本發(fā)明涉及飼料添加劑效果的評估，具體指飼料抗氧化劑的效果評估方法，本方法能夠預(yù)測飼料抗氧化劑添加后飼料的保質(zhì)期，屬于飼料添加劑效果評價技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
飼料在存放過程中容易氧化哈敗。為了提高飼料的新鮮度，在飼料中添加飼料抗氧化劑已是普遍現(xiàn)象。但如何來評估飼料抗氧化劑的效果，并為生產(chǎn)實踐提供科學(xué)指導(dǎo)，目前尚無統(tǒng)一的國家標(biāo)準(zhǔn)。
目前，飼料添加劑企業(yè)和飼料企業(yè)在評估抗氧化劑效果時普遍采用的方法有：①過氧化值法：過氧化物是油脂氧化的中間產(chǎn)物，它會被進(jìn)一步氧化成醛、酮、酸等終產(chǎn)物。所以，過氧化值一般是先升后降，呈拋物線狀，單靠過氧化值的高低并不能說明問題。一般情況下，飼料添加劑企業(yè)或飼料企業(yè)都認(rèn)為過氧化值較低為好，但如果該值是峰值后的測定值，較低實際上表示氧化程度比測定值更加嚴(yán)重。此外，飼料添加劑企業(yè)或飼料企業(yè)一般是在一定條件下(一般40℃左右)存放飼料，每隔一個固定的時間(一般是一周、10天或半個月)測定一次過氧化值。該方法的問題是，在飼料存放早期，往往空白對照的飼料都未氧化哈敗，添加有抗氧化劑的試驗組就更不會氧化哈敗了，所以此時的過氧化值測定是白測了，大大增加了試驗的勞動強(qiáng)度，而且浪費(fèi)試驗資源。還有，按固定時間間隔去測定過氧化值，很難保證測定值都是在峰值前測定的。②酸價法：這是測定氧化終產(chǎn)物酸的方式，一般來說酸價越高，氧化程度越嚴(yán)重。③TBA值法：該方法測定的主要是終產(chǎn)物丙二醛，一般來說TBA值越高，氧化程度越嚴(yán)重。酸價法和TBA值法這兩種終產(chǎn)物的方法都屬于嚴(yán)重氧化下的產(chǎn)物，此時飼料的哈味早已出來，對于飼料企業(yè)來說，客戶早已要求退貨了，研究測定這樣的數(shù)據(jù)對飼料生產(chǎn)實踐無任何指導(dǎo)作用，只能用于純理論研究。④自然存放法：就是將飼料在常溫條件下存放，每隔一個固定的時間間隔(飼料添加劑企業(yè)或飼料企業(yè)一般選擇一周、10天或半個月)后，聞飼料的氣味，以無哈味或哈味較輕者為好。該方法與飼料生產(chǎn)實際情況極為相似，因此可靠度高，但是試驗周期太長，效率低下。此外，哈味隨溫度的升高而揮發(fā)性加快。試驗證明，在高溫下(如100℃)剛好能聞到的飼料哈味，將它自然冷卻至常溫后，就聞不到哈味了。因此，常溫下能聞到哈味時，說明飼料已經(jīng)氧化哈敗有一定的時間，說明該方法的準(zhǔn)確性也是有局限性的。⑤綜合法：有添加劑企業(yè)或飼料企業(yè)采用上述幾種方法中的二種或二種以上的方法進(jìn)行綜合評價，盡可能地提高準(zhǔn)確度，但效果依然不理想。比如氧化程度主要靠語文的程度副詞來區(qū)分(如未哈，哈味較輕，有哈味，哈味較重，哈味嚴(yán)重)，沒有可以量化的科學(xué)依據(jù)，不同人對哈味程度的感受能力是不一樣的，所以這為飼料企業(yè)準(zhǔn)確評估不同抗氧化劑的效果差異增加了不小的難度。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)對飼料抗氧化劑效果評估方法存在的上述不足，本發(fā)明的目的在于提供一種添加抗氧化劑后飼料抗氧化效果評估方法及飼料保質(zhì)期預(yù)測方法，本方法采用高溫加速氧化試驗來評估飼料抗氧化劑效果，具有哈敗程度可量化、可比性強(qiáng)、重復(fù)性好、可預(yù)測飼料添加抗氧化劑后在常溫下的保質(zhì)期。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：
