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一種H?HCG快速免疫診斷層析試紙及其制備方法與流程

文檔序號:12466885閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種H-HCG快速免疫診斷層析試紙,其特征在于:包括依次連接的樣本墊(1)、包被有檢測T線(31)與質(zhì)控C線(34)的硝酸纖維素膜(3)、吸樣墊(4),且所述樣本墊(1)、所述硝酸纖維素膜(3)、所述吸樣墊(4)依次搭接、粘貼在一支撐板(5)上。

2.如權(quán)利要求1所述一種H-HCG快速免疫診斷層析試紙,其特征在于:

還包括一結(jié)合墊(2),且所述結(jié)合墊(2)設(shè)置在所述樣本墊(1)與所述硝酸纖維素膜(3)之間,使得所述樣本墊(1)與所述結(jié)合墊(2)、所述硝酸纖維素膜(3)、所述吸樣墊(4)構(gòu)成單通道試紙。

3.如權(quán)利要求1所述一種H-HCG快速免疫診斷層析試紙,其特征在于:

還包括一纖維隔離薄膜(6)、一結(jié)合墊(2)和一加液墊(21),且所述纖維隔離薄膜(6)兩端分別搭接在所述樣本墊(1)、所述硝酸纖維素膜(3)上方,所述結(jié)合墊(2)兩端分別搭接在所述纖維隔離薄膜(6)、所述硝酸纖維素膜(3)上方,所述加液墊(21)兩端分別搭接在所述纖維隔離薄膜(6)、所述結(jié)合墊(2)上方,使得所述樣本墊(1)與所述纖維隔離薄膜(6),所述結(jié)合墊(2)、與所述加液墊(21)、所述硝酸纖維素膜(3)、所述吸樣墊(4)構(gòu)成雙通道試紙。

4.如權(quán)利要求2或3所述一種H-HCG快速免疫診斷層析試紙,其特征在于:所述結(jié)合墊(2)上設(shè)置有H-HCG特異性抗體B207或B152,所述硝酸纖維素膜(3)T線上包被有H-HCG特異性抗體B152或B207,所述質(zhì)控C線(34)含有羊抗鼠多克隆抗體;

或者,

所述結(jié)合墊(2)上設(shè)置有抗α-HCG或β-HCG的抗體,或者抗完整HCG抗體,或者設(shè)置有H-HCG特異性抗體B207或B152;檢測T線(31)由檢測線T1(32)、檢測線T2(33)組成,且所述檢測線T1(32)包被有抗α-HCG或β-HCG的抗體,或者抗完整HCG抗體、檢測線T2(33)上包被有H-HCG特異性抗體B152或B207,或者檢測線T1(32)上包被有H-HCG特異性抗體B152或B207,檢測線T2(33)上包被有抗α-HCG或β-HCG的抗體,或者抗完整HCG抗體,

或者,

適合于免疫競爭法,所述硝酸纖維素膜(3)T線上包被有H-HCG抗原或相反,結(jié)合墊(2)上設(shè)置有H-HCG抗原,T線上包被有H-HCG特異性抗體。

5.一種H-HCG快速免疫診斷層析試紙的制備方法,其特征在于:包括如下步驟:

①、樣本墊(1)的制備:配制樣本墊處理液,再將經(jīng)剪裁后的玻璃纖維膜或無紡布置于樣本墊處理液中室溫浸泡、烘干、備用;

②、結(jié)合墊(2)的制備:配制結(jié)合墊處理液、金標抗體,將結(jié)合墊原料置于結(jié)合墊處理液中室溫浸泡、烘干,再用劃膜噴金機將金標抗體噴于經(jīng)浸泡后的結(jié)合墊原料、烘干備用;

