二亞胺對照品制得供試品溶液和對照品溶液;采用液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法檢測供試品溶液中N,N-二異丙基碳二亞胺含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述pH≤5的溶液為含0.001mol/L~3mol/L鹽酸的有機溶劑水溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,所述有機溶劑為乙腈或甲醇,所述有機溶劑濃度為30%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項所述的方法,所述多肽為奈西立肽。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項所述的方法,所述溶解還包括超聲處理后靜置的步驟,所述超聲處理后時間為1min,所述靜置時間為2小時。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意一項所述的方法,所述液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法中色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱,流動相A為水,流動相B為乙腈。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意一項所述的方法,所述液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法中色譜柱為氧化硅柱,流動相A為乙腈,流動相B為1%的甲酸。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意一項所述的方法,所述液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法中梯度洗脫程序為

時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)09010105050119090209010

。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任意一項所述的方法,所述液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法中檢測波長為210nm,離子流提取范圍為144-146Da。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任意一項所述的方法,所述液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法中色譜柱柱溫為20℃~40℃之間,液相流速為0.8ml/min~1.2ml/min,進質(zhì)譜的流速為0.2ml/min~0.4ml/min,液相檢測器為紫外檢測器,質(zhì)譜檢測器為 ESI源離子阱質(zhì)譜儀,離子源溫度為200℃,離子傳輸管溫度320℃,鞘氣流30au,噴霧電壓3KV,輔氣0au,偏轉(zhuǎn)電壓80V,正離子模式。

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