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針對TSH受體的自身抗體的檢測的制作方法

文檔序號:12511694閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.能夠在診斷自動裝置上施行的用于檢測針對TSH受體的刺激性自身抗體的方法,在所述方法中使患者樣品與結(jié)合在固相上的第一TSH受體嵌合體相接觸以便使在所述患者樣品中可能存在的針對TSH受體的刺激性自身抗體與所述第一TSH受體嵌合體相結(jié)合,讓所獲得的免疫復(fù)合物與第二TSH受體嵌合體進(jìn)行反應(yīng)以便使在所述患者樣品中可能存在的針對TSH受體的刺激性自身抗體額外地與所述第二TSH受體嵌合相結(jié)合,并且進(jìn)行用于檢測包含所述自身抗體的免疫復(fù)合物的反應(yīng),其特征在于,使用順磁性顆粒作為固相,所述第一和第二TSH受體嵌合體包含關(guān)于針對TSH受體的刺激性自身抗體的結(jié)合表位且在N-末端處與適合于使TSH受體分泌入細(xì)胞外空間中的蛋白質(zhì)相融合,并且所述第二TSH受體嵌合體具有給出信號的氨基酸序列或其他給出信號的標(biāo)記試劑以用于檢測所形成的免疫復(fù)合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其特征在于,所述第一和/或第二TSH受體嵌合體在N-末端處與人血清蛋白質(zhì),特別是白蛋白相融合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2之一的方法,其特征在于,所述第二TSH受體嵌合體在N-末端或C-末端處與分泌型堿性磷酸酶相融合。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一的方法,其特征在于,所述TSH受體嵌合體包含TSH受體的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基酸21至260,或者與SEQ ID No.5具有85%的同一性且結(jié)合刺激TSH受體的自身抗體的蛋白質(zhì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一的方法,其特征在于,所述TSH受體嵌合體包含TSH受體的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基酸21至418,特別是氨基酸21至330,其中可以將關(guān)于阻斷性或中性抗體的結(jié)合表位替換為另一受體的不顯示出與阻斷性或中性自身抗體的結(jié)合的相對等的序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5之一的方法,其特征在于,所述TSH受體嵌合體與SEQ ID No.4具有至少85%的同一性,或者與SEQ ID No.6具有至少85%的同一性,或者與SEQ ID No.7具有至少85%的同一性。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6之一的方法,其特征在于,所述給出信號的標(biāo)記試劑為分泌型堿性磷酸酶、螢火蟲或Gaussia螢光素酶或者過氧化物酶。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至6之一的方法,其特征在于,所述給出信號的標(biāo)記試劑為吖啶化合物或釕化合物或異硫氰酸熒光素化合物。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8之一的方法,其特征在于,在檢測刺激性自身抗體的情況下,將在TSH受體中的關(guān)于阻斷性和中性抗體的結(jié)合序列替換為另一受體的不導(dǎo)致各自另一種類型的自身抗體的結(jié)合的序列。

10.TSH受體嵌合體,其在N-末端處與血清蛋白質(zhì)相融合,包含關(guān)于針對TSH受體的刺激性自身抗體的結(jié)合表位,并且與SEQ ID No.2、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7具有至少85%的同一性。

11.固定在順磁性顆粒上的TSH受體嵌合體在診斷自動裝置上的橋式測定法中與另外一個TSH受體嵌合體一起用于檢測針對甲狀腺激素受體(TSH受體)的自身抗體的用途,所述固定在順磁性顆粒上的TSH受體嵌合體在N-末端處與血清蛋白質(zhì)相融合,包含關(guān)于針對TSH受體的刺激性自身抗體的結(jié)合表位,并且與SEQ ID No.2、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7具有至少85%的同一性。

12.固定在順磁性顆粒上的融合蛋白在用于測定針對甲狀腺激素受體(TSH受體)的自身抗體的橋式測定法中的用途,所述融合蛋白包含在N-末端處與血清蛋白質(zhì)相融合的野生型TSH受體的細(xì)胞外部分。

13.固定在順磁性顆粒上的融合蛋白在用于測定針對甲狀腺激素受體(TSH受體)的自身抗體的橋式測定法中的用途,所述融合蛋白包含在N-末端或C-末端處與分泌型堿性磷酸酶(SEAP)或其他分泌型蛋白質(zhì)相融合的野生型TSH受體的細(xì)胞外部分。

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