添加飼料抗氧化劑后飼料常溫保質(zhì)期預(yù)測方法，按如下步驟進(jìn)行，
1)準(zhǔn)備基礎(chǔ)飼料和飼料抗氧化劑，所述基礎(chǔ)飼料為不包含飼料抗氧化劑的飼料產(chǎn)品；
2)試驗樣品的配置：將飼料抗氧化劑按行業(yè)規(guī)范添加量添加到基礎(chǔ)飼料中并混合均勻以構(gòu)成試驗樣品，以不添加任何飼料抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照樣；
3)恒溫箱開啟：將恒溫箱設(shè)定為預(yù)先確定的試驗溫度，開啟恒溫箱；
4)當(dāng)步驟3)的恒溫箱達(dá)到預(yù)設(shè)溫度并恒定后，將步驟2)所配置的試驗樣品和空白對照樣同時放入該恒溫箱內(nèi)，關(guān)好恒溫箱的門；
5)試驗計時開始：當(dāng)恒溫箱再次恒定到預(yù)設(shè)溫度時，試驗計時開始；
6)試驗觀察：從空白對照試驗樣品開始有哈味時起，每隔固定時間聞一次，至試驗樣品第一次聞到哈味時止；
7)添加飼料抗氧化劑后飼料常溫保質(zhì)期T：按如下公式進(jìn)行計算，
A-試驗樣品最后一次未聞到哈味所需要的時間，單位小時；
B-試驗溫度，單位℃；
C-常溫溫度，單位℃。
飼料抗氧化劑效果評估方法，按如下步驟進(jìn)行，
1)準(zhǔn)備基礎(chǔ)飼料和飼料抗氧化劑，所述基礎(chǔ)飼料為不包含飼料抗氧化劑的飼料產(chǎn)品；
2)試驗樣品的配置：將飼料抗氧化劑按行業(yè)規(guī)范添加量添加到基礎(chǔ)飼料中并混合均勻以構(gòu)成試驗樣品，以不添加任何飼料抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照樣；
3)恒溫箱開啟：將恒溫箱設(shè)定為預(yù)先確定的試驗溫度，開啟恒溫箱；
4)當(dāng)步驟3)的恒溫箱達(dá)到預(yù)設(shè)溫度并恒定后，將步驟2)所配置的試驗樣品和空白對照樣同時放入同一恒溫箱內(nèi)，關(guān)好恒溫箱的門；
5)試驗計時開始：當(dāng)恒溫箱再次恒定到預(yù)設(shè)溫度時，試驗計時開始；
6)試驗觀察：從空白對照試驗樣品開始有哈味時起，每隔固定時間聞一次，至試驗樣品第一次聞到哈味時止；
7)過氧化值的測定：在試驗樣品第一次聞到哈味時，測定試驗樣品的過氧化值，記錄測定結(jié)果；
8)預(yù)測保質(zhì)期T：按如下公式進(jìn)行計算，
A-試驗樣品最后一次未聞到哈味所需要的時間，單位小時；
B-試驗溫度，單位℃；
C-常溫溫度，單位℃；
9)試驗結(jié)果判定：以第一次聞到哈味所需要的時間、過氧化值、預(yù)測保質(zhì)期作為抗氧化效果的評價參數(shù)，第一次聞到哈味所需要的時間越長、過氧化值越低、預(yù)測保質(zhì)期越長，則抗氧化效果越好。
不同飼料抗氧化劑效果優(yōu)劣評價方法，按如下步驟進(jìn)行，
1)準(zhǔn)備基礎(chǔ)飼料和飼料抗氧化劑，所述基礎(chǔ)飼料為不包含飼料抗氧化劑的飼料產(chǎn)品；
2)試驗樣品的配置：將不同的飼料抗氧化劑按預(yù)定的添加量分別添加到相同的基礎(chǔ)飼料中并混合均勻以構(gòu)成與各飼料抗氧化劑對應(yīng)的試驗樣品，每個試驗樣品中基礎(chǔ)飼料量相同，不同的飼料抗氧化劑在行業(yè)規(guī)范添加量的基礎(chǔ)上，按照相同的添加成本換算成各自具體的添加量后進(jìn)行添加；以不添加任何飼料抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照樣；
3)恒溫箱開啟：將恒溫箱設(shè)定為預(yù)先確定的試驗溫度，開啟恒溫箱；