③、硝酸纖維素膜(3)包被:配制包被緩沖液,用包被緩沖液分別稀釋羊抗鼠多克隆抗體、抗α-HCG或β-HCG的抗體,或者抗完整HCG抗體、H-HCG特異性抗體B207或B152至0.1-20mg/ml,獲得質(zhì)控C線(34)、檢測線T1(32)、檢測線T2(33)或者質(zhì)控C線(34)、檢測線T2(33)、檢測線T1(32)、或者質(zhì)控C線(34)、檢測T線(31);

④、試紙的制備:

單通道試紙:在常溫的干燥室內(nèi),取所述支撐板(5),先將上述包被的所述硝酸纖維素膜(3)貼合于所述支撐板(5)的中部,再在硝酸纖維素膜(3)兩側(cè)分別粘貼所述結(jié)合墊(2)、所述吸樣墊(4),且在所述結(jié)合墊(2)與所述硝酸纖維素膜(3)相對的一側(cè)粘貼所述樣本墊(1),最后采用裁剪機剪切所述支撐板(5);

雙通道試紙:所述硝酸纖維素膜(3)一側(cè)粘貼所述吸樣墊(4),且所述吸樣墊(4)一側(cè)與所述硝酸纖維素膜(3)搭接,另一側(cè)邊緣與所述支撐板(5)平齊,所述硝酸纖維素膜(3)另一側(cè)與所述樣本墊(1)搭接,使得待測樣本依次通過所述樣本墊(1)、所述硝酸纖維素膜(3)、所述吸樣墊(4)形成第一水平流動通道;

將所述纖維隔離薄膜(6)兩端分別搭接在所述樣本墊(1)、所述硝酸纖維素膜(3)上方,所述結(jié)合墊(2)兩端分別搭接在所述纖維隔離薄膜(6)、所述硝酸纖維素膜(3)上方,所述加液墊(21)兩端分別搭接在纖維隔離薄膜(6)、所述結(jié)合墊(2)上方,使得檢測過程中緩沖液依次通過所述加液墊(21)、所述結(jié)合墊(2)、所述硝酸纖維素膜(3)、所述吸樣墊(4)形成第二水平流動通道,最后采用裁剪機剪切所述支撐板(5)。

6.如權(quán)利要求5所述制備方法,其特征在于:所述步驟①中,樣本處理液的制備方法為:稱取0.5g±0.05gBSA于燒杯中,加入70ml 10mM pH8.4硼酸鹽緩沖液溶解,加入吐溫-20,混勻,定容、濾膜過濾后備用。

7.如權(quán)利要求5所述制備方法,其特征在于:步驟②中,結(jié)合墊處理液的制備方法為:稱取0.1g±0.05gBSA,0.5g±0.05g海藻糖于燒杯中,加入70ml 10mM pH8.0硼酸鹽緩沖液溶解,加入吐溫-20,混勻、濾膜過濾后備用;所述金標抗體中含抗α-HCG或β-HCG的抗體,或者抗完整HCG抗體,或者H-HCG特異性抗體B207或B152。

8.如權(quán)利要求5所述制備方法,其特征在于:所述步驟③中,包被緩沖液的制備方法為:取海藻糖于燒杯中,加入PBS溶解后再加入甲醇,混勻、定容、濾膜過濾后備用。

9.如權(quán)利要求6至8所述制備方法,其特征在于:所述樣本墊(1)材料為玻璃纖維膜或無紡布;所述吸樣墊(4)由吸水濾紙構(gòu)成。

10.如權(quán)利要求6至8所述制備方法,其特征在于:所述結(jié)合墊(2)由5-100nm膠體金或5-800nm納米材料或乳膠顆粒或碳顆?;蚱渌l(fā)光染料或酶結(jié)合抗HCG抗體或H-HCG特異性抗體B207或B152組成,或引用或結(jié)合親和素、生物素;所述結(jié)合墊(2)中標記有特異性抗體的膠體金或纖維素納米顆粒,或者標記有特異性抗體的膠體金—纖維素納米顆粒,或二者中添加有親和素或生物素。

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