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一種檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒及其用途的制作方法

文檔序號:12746806閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,包括試劑R1和試劑R2,其特征在于:所述試劑R1包括緩沖液,無機鹽,表面活性劑,防腐劑,穩(wěn)定劑及干擾消除蛋白;所述試劑R2包括緩沖液,無機鹽,表面活性劑,防腐劑,穩(wěn)定劑及聚苯乙烯膠乳顆?;旌衔?;所述聚苯乙烯膠乳顆?;旌衔锝宦?lián)有抗血清淀粉樣蛋白SAA抗體;

所述聚苯乙烯膠乳顆?;旌衔餅榇笾睆骄郾揭蚁┠z乳顆粒和小直徑聚苯乙烯膠乳顆粒的混合物,所述大直徑聚苯乙烯膠乳顆粒平均粒徑為180nm~500nm,所述小直徑聚苯乙烯膠乳平均粒徑為32nm~82nm,大直徑聚苯乙烯膠乳顆粒:小直徑聚苯乙烯膠乳顆粒=1:(2-4)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:所述大直徑聚苯乙烯膠乳顆粒平均粒徑為180nm,所述小直徑聚苯乙烯膠乳平均粒徑為82nm,大直徑聚苯乙烯膠乳顆粒:小直徑聚苯乙烯膠乳顆粒=1:2。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:所述聚苯乙烯膠乳顆粒混合物交聯(lián)抗血清淀粉樣蛋白SAA抗體時采用的方法包括如下步驟:

(1)在緩沖液中清洗羧基化的大直徑聚苯乙烯膠乳顆粒和小直徑聚苯乙烯膠乳顆粒,用所述緩沖液重懸得到膠乳微粒;

(2)在所述膠乳微粒中加入EDC和sulfo-NHS,混勻使溶解,室溫反應(yīng),用緩沖液清洗反應(yīng)后的所述微粒,用所述緩沖液重懸;

(3)采用緩沖液溶解抗血清淀粉樣蛋白SAA抗體;

(4)將經(jīng)步驟(2)得到的所述微粒和經(jīng)步驟(3)得到的所述抗體進行混合,室溫反應(yīng);

(5)用緩沖液清洗經(jīng)步驟(4)處理后的所述微粒,并懸浮于含親水猝滅分子的偶聯(lián)緩沖液以封閉過量的反應(yīng)位點;

(6)清洗經(jīng)步驟(5)處理后的所述微粒,在緩沖液中重懸,得到偶聯(lián)上抗體的膠乳顆粒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:在所述步驟(1)中,所述重懸時加入分散劑,所述分散劑為陰離子表面活性劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:所述步驟(2)中,所述EDC和sulfo-NHS的使用濃度分別為20mg/mL和15mg/mL-18mg/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:所述步驟(4)中,所述親水猝滅分子為乙醇胺或Tris,濃度為100mM。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:所述緩沖液選自3-嗎啉-2-羥基丙磺酸、2-(N-嗎啡啉)乙磺酸、4-羥乙基哌嗪乙磺酸和3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸;所述表面活性劑選自曲拉通X-100,月桂酸聚氧乙烯酯,油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚;所述穩(wěn)定劑選自蔗糖、金屬絡(luò)合劑和抗氧化劑;所述干擾消除蛋白為Scantibodies公司的HBR阻斷劑;所述無機鹽選自氯化鈉,氯化鉀及硫酸鎂;所述防腐劑選自疊氮鈉、硫柳汞和Proclin 300。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:每1升試劑R1中各組分的用量為:緩沖液7-15g,表面活性劑1-5mL,防腐劑0.1-0.4mL,穩(wěn)定劑8-12g,干擾消除蛋白1-5mL,無機鹽5-15g,余量為水;

每1升試劑R2中各組分的用量為:包被SAA抗體的膠乳顆粒0.5-5g,緩沖液5-20g,表面活性劑1-4mL,防腐劑0.1-0.4mL,穩(wěn)定劑5-20g,無機鹽8-12g。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒,其特征在于:每1升試劑R1中各組分的用量為:緩沖液9.76g,表面活性劑3.6mL,防腐劑0.2mL,穩(wěn)定劑10g,干擾消除蛋白4mL,無機鹽9g,余量為水;

每1升試劑R2中各組分的用量為:包被SAA抗體的膠乳顆粒2.2g,緩沖液9.76g,表面活性劑2mL,防腐劑0.2mL,穩(wěn)定劑10g,無機鹽9g,余量為水。

10.如權(quán)利要求1-9任一項所述的檢測血清淀粉樣蛋白的試劑盒的用途,其特征在于:所述試劑盒用于檢測血清淀粉樣蛋白。

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