本發(fā)明涉及物質分離檢測領域，具體地說涉及一種氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法。

背景技術：

松柏醇和芥子醇都是研究較少的化學物質，松柏醇的結構式見說明書附圖1，芥子醇的結構式見說明書附圖2，它們的許多理化性質都是未知的，并且它們是木質素代謝途徑中的關鍵中間代謝產物。研究松柏醇和芥子醇有利于更好的研究代謝途徑。

松柏醇和芥子醇屬于酚醇類化合物，松柏醇沸點為163-165℃，芥子醇沸點為384.7℃，其在常壓下沸點較低，另外，松柏醇和芥子醇的研究較少，常用的NIST庫中沒有松柏醇和芥子醇衍生化后的結構，現(xiàn)有技術中沒有合適的分離檢測手段，因此急需一種能夠有效分離檢測松柏醇和芥子醇方法。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種工藝簡單、檢測準確性高的氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法，該方法能夠填補NIST庫中松柏醇和芥子醇衍生化后結構的空白，構建松柏醇和芥子醇衍生化后GC-MS檢測質譜圖。

為了解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下技術方案：一種氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步驟：

(1)供試品的準備

將含有松柏醇和/或芥子醇的樣品溶于色譜級吡啶溶液中，得到樣品溶液，然后對樣品溶液進行衍生化處理，衍生化處理的具體過程為：加50～70μL鹽酸羥胺吡啶溶液，渦旋30～60s，然后在100℃的條件下肟化1.5～2.5h，之后加50～70μL BSTFA+TMCS(99:1)硅烷化試劑，渦旋30～60s，最后在100℃的條件下硅烷化1.5～2.5h，得待測樣品；

(2)供試品的分離檢測

對步驟(1)所得的待測樣品使用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分離檢測，氣相色譜和質譜的具體條件如下：

氣相色譜條件：色譜柱是長度為30m的DB-5石英毛細管柱，該色譜柱的內徑為250μm，膜厚0.25μm；不分流進樣，進樣量為1μL，進樣口溫度為300℃，離子源溫度240～270℃，接口溫度為240～270℃；

氣相色譜升溫程序：起始溫度40℃，保持4min，以15℃/min升至190℃，以4℃/min升至200℃，保持3min，以10℃/min升至240℃，保持5min，以10℃/min升至280℃，保持20min；

質譜條件：電噴霧電離(EI)源，全掃描方式，電子能量70eV；四極桿掃描范圍m/z33～780。

進一步地，衍生化條件為100℃的條件下肟化2h，100℃的條件下硅烷化2h。在實施本發(fā)明的過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在此條件下，衍生化的效果最好，后續(xù)檢測更加精準。

進一步地，松柏醇在氣相色譜中的保留時間為20.112min。

進一步地，芥子醇在氣相色譜中的保留時間為22.427min。

進一步地，松柏醇的主要離子峰為324.2、309.2、293.1、235.1、204.1、73.1.

進一步地，芥子醇的主要離子峰為354.2、339.2、323.2、293.1、265.1、234.1、204.1、73.1。

本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：

本發(fā)明應用氣相色譜-質譜聯(lián)用的方法分離檢測松柏醇和芥子醇，能夠有效地分離檢測松柏醇和芥子醇，并且確定了松柏醇保留時間為20.112min，主要離子峰為324.2、309.2、293.1、235.1、204.1、73.1，芥子醇保留時間為22.427min，主要離子峰為354.2、339.2、323.2、293.1、265.1、234.1、204.1、73.1，填補了NIST庫中松柏醇和芥子醇衍生化后結構的空白，構建了松柏醇和芥子醇衍生化后GC-MS檢測質譜圖，能夠用來分離檢測松柏醇和芥子醇，檢測準確性高；且本發(fā)明工藝簡單，容易實施，具有非常好的應用前景。

附圖說明

圖1為松柏醇結構式。

圖2為芥子醇結構式。

圖3為松柏醇待測樣品的GC-MS分離檢測離子流圖。

圖4為松柏醇待測樣品的GC-MS分離檢測質譜圖。

圖5為芥子醇待測樣品的GC-MS分離檢測離子流圖。

圖6為芥子醇待測樣品的GC-MS分離檢測質譜圖。

具體實施方式

下面結合實施例對本發(fā)明作進一步描述：

實施例1

一種氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步驟：

(1)供試品的準備

(a)應用分析天平分別準確稱取0.0010mg松柏醇和0.0010mg芥子醇；

(b)將稱得的松柏醇和芥子醇分別溶于2mL色譜級吡啶中，得到松柏醇標準品溶液和芥子醇標準品溶液；

(c)分別取100μL松柏醇標準品溶液和100μL芥子醇標準品溶液，然后分別進行衍生化處理，衍生化處理的具體過程為：加60μL鹽酸羥胺吡啶溶液(20mg鹽酸羥胺/mL吡啶，下同)，渦旋60s，然后在100℃的條件下肟化2h，之后加60μL BSTFA+TMCS(99:1)硅烷化試劑，渦旋60s，最后在100℃的條件下硅烷化2h，得到松柏醇待測樣品和芥子醇待測樣品；

