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一種仿刺參性別鑒定方法與流程

文檔序號:11912942閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:通過SDS-PAGE分離仿刺參體腔液上清中的蛋白,通過native-PAGE分離仿刺參體腔細胞破碎液上清中的蛋白,根據(jù)SDS-PAGE凝膠圖譜鑒定雄性仿刺參,根據(jù)native-PAGE后的酚氧化酶酶譜鑒定雌性仿刺參,所述雄性仿刺參體腔液上清SDS-PAGE凝膠圖譜中含有50kDa的蛋白條帶,所述雌性仿刺參體腔細胞破碎液上清酚氧化酶酶譜中含有3條酚氧化酶條帶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的仿刺參體腔液用量為100μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的仿刺參體腔液上清通過離心法獲得,離心條件為4℃、3500rpm、5min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的仿刺參體腔細胞破碎液上清通過4℃、3500rpm離心5min、10μL蒸餾水重懸、-20℃凍融2次、再4℃、12000rpm離心5min制備。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的SDS-PAGE凝膠為丙烯酰胺濃度為4%~6%的濃縮膠和濃度為10%~12%的分離膠。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的native-PAGE凝膠為丙烯酰胺濃度為4%~6%的濃縮膠和濃度為10%~12%的分離膠。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的SDS-PAGE的電泳條件為30mA恒電流電泳0.5h后60mA恒電流電泳至溴酚藍指示劑出膠。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的native-PAGE的電泳條件為20mA恒電流電泳3.0h。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的SDS-PAGE凝膠圖譜使用考馬斯亮藍R250染色。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的仿刺參性別鑒定方法,其特征在于:所述的native-PAGE后的酚氧化酶酶譜使用1.5%鄰苯二酚溶液發(fā)色。

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