4)當(dāng)步驟3)的恒溫箱達(dá)到預(yù)設(shè)溫度并恒定后，將步驟2)所配置的所有試驗樣品和空白對照樣同時放入該恒溫箱內(nèi)，關(guān)好恒溫箱的門；
5)試驗計時開始：當(dāng)恒溫箱再次恒定到預(yù)設(shè)溫度時，試驗計時開始；
6)試驗觀察：從空白對照試驗樣品開始有哈味時起，每隔固定時間對所有試驗樣品和空白對照樣聞一次，至最后一個樣品第一次聞到哈味時止；
7)過氧化值的測定：在最后一個樣品第一次聞到哈味時，測定所有樣品的過氧化值，記錄測定結(jié)果；
8)預(yù)測保質(zhì)期T：按如下公式進(jìn)行計算，
A-試驗樣品最后一次未聞到哈味所需要的時間，單位小時；
B-試驗溫度，單位℃；
C-常溫溫度，單位℃；
D-步驟7)測得的需要計算預(yù)測保質(zhì)期的該試驗樣品的過氧化值，單位mmol/kg；
E-步驟7)測得的與需要計算預(yù)測保質(zhì)期的該試驗樣品在測定過氧化值時連續(xù)聞到哈味次數(shù)相同的包括其本身在內(nèi)的所有試驗樣品中過氧化值最低那個的過氧化值，單位mmol/kg；
如果沒有與之在測定過氧化值時連續(xù)聞到哈味次數(shù)相同的其他試驗樣品，則E值直接取D值，單位mmol/kg；
9)試驗結(jié)果判定：以最后一次未聞到哈味所需要的時間、過氧化值、預(yù)測保質(zhì)期作為抗氧化效果的評價參數(shù)，最后一次未聞到哈味所需要的時間越長、過氧化值越低、預(yù)測保質(zhì)期越長，則抗氧化效果越好。
所述試驗溫度為常溫至130℃。
所述試驗溫度為100℃時，步驟6)的固定間隔時間為2小時。如果試驗溫度為常溫，則步驟6)的固定間隔時間為10天。
相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下有益效果：
1、哈味的表示更具科學(xué)性和可比性。哈味的嚴(yán)重程度以連續(xù)聞到哈味的次數(shù)(實際以“+”數(shù)量多少，第一次聞到哈味以一個“+”表示，第二次聞到哈味以兩個“+”表示，以此類推)來表示，傳統(tǒng)方法用單純文字描述(如稍有哈味，有哈味，哈味較重，哈味重，哈味嚴(yán)重)，劃分依據(jù)含糊不清，僅憑語文程度副詞去感覺性判斷，新方法以數(shù)據(jù)量化每一個“+”的含義，更具可比性和科學(xué)性。
2、試驗觀察的起點更具目的性和針對性。傳統(tǒng)方法觀察周期是機(jī)械化的每周(或10天，或半個月)一次，不管樣品是否哈了，都會按固定時間去觀察和測定過氧化值。本方法以空白對照開始能聞到哈味為第一次的觀察起點(100℃一般需6-10h，常溫下需25-35天)，空白對照組都未哈就不用觀察，后面再每隔固定時間(100℃下2h，常溫下10天)觀察一次。
3、新方法便于比較效果，最大限度減少過氧化值出現(xiàn)在峰值之后的可能性。高溫下第一次能聞到的哈味，冷卻到常溫下是聞不到哈味的。利用溫度升高，分子運(yùn)動加速的原理，本發(fā)明采用高溫加快氧化的方法，提高了試驗的靈敏度，拉開了樣品結(jié)果的梯度，便于比較效果，還最大限度減少過氧化值出現(xiàn)在峰值之后的可能性。
4、降低了試驗勞動強(qiáng)度，減少了試驗資源的消耗，更加環(huán)保。傳統(tǒng)方法從試驗一開始就按固定的時間間隔去觀察和測定過氧化值，空白對照組都沒哈仍堅持要測過氧化值，增加了無謂的試驗工作量和勞動強(qiáng)度，增加了試驗資源的消耗。新方法以空白對照開始能聞到哈味為第一次的觀察起點，到試驗終點才測定一次過氧化值，減少了試驗勞動強(qiáng)度，減少了試驗資源的消耗。過氧化值測定所需的主要材料三氯甲烷(又稱氯仿)，對環(huán)境污染大，測定次數(shù)少些會更環(huán)保。
