1.一種檢測海洋生物體內(nèi)塑料含量的方法,其特征在于:首先取被測海洋生物的肌肉組織或從食道到肛門括約肌之間的消化道組織,稱重后記錄生物組織質(zhì)量,并將其在烘箱中于60℃條件下恒溫烘干,將烘干至恒重后的生物組織在石英研缽中破碎,破碎后保證其粒徑范圍是5-10mm,稱取粉碎后的生物組織5-10g樣品加入500ml的玻璃燒杯中,加入25-50ml濃度為65%的濃硝酸,于電熱板上煮沸消解30min,加熱溫度的范圍是90-100℃,在加熱的過程中逐滴向燒杯中加入濃度為30%的雙氧水,直至獲得透明溶液,然后利用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)節(jié)透明溶液的pH值至中性,獲得消解液;
將上述消解液利用等密度區(qū)帶離心法處理,分離出不同密度的微塑料,具體操作步驟如下:首先在離心管中預(yù)先放置梯度介質(zhì)密度為1.36g/cm3的蔗糖溶液,然后將消解液放在梯度介質(zhì)的液面上,或者預(yù)先將消解液與密度為1.36g/cm3的梯度介質(zhì)混合后放入離心管中,將上述的離心管放入離心機(jī)中,在轉(zhuǎn)速4000轉(zhuǎn)/min 的條件下離心處理10-15min,形成不同密度梯度溶液層,不同密度的微塑料可以實現(xiàn)分離,
從離心處理后的離心管中定量獲取離心液,并在熒光顯微鏡下鏡檢、分離出能夠發(fā)出熒光的微塑料,進(jìn)行計數(shù),在全自動傅里葉變換紅外光譜顯微鏡下鏡檢、分離出不能發(fā)出熒光的微塑料,進(jìn)行計數(shù);可以獲得不同密度微塑料的數(shù)量,
將上述兩次計數(shù)結(jié)果相加,除以初始的生物組織質(zhì)量,獲得單位質(zhì)量內(nèi)海洋生物體內(nèi)的塑料含量,
結(jié)果計算:
生物體內(nèi)微塑料濃度=((n1+n2)×V))/m
n1:熒光顯微鏡下統(tǒng)計的微塑料數(shù)量(個)
n2:傅里葉變換紅外光譜顯微鏡下統(tǒng)計的微塑料的數(shù)量(個)
V:消解后獲得的消解液的體積(ml)
m:消解稱取的生物組織的重量(g)。