1.一種分子印跡在線固相萃取與液相色譜聯(lián)用檢測17β-雌二醇方法,其特征在于步驟如下:
1)17β-雌二醇分子印跡聚合物的制備:
5-30mL氯仿溶液中加入17β-雌二醇、γ-氨基丙基三乙氧基硅烷,磁力攪拌5-30min,再在混合液中加入0.1-0.3g活化硅球以及四乙氧基硅烷溶液,攪拌10-30min;最后加入1.0-5.0mL濃度為0.1mol L-1醋酸反應(yīng)5-10min后,40-70℃水浴孵化24h;洗脫后80℃下真空干燥10h得分子印跡聚合物MIP;
2)分子印跡在線固相萃取與液相色譜聯(lián)用流程:
A、取100-200mg步驟1)制備的分子印跡聚合物MIP填充到圓柱形不銹鋼預(yù)柱中,與高效液相色譜的六通閥相連;
B、以17β-雌二醇溶液作為標(biāo)準(zhǔn)溶液;將100mL17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液以1.5-2.5mL min-1的速度通過不銹鋼預(yù)柱,棄掉流出物;
C、使用超純水和色譜甲醇按照體積比2:3的混合溶液作為液相色譜的流動相;流動相以1.0mL min-1的流速反沖洗脫,分析物進入高效液相色譜儀,分析檢測;
D、分析檢測后,將流動相以1.0mL min-1的流速反沖洗脫MIP預(yù)柱5-10min;
3)配制不同濃度的17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液并重復(fù)步驟2)操作;以17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo),以色譜峰面積為縱坐標(biāo),繪制17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)曲線;
4)取待測環(huán)境水100mL,將待測環(huán)境水替換步驟2)中17β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液并按照步驟2)的流程進行檢測;根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出待測環(huán)境水中17β-雌二醇含量。
2.如權(quán)利要求1所述的一種分子印跡在線固相萃取與液相色譜聯(lián)用檢測17β-雌二醇方法,其特征在于所述四乙氧基硅烷溶液為17β-雌二醇:γ-氨基丙基三乙氧基硅烷:四乙氧基硅烷按摩爾比1:3:4-10的混合液。