5、新方法可以預(yù)測樣品在常溫下的保存期。大多數(shù)化學(xué)反應(yīng)，其反應(yīng)速率隨溫度升高而增加。通常認(rèn)為溫度對濃度的影響可以忽略，因此反應(yīng)速率隨溫度的變化體現(xiàn)在速率常數(shù)隨溫度的變化上。實驗表明，對于均相熱化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)溫度每升高10K，其反應(yīng)速率變?yōu)樵瓉淼?～4倍，即k(T+10K)/k(T)≈2～4，該式由于是荷蘭化學(xué)家雅可比·范特霍夫(JacobusHendricusVan’tHoff)所發(fā)現(xiàn)，因此被稱為范特霍夫規(guī)則。經(jīng)反復(fù)試驗驗證，在本方法條件下的倍數(shù)為2～2.22左右，為了便于計算和提高保險系數(shù)，取值為2，基于此，本發(fā)明給出了保質(zhì)期的預(yù)測計算公式，可預(yù)測保質(zhì)期，更便于指導(dǎo)實際。
6、新方法為生產(chǎn)實踐提供明顯的指導(dǎo)作用。傳統(tǒng)方法通過聞哈味，測過氧化值，只能定性地得出不同樣品之間的哈敗程度，只能大致得出哪個樣品效果更好，對實際生產(chǎn)指導(dǎo)作用不大；新方法把樣品常溫下的預(yù)測保質(zhì)期與每一次的聞哈味、過氧化值的測定科學(xué)、緊密地結(jié)合起來，不僅可以定性，還可以定量計算，對實際生產(chǎn)有明顯的指導(dǎo)作用。
具體實施方式
本發(fā)明總體思想：將飼料抗氧化劑和基礎(chǔ)飼料混合形成試驗樣品，不加抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照樣；將試驗樣品和空白對照樣同時放入恒溫箱，在設(shè)定溫度下進(jìn)行氧化試驗，通常在高溫下加速氧化以提高試驗靈敏度，縮短試驗周期，最大限度減少過氧化值出現(xiàn)在峰值之后的可能性。在空白對照樣品出現(xiàn)哈味時，開始觀察記錄，直到最后一個樣品第一次聞到哈味時止，測定試驗樣品和空白對照樣品的過氧化值，再根據(jù)相關(guān)值通過計算可預(yù)測常溫下的保質(zhì)期。結(jié)果判定：以過氧化值較低、最后一次未聞到哈味所需要的時間較長、高溫下預(yù)測的常溫保質(zhì)期較長、常溫下實際統(tǒng)計的保質(zhì)期較長者，為抗氧化劑效果更好。
本發(fā)明具體操作時，以高溫加速氧化試驗為核心，同時輔以常溫存放試驗為驗證。為方便起見，下面分別說明。
一、高溫加速氧化試驗
其試驗步驟如下：
1)混合油脂的制備：動物油和植物油均為飼料級，按質(zhì)量比(動物油：植物油＝1:1)混合均勻，動物油需加熱融化后才能與植物油進(jìn)行混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2)飼料抗氧化劑樣品的準(zhǔn)備：如果飼料抗氧化劑樣品為現(xiàn)成的，只需要備好即可；如果飼料抗氧化劑需要自行配制，按既定的工藝與方法把飼料抗氧化劑配制好(適用于飼料抗氧化劑生產(chǎn)企業(yè)抗氧化劑的研發(fā)與效果評估)，現(xiàn)用現(xiàn)配。所有樣品編好號后備用。
3)基礎(chǔ)飼料的配制：配制玉米-豆粕型自配粉料(其中玉米、豆粕均為飼料級，粉碎成粉末，按質(zhì)量比玉米：豆粕＝2:1混合均勻)，通過逐級預(yù)混的方式添加4％的復(fù)合預(yù)混料(若想為某成品飼料做生產(chǎn)實踐指導(dǎo)，就添加該品種飼料對應(yīng)的預(yù)混料，其他情況可任選一種動物某一生長階段的成品預(yù)混料即可，從合格的預(yù)混料生產(chǎn)企業(yè)購買成品即可。復(fù)合預(yù)混料質(zhì)量精確至1g)，通過逐級預(yù)混的方式添加3％的步驟1)所制備的混合油脂(混合油脂質(zhì)量精確至1g)，最后所得的均勻混合物即為試驗的基礎(chǔ)飼料，現(xiàn)用現(xiàn)配。稱取該基礎(chǔ)飼料300克/份樣品(精確至1g)于若干塑料空白袋內(nèi)備用。
