本發(fā)明涉及淀粉檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體地講是一種淀粉含量測(cè)定方法，主要用于高糖肉制品中淀粉含量的定量測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》規(guī)定淀粉檢測(cè)分兩種方法，分別為酶水解法和酸水解法，水解前均需要先把試樣去除可溶性糖，去除可溶性糖用150ml乙醇(85％)分多次清洗。
《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》規(guī)定測(cè)定如下：首先標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液，計(jì)算出每10ml(甲液和乙液各5ml)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的量；然后再對(duì)試樣溶液預(yù)測(cè)，使消耗樣液體積與標(biāo)定酒石酸銅溶液所消耗的葡萄糖體積相近；最后對(duì)試樣溶液測(cè)定，得到樣液消耗的體積；最后用式(1)和式(2)計(jì)算出淀粉含量。
水解前把試樣用乙醇(85％)經(jīng)三次清洗去除可溶性糖，但對(duì)高糖肉制品，三次或多次清洗均不能徹底除去可溶性糖，殘留的這一部分糖也會(huì)參與酸水解產(chǎn)生還原性糖并與酒石酸銅溶液反應(yīng)，樣液溶液消耗量減少，測(cè)試結(jié)果則偏高。
在滴定法測(cè)定酶解后還原糖總量時(shí)，先后要經(jīng)過(guò)標(biāo)定酒石酸銅溶液、試樣溶液預(yù)測(cè)、對(duì)試樣溶液測(cè)定三個(gè)步驟，隨后用式(1)和式(2)兩個(gè)計(jì)算公式進(jìn)行多次計(jì)算，比較冗長(zhǎng)，對(duì)淀粉含量較低的肉制品的測(cè)定更為繁瑣，耗費(fèi)了較多的科研時(shí)間和成本。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中高糖肉制品中淀粉含量測(cè)定方法所存在的不足，提供一種適合高糖肉制品中淀粉含量的測(cè)定方法，具有可操作性強(qiáng)，較為簡(jiǎn)單，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定可靠，誤差小，反映客觀真實(shí)情況等優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的目的可以采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：
一種高糖肉制品中淀粉含量的測(cè)定方法，包括以下步驟：
1)除去可溶性脂肪：精確稱(chēng)取粉碎的高糖肉制品2～5g，加入乙醚并濾干，重復(fù)操作五次得到除脂樣品；
2)除去可溶性糖類(lèi)：向步驟1)所得到的除脂樣品中加入乙醇溶液并進(jìn)行超聲波輔助清洗得到混合液，將混合液濾干，重復(fù)操作三次得到除糖樣品；
3)酶法分解淀粉：向步驟2)得到的除糖樣品中加50mL水并沸水浴15min使淀粉糊化，然后冷卻至60℃加入淀粉酶20mL并于55℃～60℃水浴1h,每隔10min搖勻一次得到淀粉酶解液；
4)淀粉酶解檢測(cè)：取步驟3)得到的淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟進(jìn)行再加熱糊化，冷卻后加入20mL淀粉酶，繼續(xù)水浴保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止；
5)淀粉酶解液處理：將酶解完全的淀粉酶解液加熱至沸，冷卻并定容至250mL后混勻、過(guò)濾，棄初濾液；取50mL濾液并加入鹽酸溶液后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，然后用氫氧化鈉溶液中和至中性，定容至100ml，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣；
6)兩步測(cè)定還原糖的含量：取步驟5)中處理后的淀粉酶解液樣品，采用兩步測(cè)定法，測(cè)定樣品中可溶性糖的含量：
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱(chēng)取干燥至恒重的葡萄糖配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液；
②標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液：用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)10ml堿性酒石酸銅溶液進(jìn)行滴定，記錄每10ml堿性酒石酸銅溶液所消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，記錄葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均消耗體積V1；
③樣品溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，加入可加熱容器中，再加入10ml水和10ml樣品溶液，加玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，得出平均消耗體積V2；
④按如下公式計(jì)算試樣中淀粉含量：
式中：
X——試樣中淀粉的含量(g/100g)；
C——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中葡萄糖含量，單位為克每升(g/L)；
V1——標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
V2——試樣溶液測(cè)定所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
0.9——以葡萄糖換算成淀粉的換算系數(shù)；
m——稱(chēng)取試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
步驟2)中所述超聲波輔助清洗的條件為：頻率40KHz，時(shí)間10min，保護(hù)溫度25-30℃。
步驟6)中所述配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的過(guò)程為：精確至0.0001稱(chēng)取1g經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為g/L。