(2)供試品的分離檢測

對步驟(1)所得的松柏醇待測樣品和芥子醇待測樣品分別使用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分離檢測，氣相色譜和質譜的具體條件如下：

氣相色譜條件：色譜柱是長度為30m的DB-5石英毛細管柱，該色譜柱的內徑為250μm，膜厚0.25μm；不分流進樣，進樣量為1μL，進樣口溫度為300℃，離子源溫度240～270℃，接口溫度為240～270℃；

氣相色譜升溫程序：起始溫度40℃，保持4min，以15℃/min升至190℃，以4℃/min升至200℃，保持3min，以10℃/min升至240℃，保持5min，以10℃/min升至280℃，保持20min；

質譜條件：電噴霧電離(EI)源，全掃描方式，電子能量70eV；四極桿掃描范圍m/z33～780。

(3)試驗結果解析

經過步驟(2)的測定后，對譜圖進行分析，得到供試品松柏醇和芥子醇氣相色譜-質譜聯(lián)用色譜圖，參見圖3至圖6，結果為：松柏醇在氣相色譜中的保留時間為20.112min，主要離子峰為324.2、309.2、293.1、235.1、204.1、73.1；芥子醇在氣相色譜中的保留時間為22.427min，主要離子峰為354.2、339.2、323.2、293.1、265.1、234.1、204.1、73.1。

實施例2

一種氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步驟：

(1)供試品的準備

(a)應用分析天平分別準確稱取0.0010mg松柏醇和0.0010mg芥子醇；

(b)將稱得的松柏醇和芥子醇溶于4mL色譜級吡啶中，得到混合標準品溶液；

(c)取100μL混合標準品溶液，然后進行衍生化處理，衍生化處理的具體過程為：加50μL鹽酸羥胺吡啶溶液，渦旋30s，然后在100℃的條件下肟化1.5h，之后加50μL BSTFA+TMCS(99:1)硅烷化試劑，渦旋30s，最后在100℃的條件下硅烷化1.5h，得到混合待測樣品；

(2)供試品的分離檢測

對步驟(1)所得的混合待測樣品使用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分離檢測，氣相色譜和質譜的具體條件如下：

氣相色譜條件：色譜柱是長度為30m的DB-5石英毛細管柱，該色譜柱的內徑為250μm，膜厚0.25μm；不分流進樣，進樣量為1μL，進樣口溫度為300℃，離子源溫度240～270℃，接口溫度為240～270℃；

氣相色譜升溫程序：起始溫度40℃，保持4min，以15℃/min升至190℃，以4℃/min升至200℃，保持3min，以10℃/min升至240℃，保持5min，以10℃/min升至280℃，保持20min；

質譜條件：電噴霧電離(EI)源，全掃描方式，電子能量70eV；四極桿掃描范圍m/z33～780。

(3)試驗結果解析

經過步驟(2)的測定后，對譜圖進行分析，結果與實施例1相同：松柏醇在氣相色譜中的保留時間為20.112min，主要離子峰為324.2、309.2、293.1、235.1、204.1、73.1；芥子醇在氣相色譜中的保留時間為22.427min，主要離子峰為354.2、339.2、323.2、293.1、265.1、234.1、204.1、73.1。

實施例3

一種氣質聯(lián)用分離檢測松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步驟：

(1)供試品的準備

(a)應用分析天平分別準確稱取0.0010mg松柏醇和0.0010mg芥子醇；

(b)將稱得的松柏醇和芥子醇溶于4mL色譜級吡啶中，得到混合標準品溶液；

(c)取100μL混合標準品溶液，然后進行衍生化處理，衍生化處理的具體過程為：加70μL鹽酸羥胺吡啶溶液，渦旋45s，然后在100℃的條件下肟化2.5h，之后加70μL BSTFA+TMCS(99:1)硅烷化試劑，渦旋45s，最后在100℃的條件下硅烷化2.5h，得到混合待測樣品；

(2)供試品的分離檢測

對步驟(1)所得的混合待測樣品使用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分離檢測，氣相色譜和質譜的具體條件如下：

氣相色譜條件：色譜柱是長度為30m的DB-5石英毛細管柱，該色譜柱的內徑為250μm，膜厚0.25μm；不分流進樣，進樣量為1μL，進樣口溫度為300℃，離子源溫度240～270℃，接口溫度為240～270℃；

氣相色譜升溫程序：起始溫度40℃，保持4min，以15℃/min升至190℃，以4℃/min升至200℃，保持3min，以10℃/min升至240℃，保持5min，以10℃/min升至280℃，保持20min；

質譜條件：電噴霧電離(EI)源，全掃描方式，電子能量70eV；四極桿掃描范圍m/z33～780。

(3)試驗結果解析

經過步驟(2)的測定后，對譜圖進行分析，結果與實施例1相同：松柏醇在氣相色譜中的保留時間為20.112min，主要離子峰為324.2、309.2、293.1、235.1、204.1、73.1；芥子醇在氣相色譜中的保留時間為22.427min，主要離子峰為354.2、339.2、323.2、293.1、265.1、234.1、204.1、73.1。

應當理解本文所述的例子和實施方式僅為了說明，并不用于限制本發(fā)明，本領域技術人員可根據(jù)它做出各種修改或變化，凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。