4)試驗樣品的制備：試驗組樣品通過逐級預(yù)混的方式按行業(yè)規(guī)范的添加量添加步驟2)所準(zhǔn)備的抗氧化劑樣品(抗氧化劑樣品質(zhì)量精確至0.0001g)，以不添加任何抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照。所有制備好的試驗樣品分別置于若干500ml燒杯中(所有燒杯杯口切忌任何覆蓋物遮擋，以保證試驗過程中有充足的氧氣可以氧化飼料)，并對應(yīng)編好樣品編號。
5)恒溫箱開啟：將恒溫箱溫度設(shè)定為高溫氧化試驗所確定的溫度，如100℃，開啟恒溫箱。
6)試驗樣品放入：當(dāng)步驟5)的恒溫箱達(dá)到預(yù)設(shè)溫度并恒定后，將步驟4)所制備的試驗樣品(包括空白對照樣)全部放入恒溫箱，關(guān)好恒溫箱的門。
7)試驗計時開始：當(dāng)放入試驗樣品后，恒溫箱再次恒定到預(yù)設(shè)溫度時，試驗計時開始。
8)試驗觀察：從空白對照試驗樣品開始有哈味時起(100℃下一般為6～10小時)，每隔固定時間(100℃為2小時)聞一次，至最后一個樣品第一次聞到哈味時止。每次觀察，在預(yù)先制定好的表格中(范本見表1)做好觀察記錄。表格中“+”的數(shù)量表示連續(xù)第幾次聞到有哈味，表格中“/”表示未聞到哈味。
表1抗氧化劑高溫加速氧化試驗測定結(jié)果統(tǒng)計
9)過氧化值的測定：在最后一個試驗樣品聞到哈味時，開始對試驗樣品(包括空白對照樣)進(jìn)行過氧化值測定。采用GB/T 5009.37中過氧化值“第一滴定法”或者GB/T 5538的方法進(jìn)行測定，一般用國際通用單位mmol/kg來表示，測定結(jié)果填入預(yù)先制定的表格中(范本見表1)。
10)預(yù)測保質(zhì)期：高溫加速氧化試驗可以預(yù)測常溫下的保質(zhì)期，根據(jù)范特霍夫規(guī)則，結(jié)合本方案反復(fù)試驗驗證，試驗溫度每降低10℃，對應(yīng)的保質(zhì)期約變?yōu)樵瓉淼?倍。
預(yù)測保質(zhì)期T：按如下公式進(jìn)行計算，
A-樣品最后一次未聞到哈味所需要的時間，單位小時；
B-試驗溫度，單位℃；
C-常溫溫度，單位℃；
D-步驟7)測得的需要計算預(yù)測保質(zhì)期的該試驗樣品的過氧化值，單位mmol/kg；
E-出現(xiàn)其他試驗樣品哈味與需要計算預(yù)測保質(zhì)期的該試驗樣品哈味相同時，取該哈味相同的所有樣品的過氧化值的最低值；如果沒有出現(xiàn)其他樣品與該樣品哈味相同，此時E值直接取D值，單位mmol/kg。樣品哈味相同指在測定過氧化值時，各試驗樣品連續(xù)聞到哈味次數(shù)相同，即最開始出現(xiàn)哈味的時間相同。
11)試驗結(jié)果判定：以未出現(xiàn)哈味的時間較長、過氧化值較低、預(yù)測保質(zhì)期較長者為抗氧化效果更好。
在上述多個抗氧化劑高溫加速氧化試驗進(jìn)行對比評價的基礎(chǔ)上，可以單獨(dú)進(jìn)行某抗氧化劑常溫保質(zhì)期的預(yù)測，或者某單一抗氧化劑效果的綜合評價。同樣需要空白對照樣，以確定試驗樣品聞哈味的開始時間點，只是在試驗樣品第一次出現(xiàn)哈味時就需要測定樣品的過氧化值。因為是關(guān)于抗氧化劑效果的評價，且預(yù)測保質(zhì)期公式也跟空白對照樣過氧化值沒有關(guān)系，所以空白對照樣過氧化值可以不測。如果需要對比試驗樣品和空白對照樣的過氧化值和保質(zhì)期，也可以獲得空白對照樣的過氧化值較和預(yù)測保質(zhì)期。
