本發(fā)明涉及食品
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種適合于大豆蛋白磷含量的測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
：按照國(guó)標(biāo)GB/T5009.87-2003食品中磷的測(cè)定用亞硫酸鈉、對(duì)苯二酚檢測(cè)磷，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，有異味，檢測(cè)人員頭痛、難受，必須戴上防毒面罩。為了保護(hù)檢驗(yàn)人員的身體健康，保護(hù)環(huán)境，不再使用亞硫酸鈉、對(duì)苯二酚有毒試劑，而使用抗壞血酸（維生素C）做還原劑，代替上述兩種試劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種適合于大豆蛋白磷含量的測(cè)定方法，測(cè)定過(guò)程不需要使用有毒試劑，保障了檢驗(yàn)人員的身體健康和工作環(huán)境。本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種適合于大豆蛋白磷含量的測(cè)定方法，其特征在于，包括了以下步驟：試樣消解：稱(chēng)取均勻大豆蛋白干樣0.1~0.5g或大豆蛋白濕樣2~5g并置于25ml消化管內(nèi)，向消化管內(nèi)加10ml硝酸-高氯酸混合酸并加蓋小漏斗，放置30min；將消化管置于電熱板上低溫緩緩加熱，待樣品溶解后，再升溫繼續(xù)消化，如樣品未消化完全而硝酸-高氯酸混合酸過(guò)少，取下消化管，冷卻至室溫，再補(bǔ)加幾毫升硝酸-高氯酸混合酸消化液，繼續(xù)置于電熱板上加熱消化，直至無(wú)色透明為止方可取下消化管冷卻，冷卻至室溫后再向消化管內(nèi)加6ml水并通過(guò)電熱板進(jìn)行加熱趕酸；然后取下消化管冷卻至室溫，將消化管內(nèi)部溶液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶，用水多次洗滌消化管，洗液倒入容量瓶，加水至50ml刻度，混勻，獲得試樣消化液；同時(shí)，取10ml硝酸-高氯酸混合酸，進(jìn)行消化，獲得空白溶液；試樣的測(cè)定：準(zhǔn)確吸取試樣消化液1~5ml及同量的空白溶液分別置于50ml容量瓶中，加入2ml鉬酸銨溶液，搖勻，加入1ml抗壞血酸溶液，搖勻，稀釋至50ml刻度，放置30min后，用1cm比色皿，以空白溶液調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于分光光度計(jì)660nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；將測(cè)定獲得的樣品吸光度導(dǎo)入至磷含量與吸光度的直線回歸方程中獲得磷的含量。所述的硝酸-高氯酸混合酸按照硝酸與高氯酸的體積比為4:1的比例混合獲得。該方法的測(cè)定原理：大豆蛋白樣品經(jīng)酸消解，在酸性條件下，磷與鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨，此化合物被抗壞血酸還原成藍(lán)色化合物—鉬藍(lán)，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)660nm處測(cè)定鉬藍(lán)的吸光度，其吸光度與磷的含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。本發(fā)明的有益效果是：通過(guò)該方法的測(cè)定過(guò)程不需要使用有毒試劑，保障了檢驗(yàn)人員的身體健康和工作環(huán)境。具體實(shí)施方式以下由特定的具體實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式，熟悉此技術(shù)的人士可由本說(shuō)明書(shū)所揭露的內(nèi)容輕易地了解本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)及功效。