欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

一種微囊藻毒素-LR定量快速檢測傳感器的制備及應(yīng)用的制作方法

文檔序號:12453964閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種微囊藻毒素-LR定量快速檢測傳感器的制備方法,其特征是該檢測傳感器為阻抗型電化學(xué)傳感器,由CHI760C型電化學(xué)工作站,三電極體系:免疫電極為工作電極,飽和甘汞標(biāo)準(zhǔn)電極為參比電極,鉑絲電極為對電極組成;將L-半胱氨酸、膠體金、微囊藻毒素抗體復(fù)合物依次分別包被于裸金電極表面制成免疫電極作工作電極即為藻毒素傳感器;步驟為:

(1)電極清洗

先將Φ=2mm金電極置于Piranha溶液中浸泡10min,再用0.3μm和0.05μm的Al2O3拋光粉將電極表面拋光成鏡面,最后分別用金電極等量的硝酸、無水乙醇、超純水超聲清洗5min,氮?dú)獯蹈桑糜?℃冰箱備用;

(2)電極的修飾

選擇L-半胱氨酸-納米金作為自組裝方式,將清洗好的Au電極浸入到pH為5.0的0.5%的L-半胱氨酸L-Cys中室溫下浸置5h,取出用超純水洗凈得到L-Cys修飾的Au電極,然后浸入納米金溶膠溶液中4℃自組裝12h;

所述納米金溶膠的配置:用新制雙蒸水配制100mL質(zhì)量濃度為0.01%氯金酸溶液,置于錐形瓶中,用恒溫電磁攪拌器加熱至沸,在100r/min磁力攪拌下,迅速加入預(yù)先在37℃保溫的質(zhì)量濃度1%檸檬酸三鈉溶液4.5mL,保持溫度和轉(zhuǎn)速不變,繼續(xù)攪拌加熱15min,直至溶液呈現(xiàn)清亮的酒紅色,室溫冷卻,4℃冰箱保存?zhèn)溆茫?sub />

(3)檢測抗體的包被

藻毒素-LR—KLH免疫得到藻毒素-LR多抗;

用超純水充分清洗nano-Au/L-Cys/Au修飾電極,然后電極表面滴加10μL500μg/L的藻毒素-LR多抗溶液,37℃恒溫恒濕溫育60min后取出,最后滴加10μL含有1%BSA的PBS溶液,37℃恒溫恒濕培育30min后取出,用PBS洗滌,制得的免疫電極作工作電極即為藻毒素傳感器,利用電化學(xué)工作站CHI760C,進(jìn)行樣品中藻毒素的檢測,未立即使用的免疫電極需用氮?dú)獯蹈珊?,置于pH7.4的PBS中于4℃保存待用。

2.如權(quán)利要求1所述方法制備的微囊藻毒素-LR定量快速檢測傳感器產(chǎn)品的應(yīng)用方法,其特征是:

(1)繪制檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線:

取出已制備好的MC-LR免疫電極,平衡至室溫,按照濃度從低到高的順序,在電極表面依次滴加10μL不同濃度的MC-LR標(biāo)準(zhǔn)溶液,并分別于37℃下孵化15min后,PBS洗凈吹干,均采用循環(huán)伏安法CV,交流阻抗法EIS于[Fe(CN)6]3-/4-探針電解液中測定工作電極界面的變化,并對電極表面抗體的固定效果進(jìn)行表征;CV的測試條件:電壓-0.2~0.6V,掃描速度0.1V/S,掃描至穩(wěn)定;EIS的測試條件:初始電位為0.2V,振幅0.05V,頻率范圍為1~100kHz,靜置時(shí)間2s,所有測試均在室溫下進(jìn)行,檢測時(shí)間為3min;

(2)純凈水,礦泉水,自來水出口水的檢測:

水樣無需前處理,直接進(jìn)行測定,取10μL待測水樣,滴加于免疫電極表面,37℃恒溫恒濕培育15min,PBS洗凈吹干,采用循環(huán)伏安法CV,交流阻抗法EIS于[Fe(CN)6]3-/4-探針電解液中進(jìn)行測定,測定條件同上;

(3)天然湖泊水,污水,自來水的檢測:

由有機(jī)玻璃深水采樣器進(jìn)行采樣,采水深度為0.5m以下,采樣量為5L;經(jīng)砂芯漏斗去除大顆粒雜質(zhì),再經(jīng)過0.45μm濾膜減壓過濾,于-20℃低溫冰箱中保存待檢;吸取樣液10μL,滴加于免疫電極表面,37℃恒溫恒濕培育15min后,PBS洗凈吹干,采用循環(huán)伏安法CV,交流阻抗法EIS于[Fe(CN)6]3-/4-探針電解液中進(jìn)行測定,測定條件同上;

(4)等效電路計(jì)算:計(jì)算公式為:

ΔRet=Ret(Ab-Ag)-Ret(Ab)]]>

Ret(Ab):免疫電極封閉后的電子傳遞阻抗值;

Ret(Ab-Ag):免疫電極與MC-LR標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)后的電極電子傳遞阻抗值;

反應(yīng)前后電子傳遞阻抗的變化值;

以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(C)為橫坐標(biāo),阻抗變化值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并根據(jù)樣液實(shí)測阻抗變化值計(jì)算水樣中微囊藻毒素-LR濃度。

當(dāng)前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點(diǎn)贊!
1
维西| 沾益县| 康保县| 长岛县| 商城县| 新余市| 绥江县| 九江市| 临清市| 木兰县| 永嘉县| 太湖县| 大英县| 耒阳市| 洮南市| 漳州市| 蒙自县| 即墨市| 庐江县| 宿松县| 武义县| 金华市| 樟树市| 巩留县| 津南区| 菏泽市| 昌黎县| 青田县| SHOW| 资阳市| 长泰县| 家居| 南丰县| 临城县| 和田市| 正阳县| 吉木乃县| 化德县| 方城县| 鹰潭市| 吉首市|