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液相色譜保留指數(shù)的建立及其在化合物定性方面的應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12268181閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種液相色譜保留指數(shù)的建立及其在化合物定性方面的應(yīng)用,其特征在于:在液相色譜中引入保留指數(shù)的概念,并通過(guò)氘代標(biāo)記物實(shí)現(xiàn)待測(cè)化合物保留時(shí)間的校正;具體步驟如下:

a、配制保留指數(shù)標(biāo)記物的混合溶液;

b、在標(biāo)準(zhǔn)色譜條件下,LC-MS/MS進(jìn)行標(biāo)記物的檢測(cè)并確定其保留指數(shù)值;

c、對(duì)新鮮煙葉液氮速凍,冷凍干燥并粉碎;

d、稱(chēng)取40~80 mg粉碎好的煙葉,在粉碎好的樣品中加入10~20 μL保留指數(shù)標(biāo)記物,之后加入提取溶劑0.75~1.5 mL,低溫超聲提??;保留指數(shù)標(biāo)記物的最終濃度為 10 ng mL-1;

e、冷凍離心,取上清液并過(guò)濾;

f、LC-MS/MS檢測(cè)上述上清液,并對(duì)溶液中所含化合物進(jìn)行定性分析;

g、液相色譜、質(zhì)譜條件如下:

Waters公司BEH-C18超高壓柱,規(guī)格2.1 mm×100 mm i.d., 1.7 μm;柱溫:40℃;正離子模式流動(dòng)相為:A:含0. 1%甲酸的水,B:含0. 1%甲酸的甲醇;流速:0.35 mL min-1;梯度洗脫:0 min:5%B,10min~12min:98%B,12.1min~15min:5%B;進(jìn)樣量:5 μL;

正離子模式:電噴霧離子源;掃描方式:正離子掃描;監(jiān)測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè);干燥氣溫度:180 ℃;干燥氣流速:11 L min-1;霧化器壓力:20 psi;鞘氣溫度:400 ℃;鞘氣流速:12 L min-1;毛細(xì)管電壓:3200 V;噴嘴電壓:0 V;駐留時(shí)間:50 ms。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液相色譜保留指數(shù)的建立方法及其在化合物定性方面的應(yīng)用,其特征在于:所述的保留指數(shù)標(biāo)記物為10個(gè)氘代化合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液相色譜保留指數(shù)的建立方法及其在化合物定性方面的應(yīng)用,其特征在于:所述的保留指數(shù)標(biāo)記物的保留指數(shù)的換算方法為1秒換算為RI 15,根據(jù)實(shí)驗(yàn)所測(cè)保留時(shí)間進(jìn)行換算。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液相色譜保留指數(shù)的建立方法及其在化合物定性方面的應(yīng)用,其特征在于:所述提取溶劑是濃度為80%的甲醇。

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