步驟6)中所述標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液的過(guò)程為：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于可加熱容器中，再加入10ml水和10ml空白液，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，記錄平均消耗體積V1。
步驟5)中所述氫氧化鈉溶液的濃度為200g/L。所述的鹽酸溶液為鹽酸分析純和水按照1:1的體積比混合制成。
步驟1)乙醚的添加量為20～40ml。
步驟2)所述的乙醇溶液為85％乙醇溶液，其添加量為40～60ml。
本發(fā)明技術(shù)方案的詳細(xì)過(guò)程為
1)除去可溶性脂肪：稱(chēng)取粉碎的高糖肉制品2～5g左右(精確到0.0001)，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，加入30ml乙醚并濾干，保留樣品，棄去濾液，重復(fù)五次；
2)除去可溶性糖類(lèi)：把上述除脂后的樣品轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，加入乙醇后進(jìn)行超聲波輔助清洗，用約50ml乙醇溶液(85％)清洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)，隨后將放置混合液的燒杯內(nèi)進(jìn)行超聲波清洗，條件為：頻率40KHz，時(shí)間10min，保護(hù)溫度25-30℃，然后再將燒杯內(nèi)混合液轉(zhuǎn)移原放濾紙的漏斗內(nèi)，濾干，重復(fù)三次。
3)酶法分解淀粉：將上述濾干殘留物轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，用50ml水洗濾紙，洗液倒入燒杯內(nèi)。隨后沸水浴15min使淀粉糊化，冷卻至60℃后加入淀粉酶20ml，然后在55℃～60℃水浴1h，每隔10min搖勻一次。
4)淀粉酶解檢測(cè)：取上述淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟，直至加碘不顯藍(lán)色為止。
5)淀粉酶解液處理：將酶解液加熱至沸，冷卻后轉(zhuǎn)移250ml容量瓶定容、混勻、過(guò)濾并棄初濾液。取50ml濾液置于250ml錐形瓶中，加入鹽酸溶液(1+1)后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，后用氫氧化鈉(200g/L)中和至中性，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶并定容，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣。
6)兩步測(cè)定還原糖的含量：取步驟5)中處理后的淀粉酶解液樣品，采用兩步測(cè)定法，測(cè)定樣品中可溶性糖的含量：
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取1g左右(精確至0.0001)經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為克每升(g/L)；
②標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml空白液，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，記錄平均消耗體積V1；
③樣品溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml樣品溶液，加玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，得出平均消耗體積V2；
④按如下公式計(jì)算試樣中淀粉含量：
式中：
X——試樣中淀粉的含量(g/100g)；
C——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中葡萄糖含量，單位為克每升(g/L)；
V1——標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
V2——試樣溶液測(cè)定所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
0.9——以葡萄糖換算成淀粉的換算系數(shù)；
m——稱(chēng)取試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》選擇含糖量高的樣品檢測(cè)淀粉含量做對(duì)照樣品與本發(fā)明測(cè)定方法所得出的樣品檢測(cè)淀粉含量進(jìn)行比較；
本發(fā)明的有益效果：
本發(fā)明高糖肉制品中淀粉含量的簡(jiǎn)易檢測(cè)方法，清洗可溶性糖前經(jīng)過(guò)三次超聲波處理，可有效減少肉制品中已有糖分的干擾，和未處理的對(duì)照相比，淀粉含量降低80％左右。在滴定法測(cè)定酶解后單糖總量時(shí)，僅需要兩步(標(biāo)定空白溶液和測(cè)定樣品溶液)和一個(gè)公式進(jìn)行結(jié)果計(jì)算，方法簡(jiǎn)單易操作，結(jié)果準(zhǔn)確。
具體實(shí)施案例
為了更好的理解與實(shí)施，下面結(jié)合實(shí)施詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1
1)除去可溶性脂肪：稱(chēng)取粉碎的高糖肉制品3.2657g(精確到0.0001)，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，加入30ml乙醚并濾干，保留樣品，棄去濾液，重復(fù)五次；
2)除去可溶性糖類(lèi)：把上述除脂后的樣品轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，加入乙醇后進(jìn)行超聲波輔助清洗，用約50ml乙醇(85％)清洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)，隨后將放置混合液的燒杯內(nèi)進(jìn)行超聲波輔助清洗，條件為：頻率40KHz，時(shí)間10min，保護(hù)溫度25-30℃，然后再將燒杯內(nèi)混合液轉(zhuǎn)移原放濾紙的漏斗內(nèi)，濾干，重復(fù)三次。