二、常溫存放試驗
其試驗步驟如下：
1)混合油脂的制備：動物油和植物油均為飼料級，按質(zhì)量比(動物油：植物油＝1:1)混合均勻，動物油需加熱融化后才能與植物油進(jìn)行混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2)飼料抗氧化劑樣品的準(zhǔn)備：如果飼料抗氧化劑樣品為現(xiàn)成的，只需要備好即可；如果飼料抗氧化劑需要自行配制，按既定的工藝與方法把飼料抗氧化劑配制好(適用于飼料抗氧化劑生產(chǎn)企業(yè)抗氧化劑的研發(fā)與效果評估)，現(xiàn)用現(xiàn)配。所有樣品編好號后備用。
3)基礎(chǔ)飼料的配制：配制玉米-豆粕型自配粉料(其中玉米、豆粕均為飼料級，粉碎成粉末，按質(zhì)量比玉米：豆粕＝2:1混合均勻)，通過逐級預(yù)混的方式添加4％的復(fù)合預(yù)混料(若想為某成品飼料做生產(chǎn)實踐指導(dǎo)，就添加該品種飼料對應(yīng)的預(yù)混料，其他情況可任選一種動物某一生長階段的成品預(yù)混料即可，從合格的預(yù)混料生產(chǎn)企業(yè)購買成品即可。復(fù)合預(yù)混料質(zhì)量精確至1g)，通過逐級預(yù)混的方式添加步驟1)所制備的混合油脂3％(混合油脂質(zhì)量精確至1g)，最后所得的均勻混合物即為試驗的基礎(chǔ)飼料，現(xiàn)用現(xiàn)配。稱取該基礎(chǔ)飼料300克/份樣品(精確至1g)于若干塑料空白袋內(nèi)備用。
4)試驗樣品的制備：試驗組樣品通過逐級預(yù)混的方式按行業(yè)規(guī)范的添加量添加步驟2)所準(zhǔn)備的抗氧化劑樣品(抗氧化劑樣品質(zhì)量精確至0.0001g)，以不添加任何抗氧化劑的基礎(chǔ)飼料作為空白對照。所有制備好的試驗樣品分別置于若干500ml燒杯中(所有燒杯杯口切忌任何覆蓋物遮擋，以保證試驗過程中有充足的氧氣可以氧化飼料)，并對應(yīng)編好樣品編號。
5)恒溫箱開啟：預(yù)先設(shè)定好試驗溫度為30℃，開啟恒溫箱。本發(fā)明設(shè)定的30℃比通常意義的常溫25℃略高，有兩個目的：一是取整數(shù)便于比較計算，二是略高于實際常溫，這樣驗證試驗結(jié)果比飼料廠實際生產(chǎn)存放會略差些，這樣的驗證試驗結(jié)果飼料廠能接受的話，生產(chǎn)實際就更沒問題，留了一點點保險系數(shù)。
6)試驗樣品放入：當(dāng)步驟5)的恒溫箱達(dá)到預(yù)設(shè)溫度并恒定后，將步驟4)所制備的試驗樣品全部放入恒溫箱，關(guān)好恒溫箱的門。
7)試驗計時開始：當(dāng)放入試驗樣品后，恒溫箱再次恒定到預(yù)設(shè)溫度時，試驗計時開始。
8)試驗觀察：從空白對照試驗樣品開始有哈味時起(一般為25～35天)，每隔10天聞一次，至最后一個樣品第一次聞到哈味時止。在試驗結(jié)束階段，為了統(tǒng)計詳細(xì)準(zhǔn)確的保質(zhì)期天數(shù)，可以結(jié)合實際經(jīng)驗數(shù)據(jù)，并每天聞一次，做好記錄。每次觀察，在預(yù)先制定好的表格中(范本見表2)做好觀察記錄。表格中“+”的數(shù)量表示連續(xù)第幾次聞到有哈味，表格中“/”表示未聞到哈味。
表2抗氧化劑常溫存放試驗測定結(jié)果統(tǒng)計
9)過氧化值的測定：采用GB/T 5009.37中過氧化值“第一滴定法”或者GB/T 5538的方法進(jìn)行測定，一般用國際通用單位mmol/kg來表示，測定結(jié)果填入預(yù)先制定的表格中(范本見表2)。
10)常溫保質(zhì)期：因為試驗條件與生產(chǎn)實踐極為接近，以試驗統(tǒng)計的未聞到哈味的存放天數(shù)作為常溫保質(zhì)期。
