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一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法與流程

文檔序號(hào):12592827閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟1:儀器與試劑的準(zhǔn)備:激光解析電離質(zhì)譜,正離子模式檢測(cè),只有信噪比大于10的質(zhì)譜信號(hào)用于定性和定量分析;

步驟2:制備含鐵氧化物納米顆?;|(zhì),所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)的制備包括以下步驟:

2.1:將三氯化鐵和檸檬酸三鈉溶解在乙二醇溶液中;

2.2:在上述的混合溶液中加入乙酸鈉,并在室溫下超聲半小時(shí)直到溶液變成均相體系;

2.3:反應(yīng)在鐵氟龍高壓反應(yīng)釜中進(jìn)行,150-195攝氏度條件下反應(yīng)8小時(shí)以上,從而形成含鐵氧化物納米顆粒;

2.4:將步驟2.3中得到的所述含鐵氧化物納米顆粒用乙醇和去離子水反復(fù)沖洗,最后在62~70攝氏度下干燥以備使用;

2.5:將所述含鐵氧化物納米顆粒重懸在去離子水中,作為基質(zhì)使用;

步驟3:提取外泌體,將稀釋后的外泌體樣品點(diǎn)樣在靶板上,室溫下干燥;

步驟4:在所述外泌體樣品上點(diǎn)所述含鐵氧化物納米顆粒基質(zhì),室溫下干燥;

步驟5:對(duì)步驟4中得到的外泌體樣品進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè);

步驟6:對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析,得出結(jié)論。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)的直徑小于1μm,顆粒粒度均一,所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)具有粗糙表面。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述含鐵氧化物納米顆粒基質(zhì)為FexOy或其混合物,其中x為小于等于10,y為大于等于0小于等于10。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)的尺寸范圍為200nm~300nm。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)的所述粗糙表面由50nm以下的納米小球組成。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述含鐵氧化物納米顆?;|(zhì)的所述粗糙表面由直徑為5nm~8nm 的納米小球組成。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,對(duì)外泌體的稀釋倍數(shù)小于10000倍以得到所述外泌體樣品。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,所述外泌體包括血清,血漿和細(xì)胞中提取的外泌體。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,檢測(cè)分子量范圍為小于等于10000Da。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用質(zhì)譜檢測(cè)外泌體小分子代謝物的方法,其特征在于,檢測(cè)的分子包括糖類和氨基酸。

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