3)酶法分解淀粉：將上述濾干殘留物轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，用50ml水洗濾紙，洗液倒入燒杯內(nèi)。隨后沸水浴15min使淀粉糊化，冷卻至60℃后加入淀粉酶20ml，然后在55℃～60℃水浴1h，每隔10min搖勻一次。
4)淀粉酶解檢測(cè)：取上述淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟進(jìn)行再加熱糊化，冷卻后加入20mL淀粉酶，繼續(xù)水浴保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。
5)淀粉酶解液處理：將酶解完全的酶解液加熱至沸，冷卻后轉(zhuǎn)移250ml容量瓶定容、混勻、過(guò)濾并棄初濾液。取50ml濾液置于250ml錐形瓶中，加入鹽酸溶液(1+1)(1體積的鹽酸分析純+1體積水)后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，后用氫氧化鈉(200g/L)中和至中性，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶并定容，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣。
6)兩步測(cè)定還原糖的含量：取步驟5)中處理后的淀粉酶解液樣品，采用兩步測(cè)定法，測(cè)定樣品中可溶性糖的含量：
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取1.0008g(精確至0.0001)經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為克每升(g/L)；
②標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml空白液，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為11.90、11.80、11.90，記錄平均消耗體積V1為11.86；
③樣品溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml樣品溶液，加玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為11.60、11.50、11.50，得出平均消耗體積V2為11.53；
④按如下公式計(jì)算試樣中淀粉含量：
式中：
X——試樣中淀粉的含量(g/100g)；
C——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中葡萄糖含量，單位為克每升(g/L)；
V1——標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
V2——試樣溶液測(cè)定所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
0.9——以葡萄糖換算成淀粉的換算系數(shù)；
m——稱(chēng)取試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
表1超聲處理、兩步法測(cè)定高糖肉制品中淀粉含量
對(duì)照樣品的測(cè)定：按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》選擇含糖量高的樣品檢測(cè)淀粉含量做對(duì)照樣品；
用國(guó)標(biāo)方法所做對(duì)照中淀粉含量為2.8(g/100g)，用超聲處理、兩步法測(cè)定樣品的淀粉含量0.5(g/100g)與之相比降低82.1％。
實(shí)施例2
1)除去可溶性脂肪：稱(chēng)取粉碎的高糖肉制品3.0421g(精確到0.0001)，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，加入30ml乙醚并濾干，保留樣品，棄去濾液，重復(fù)五次；
2)除去可溶性糖類(lèi)：向上述除脂后放置漏斗內(nèi)的樣品加入50ml乙醇(85％)后清洗可溶性糖，濾干，棄去濾液，重復(fù)三次；
3)酶法分解淀粉：將上述濾干殘留物轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，用50ml水洗濾紙，洗液倒入燒杯內(nèi)。隨后沸水浴15min使淀粉糊化，冷卻至60℃后加入淀粉酶20ml，然后在55℃～60℃水浴1h，每隔10min搖勻一次。
4)淀粉酶解檢測(cè)：取上述淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟進(jìn)行再加熱糊化，冷卻后加入20mL淀粉酶，繼續(xù)水浴保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。
5)淀粉酶解液處理：將酶解完全的酶解液加熱至沸，冷卻后轉(zhuǎn)移至250ml容量瓶定容、混勻、過(guò)濾并棄初濾液。取50ml濾液置于250ml錐形瓶中，加入鹽酸溶液(1+1)(1體積的鹽酸分析純+1體積水)后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，后用氫氧化鈉(200g/L)中和至中性，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶并定容，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣。
6)兩步測(cè)定還原糖的含量：取步驟5)中處理后的淀粉酶解液樣品，采用兩步測(cè)定法，測(cè)定樣品中可溶性糖的含量：
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取1.0008(精確至0.0001)經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為克每升(g/L)；
②標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml空白液，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為11.80、11.80、11.90，記錄平均消耗體積V1為11.83；
③樣品溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml樣品溶液，加玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為10.00、9.90、9.90，得出平均消耗體積V2為9.93；