11)試驗結(jié)果判定：過氧化值較低、常溫保質(zhì)期較長者為抗氧化效果更好。
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明：
實施例一：
高溫加速氧化試驗：
1、試驗材料
玉米粉：飼料級，過20目篩，0.8kg。
豆粕粉：飼料級，過20目篩，0.4kg。
動物油：飼料級，18g。
植物油：飼料級，18g。
4％仔豬復(fù)合預(yù)混料：48g。
2、試驗樣品
飼料抗氧化劑樣品1，樣品2，樣品3。
3、主要試驗器材
恒溫培養(yǎng)箱：0-150℃，一臺。
500ml燒杯：若干。
分析天平(0～200g)1臺，精度0.0001g。
稱量勺1個。
塑料保鮮袋，若干。
電子天平(0～1000g)1臺，精度1g。
4、試劑
氯仿－冰乙酸混合液氯仿:冰乙酸＝1:1
飽和碘化鉀溶液：取碘化鉀10g，加水7ml，貯于棕色瓶中(用時新配)。
0.01mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取0.1mol/L的硫代硫酸鈉10ml，注入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度(用時新配)。
淀粉指示劑0.5％。
5、試驗基礎(chǔ)飼料配制
先把18g動物油加熱融化，然后加入18g植物油并混勻，即為36g混合油脂。用0.8kg玉米粉與0.4kg豆粕粉混合均勻，把48g復(fù)合預(yù)混料加入并混勻，然后把剛制備的36g混合油脂加入并混勻，即為試驗基礎(chǔ)飼料。將配置好的試驗基礎(chǔ)飼料按300g/份，一共稱取4份備用。
6、試驗樣品制備
將飼料抗氧化劑樣品1，樣品2，樣品3用分析天平各稱取0.0900g，分別加入3份已稱好的試驗基礎(chǔ)飼料中(即300g/噸飼料)，并混合均勻。另取一份未加任何飼料抗氧化劑的試驗基礎(chǔ)飼料作為空白對照。所有試驗樣品制作完畢，分別放置于500ml的燒杯中，并按飼料抗氧化劑的樣品編號作對應(yīng)編號。
7、試驗進(jìn)行
將恒溫培養(yǎng)箱設(shè)置為100℃，并恒溫，放入上述4個樣品，關(guān)閉恒溫箱箱門。待恒溫箱再次恒溫后，開始計時，當(dāng)試驗進(jìn)行到第7小時時，觀察發(fā)現(xiàn)空白對照開始有哈味了，其他都無哈味。然后每2小時觀察一次，至只有一個樣品無哈味時止，試驗結(jié)束。此時，所有樣品測定一次過氧化值。將所有的結(jié)果記錄下來(見表1)。
8、根據(jù)測試結(jié)果計算預(yù)測保質(zhì)期：
樣品1中A＝11；B＝100；C＝30；D＝2.85；E＝2.85；
樣品2中A＝11；B＝100；C＝30；D＝2.95；E＝2.85；
樣品3中A＝13；B＝100；C＝30；D＝2.60；E＝2.60；
樣品0中A＝5；B＝100；C＝30；D＝3.15；E＝3.15；對于空白樣，第一次聞到哈味的時間減去間隔時間(100℃為2小時)才是樣品最后一次未聞到哈味的時間；
樣品1預(yù)測保質(zhì)期：T＝11×5.33×1≈58天。
樣品2預(yù)測保質(zhì)期：T＝11×5.33×(1-0.10/2.85)≈56天。
樣品3預(yù)測保質(zhì)期：T＝13×5.33×1≈69天。
樣品0(空白)預(yù)測保質(zhì)期：T＝(7-2)×5.33×1≈27天。
將計算結(jié)果填入預(yù)先制定的表格(見表1)
9、結(jié)果判定
從試驗結(jié)果(見表1)來看，樣品3在100℃下保存了13小時，換算為常溫保存期可達(dá)69天，其過氧化值也是最低的，所以效果最好。而樣品1與樣品2質(zhì)量檔次非常接近，樣品1的過氧化值略低，效果稍好些，預(yù)測常溫保質(zhì)期比樣品2多2天。
