1.苦碟子注射液指紋圖譜檢查方法,其特征在于按如下步驟進行:
(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,色譜柱:Waters Symmetry C18 4.6 mm×250 mm,5μm;以乙腈為流動相A,0.2%磷酸溶液為流動相B,按下面中的規(guī)定進行梯度洗脫:
時間 分鐘 流動相A % 流動相B %
0~12 0→2 100→98
12~30 2→15 98→85
30~55 15→17 85→83
55~65 17→25 83→75
65~70 25→0 75→100
70~75 0 100
流速為1.0ml/min;檢測波長:260nm;柱溫為40℃,理論板數(shù)按木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷峰計算應不低于5000;
(2)參照物溶液的制備
取腺苷對照品、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷對照品和菊苣酸對照品,精密稱定,加25%甲醇溶液制成每1mL含腺苷5μg、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷150μg和菊苣酸60μg的混合溶液,即得;
(3)供試品溶液的制備:
取苦碟子注射液,用0.45 μm濾膜濾過,即得;
(4)測定法:
精密吸取參照物溶液與供試品溶液各5μL,注入液相色譜儀,測定,記錄75分鐘內的色譜峰,即得。