④按如下公式計(jì)算試樣中淀粉含量：
式中：
X——試樣中淀粉的含量(g/100g)；
C——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中葡萄糖含量，單位為克每升(g/L)；
V1——標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
V2——試樣溶液測(cè)定所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
0.9——以葡萄糖換算成淀粉的換算系數(shù)；
m——稱(chēng)取試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
表2未超聲處理、兩步法測(cè)定高糖肉制品中淀粉含量
對(duì)照樣品的測(cè)定：按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》選擇含糖量高的樣品檢測(cè)淀粉含量做對(duì)照樣品；
用國(guó)標(biāo)方法所做對(duì)照中淀粉含量為2.9(g/100g)，用超聲處理、兩步法測(cè)定樣品的淀粉含量2.8(g/100g)與之相比降低3.4％。
實(shí)施例3
1)除去可溶性脂肪：稱(chēng)取粉碎的高糖肉制品5.0000g(精確到0.0001)，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，加入30ml乙醚并濾干，保留樣品，棄去濾液，重復(fù)五次；
2)除去可溶性糖類(lèi)：把上述除脂后的樣品轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，加入乙醇后進(jìn)行超聲波輔助清洗，用約50ml乙醇(85％)清洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)，隨后將放置混合液的燒杯內(nèi)進(jìn)行超聲波輔助清洗，條件為：頻率40KHz，時(shí)間10min，保護(hù)溫度25-30℃，然后再將燒杯內(nèi)混合液轉(zhuǎn)移原放濾紙的漏斗內(nèi)，濾干，重復(fù)三次。
3)酶法分解淀粉：將上述濾干殘留物轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，用50ml水洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)。隨后沸水浴15min使淀粉糊化，冷卻至60℃后加入淀粉酶20ml，然后在55℃～60℃水浴1h，每隔10min搖勻一次。
4)淀粉酶解檢測(cè)：取上述淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟進(jìn)行再加熱糊化，冷卻后加入20mL淀粉酶，繼續(xù)水浴保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。
5)淀粉酶解液處理：將酶解完全的酶解液加熱至沸，冷卻后轉(zhuǎn)移100ml容量瓶定容、混勻、過(guò)濾并棄初濾液。取50ml濾液置于250ml錐形瓶中，加入鹽酸溶液(1+1)(1體積的鹽酸分析純+1體積水)后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，后用氫氧化鈉(200g/L)中和至中性，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶并定容，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣。
6)測(cè)定還原糖的含量測(cè)定：按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》中方法進(jìn)行測(cè)定，稍作改進(jìn)；
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取1.0000g(精確至0.0001)經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為克每升(g/L)；
②吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，加入10ml水，加入玻璃珠2粒，從滴定管中滴加約9ml葡萄糖，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份體積分別為11.80、11.85、11.90，取平均值11.85，則每10ml(甲液、乙液各5.0ml)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量為11.85(mg)；
③試樣溶液的預(yù)測(cè)：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，加入10ml水，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,保持沸騰狀態(tài)先快后慢從滴定管中滴加樣液，待溶液顏色變淺時(shí)，以每?jī)擅?滴的速度滴加，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下樣液消耗體積，結(jié)果按照公式1計(jì)算；
④試樣溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，加入10ml水，加入玻璃珠2粒，從滴定管加比預(yù)測(cè)體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶，使其在2min內(nèi)加熱至沸，保持沸騰狀態(tài)，以每?jī)擅?滴的速度滴加，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，平行三份分別為80.20、83.30、83.10，取平均值82.20，得出平均消耗體積。
同時(shí)量取50ml水及試樣處理時(shí)相同淀粉酶，按同一方法做實(shí)際空白試驗(yàn)；
⑤結(jié)果計(jì)算
試樣中還原糖的含量(以葡萄糖計(jì))按式(1)計(jì)算：
式中：X——試樣中還原糖的含量(以葡萄糖計(jì))，單位為克每百克(g/100g)；
A——堿性酒石酸銅溶液(甲液、乙液各半)，相當(dāng)于葡萄糖的含量，單位為毫克mg；