實施例二：
常溫存放試驗：
1、試驗材料
玉米粉：飼料級，過20目篩，0.8kg。
豆粕粉：飼料級，過20目篩，0.4kg。
動物油：飼料級，18g。
植物油：飼料級，18g。
4％仔豬復(fù)合預(yù)混料：48g。
2、試驗樣品
飼料抗氧化劑樣品1，樣品2，樣品3。
3、主要試驗器材
恒溫培養(yǎng)箱：0-150℃，一臺。
500ml燒杯：若干。
分析天平(0～200g)1臺，精度0.0001g。
稱量勺1個。
塑料保鮮袋，若干。
電子天平(0～1000g)1臺，精度1g。
4、試劑
氯仿－冰乙酸混合液氯仿:冰乙酸＝1:1
飽和碘化鉀溶液：取碘化鉀10g，加水7ml，貯于棕色瓶中(用時新配)。
0.01mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取0.1mol/L的硫代硫酸鈉10ml，注入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度(用時新配)。
淀粉指示劑0.5％。
5、試驗基礎(chǔ)飼料配制
先把18g動物油加熱融化，然后加入18g植物油并混勻，即為36g混合油脂。用0.8kg玉米粉與0.4kg豆粕粉混合均勻，把48g復(fù)合預(yù)混料加入并混勻，然后把剛制備的36g混合油脂加入并混勻，即為試驗基礎(chǔ)飼料。將配置好的試驗基礎(chǔ)飼料按300g/份，一共稱取4份備用。
6、試驗樣品制備
將飼料抗氧化劑樣品1，樣品2，樣品3用分析天平各稱取0.0900g，分別加入3份已稱好的試驗基礎(chǔ)飼料中，并混合均勻。另取一份未加任何飼料抗氧化劑的試驗基礎(chǔ)飼料作為空白對照。所有試驗樣品制作完畢，分別放置于500ml的燒杯中，并按飼料抗氧化劑的樣品編號作對應(yīng)編號。
7、試驗進(jìn)行
將恒溫培養(yǎng)箱設(shè)置為30℃，并恒溫，放入上述4個樣品，關(guān)閉恒溫箱箱門。待恒溫箱再次恒溫后，開始計時，當(dāng)試驗進(jìn)行到第28天，觀察發(fā)現(xiàn)空白對照開始有哈味了，其他都無哈味。然后每10天觀察一次，至最后一個樣品無哈味時止，試驗結(jié)束。在試驗結(jié)束階段，為了統(tǒng)計詳細(xì)準(zhǔn)確的保質(zhì)期天數(shù)，可以結(jié)合實際經(jīng)驗數(shù)據(jù)，并每天聞一次，做好記錄。此時，所有樣品測定一次過氧化值。將所有的結(jié)果記錄下來(見表2)。
8、常溫保質(zhì)期
因為試驗條件與生產(chǎn)實踐極為接近，以試驗統(tǒng)計的未聞到哈味的存放天數(shù)作為常溫保質(zhì)期。將統(tǒng)計結(jié)果填入預(yù)先制定的表格(見表2)
9、結(jié)果判定
從試驗結(jié)果(見表2)來看，樣品3在30℃下保存了69天，時間最長，所以效果最好。而樣品1與樣品2質(zhì)量檔次非常接近，相差僅2天。
因為本發(fā)明常溫試驗跟高溫加速試驗除了試驗溫度不同外，飼料抗氧化劑、基礎(chǔ)飼料都一樣，通過表1和表2對比可以看出，高溫試驗預(yù)測得到常溫下的保質(zhì)期跟常溫試驗實際得到的保質(zhì)期非常接近，由此也說明本發(fā)明高溫加速氧化所預(yù)測的常溫保質(zhì)期是可信的，完全可以用于指導(dǎo)企業(yè)實際生產(chǎn)。
最后需要說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管申請人參照較佳實施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本技術(shù)方案的宗旨和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。