一種適合于大豆蛋白磷含量的測(cè)定方法，包括了以下步驟：首先對(duì)該測(cè)定方法中所使用的試劑進(jìn)行如下準(zhǔn)備：硝酸-高氯酸混合酸：硝酸-高氯酸混合酸按照硝酸與高氯酸的體積比為4:1的比例混合獲得；15%硫酸溶液：吸取15ml硫酸緩緩加入到80ml水中混勻，冷卻后用水稀釋至100ml；鉬酸銨溶液：稱(chēng)取5g鉬酸銨，用15%硫酸溶液稀釋至100ml；抗壞血酸溶液：稱(chēng)取5g抗壞血酸，加水溶解，稀釋至100ml，此溶液棕色瓶盛裝，4℃保存，如果變色則不得使用；磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100ug/ml：準(zhǔn)確稱(chēng)取105℃下干燥至恒重的磷酸二氫鉀（基準(zhǔn)）0.4394g，置于1000ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至1000ml刻度，混勻；磷標(biāo)準(zhǔn)使用液10ug/ml：準(zhǔn)確吸取10ml磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100ug/ml，置于100ml容量瓶中，加水，稀釋至100ml刻度，混勻；試樣消解：稱(chēng)取均勻大豆蛋白干樣0.1~0.5g或大豆蛋白濕樣2~5g并置于25ml消化管內(nèi)，向消化管內(nèi)加10ml硝酸-高氯酸混合酸并加蓋小漏斗，放置30min；將消化管置于電熱板上低溫緩緩加熱，待樣品溶解后，再升溫繼續(xù)消化，如樣品未消化完全而硝酸-高氯酸混合酸過(guò)少，取下消化管，冷卻至室溫，再補(bǔ)加幾毫升硝酸-高氯酸混合酸消化液，繼續(xù)置于電熱板上加熱消化，直至無(wú)色透明為止方可取下消化管冷卻，冷卻至室溫后再向消化管內(nèi)加6ml水并通過(guò)電熱板進(jìn)行加熱趕酸；然后取下消化管冷卻至室溫，將消化管內(nèi)部溶液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶，用水多次洗滌消化管，洗液倒入容量瓶，加水至50ml刻度，混勻，獲得試樣消化液；同時(shí)，取10ml硝酸-高氯酸混合酸，進(jìn)行消化，獲得空白溶液；試樣的測(cè)定：準(zhǔn)確吸取試樣消化液1~5ml及同量的空白溶液分別置于50ml容量瓶中，加入2ml鉬酸銨溶液，搖勻，加入1ml抗壞血酸溶液，搖勻，稀釋至50ml刻度，放置30min后，用1cm比色皿，以空白溶液調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于分光光度計(jì)660nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；將測(cè)定獲得的試樣吸光度導(dǎo)入至磷含量與吸光度的直線回歸方程中獲得磷的含量。其中磷含量與吸光度的直線回歸方程通過(guò)以下方法獲?。簻?zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)使用液0ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、8.0ml、10.0ml、15.0ml、20.0ml（相當(dāng)于含磷量0、10ug、20ug、50ug、80ug、100ug、150ug、200ug），置于50ml容量瓶中，加入2ml鉬酸銨溶液，搖勻，加入1ml抗壞血酸溶液，搖勻，用水稀釋至50ml刻度，搖勻。放置30min后，用1cm比色皿，以零管溶液調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于分光光度計(jì)660nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，計(jì)算直線回歸方程。含磷量與吸光度的測(cè)試結(jié)果：含磷量ug010205080100150200吸光度00.0340.0650.1790.2550.3340.4990.661結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定方法中獲得的試樣磷含量導(dǎo)入以下公式獲得試樣中磷的百分比含量：式中：X——試樣中磷的含量，%；m1——根據(jù)直線回歸方程計(jì)算的試樣待測(cè)液中磷的含量，ug；V1——試樣消化液定容總體積，ml；V2——測(cè)定用試樣消化液的體積，ml；m——試樣的質(zhì)量，g。該測(cè)定方法和國(guó)標(biāo)方法的結(jié)果比較：分別取不同含磷量的兩種產(chǎn)品，通過(guò)以上測(cè)定方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下：由此可以看出，本方法和國(guó)標(biāo)方法檢測(cè)結(jié)果基本一致。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)先實(shí)施方式，只要以基本相同手段實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的技術(shù)方案，都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3