m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
V——測(cè)定時(shí)平均消耗試樣溶液體積，單位為毫升(ml)；
試樣中淀粉的含量按式(2)計(jì)算：
式中：X——試樣中淀粉的含量，單位為克每百克(g/100g)；
A1——10ml(甲液、乙液各5ml)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，單位為毫克mg；
A2——空白中葡萄糖的質(zhì)量，單位為毫克mg；
0.9——以葡萄糖換算為淀粉的換算系數(shù)；
m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
V——測(cè)定用試樣處理液的體積，單位為毫升(ml)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
表3超聲處理、國(guó)標(biāo)測(cè)定高糖肉制品中淀粉含量
對(duì)照樣品的測(cè)定：按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》選擇含糖量高的樣品檢測(cè)淀粉含量做對(duì)照樣品；
用國(guó)標(biāo)方法所做對(duì)照中淀粉含量為2.9(g/100g)，用超聲處理、國(guó)標(biāo)測(cè)定樣品的淀粉含量0.5(g/100g)與之相比降低82.8％。
實(shí)施例4
1)除去可溶性脂肪：稱(chēng)取粉碎的低糖肉制品2.9872g(精確到0.0001)，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，加入30ml乙醚并濾干，保留樣品，棄去濾液，重復(fù)五次；
2)除去可溶性糖類(lèi)：把上述除脂后的樣品轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，加入乙醇后進(jìn)行超聲波輔助清洗，用約50ml乙醇(85％)清洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)，隨后將放置混合液的燒杯內(nèi)進(jìn)行超聲波輔助清洗，條件為：頻率40KHz，時(shí)間10min，保護(hù)溫度25-30℃，然后再將燒杯內(nèi)混合液轉(zhuǎn)移原放濾紙的漏斗內(nèi)，濾干，重復(fù)三次。
3)酶法分解淀粉：將上述濾干殘留物轉(zhuǎn)移至250ml燒杯內(nèi)，用50ml水洗濾紙，洗液均倒入燒杯內(nèi)。隨后沸水浴15min使淀粉糊化，冷卻至60℃后加入淀粉酶20ml，然后在55℃～60℃水浴1h，每隔10min搖勻一次。
4)淀粉酶解檢測(cè)：取上述淀粉酶解液1滴加入1滴碘溶液進(jìn)行酶解效果檢測(cè)，如顯藍(lán)色則為淀粉酶解不完全，則需重復(fù)前一步驟，直至加碘不顯藍(lán)色為止。
5)淀粉酶解液處理：將酶解完全的酶解液加熱至沸，冷卻后轉(zhuǎn)移250ml容量瓶定容、混勻、過(guò)濾并棄初濾液。取50ml濾液置于250ml錐形瓶中，加入鹽酸溶液(1+1)后裝上冷凝回流器，沸水浴中回流1h，后用氫氧化鈉(200g/L)中和至中性，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶并定容，混勻得到處理后的淀粉酶解液樣品備用，同時(shí)做空白樣。
6)兩步測(cè)定還原糖的含量：取步驟5)中處理后的淀粉酶解液樣品，采用兩步測(cè)定法，測(cè)定樣品中可溶性糖的含量：
①配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取1.0008g(精確至0.0001)經(jīng)過(guò)98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水定容至1000ml，葡萄糖含量記為C，單位為克每升(g/L)；
②標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml空白液，加入玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為11.80、12.00、11.80，記錄平均消耗體積V1為11.86；
③樣品溶液測(cè)定：吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5.0ml，置于150ml錐形瓶中，再加入10ml水和10ml樣品溶液，加玻璃珠2粒，控制在2min加熱至沸,趁沸以每?jī)擅?滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄下消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作三份，消耗葡萄糖的體積分別為11.40、11.50、11.45，得出平均消耗體積V2為11.45；
④按如下公式計(jì)算試樣中淀粉含量：
式中：
X——試樣中淀粉的含量(g/100g)；
C——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液中葡萄糖含量，單位為克每升(g/L)；
V1——標(biāo)定堿性酒石酸銅空白溶液所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
V2——試樣溶液測(cè)定所消耗的葡萄糖體積，單位為毫升(ml)；
0.9——以葡萄糖換算成淀粉的換算系數(shù)；
m——稱(chēng)取試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
表4超聲處理、兩步法測(cè)定低糖肉制品中淀粉的含量
對(duì)照樣品的測(cè)定：按照《GB/T 5009.9-2008食品中淀粉的測(cè)定》選擇含糖量低的樣品檢測(cè)淀粉含量做對(duì)照樣品；
用國(guó)標(biāo)方法所做對(duì)照中淀粉含量為0.8(g/100g)，用超聲處理、兩步法測(cè)定樣品的淀粉含量0.6(g/100g)與之相比降低25.0％。
本實(shí)施案例中通過(guò)三次超聲處理有效減少了肉制品中已有糖分的干擾，兩步測(cè)定法的應(yīng)用，簡(jiǎn)化了步驟，如實(shí)反應(yīng)客觀真實(shí)情況，使結(jié)果更加準(zhǔn)確，可以滿(mǎn)足高糖肉制品中淀粉含量及其他肉制品中淀粉含量檢測(cè)日常工作需要。
以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)及其等效物界定。