本發(fā)明涉及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
在無(wú)菌醫(yī)療器械領(lǐng)域，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行滅菌是至關(guān)重要的步驟。環(huán)氧乙烷滅菌法是常用的滅菌方法之一，其原理是利用高濃度的有毒環(huán)氧乙烷氣體充滿產(chǎn)品所在空間，對(duì)產(chǎn)品所帶的各種微生物進(jìn)行殺滅。盡管滅菌過(guò)后會(huì)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行解析，但難免會(huì)有微量環(huán)氧乙烷的殘留，為了避免殘留的環(huán)氧乙烷在醫(yī)療器械使用過(guò)程中，對(duì)人體造成危害，需要對(duì)環(huán)氧乙烷殘留進(jìn)行檢驗(yàn)，以保證殘留量在安全范圍內(nèi)。
檢測(cè)環(huán)氧乙烷的殘留量，目前一般采用氣相色譜法檢測(cè)。通常采用液體進(jìn)樣檢測(cè)環(huán)氧乙烷時(shí)，由于進(jìn)樣量小(約1ul)，環(huán)氧乙烷濃度低，微小的進(jìn)樣量誤差就會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的較大誤差。同時(shí)，由于制樣過(guò)程中容易混入各種雜質(zhì)，隨進(jìn)樣過(guò)程進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)造成干擾。
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明由此而來(lái)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有技術(shù)液體進(jìn)樣檢測(cè)環(huán)氧乙烷的殘留量的誤差較大的缺陷，提供一種微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測(cè)方法，采用頂空氣體進(jìn)樣法進(jìn)行測(cè)試，由于進(jìn)樣介質(zhì)從液體改為氣體，可以顯著提升進(jìn)樣體積，減少進(jìn)樣量帶來(lái)的誤差，同時(shí)也避免了液體進(jìn)樣時(shí)雜質(zhì)過(guò)多的缺點(diǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案是，微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測(cè)方法，其包括如下步驟：
(1)繪制環(huán)氧乙烷的標(biāo)準(zhǔn)曲線
A.取適量環(huán)氧乙烷置于頂空氣相進(jìn)樣瓶中，加入適量的純化水，配制成環(huán)氧乙烷溶液，將溶液稀釋成梯度標(biāo)準(zhǔn)系列濃度，分別取各已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別裝入頂空進(jìn)樣瓶，
B.將裝有標(biāo)準(zhǔn)品溶液的密封頂空瓶放入60℃的恒溫水浴進(jìn)行預(yù)處理，使瓶?jī)?nèi)環(huán)氧乙烷蒸汽壓達(dá)到平衡，
C.用進(jìn)樣針抽取頂空瓶?jī)?nèi)上層氣體200μL～1000μL，進(jìn)樣，使用氣相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，記錄出峰時(shí)間和峰面積，
D.以不同的標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)以待測(cè)樣品為試樣，將樣品截成小段裝入頂空進(jìn)樣瓶，取與標(biāo)準(zhǔn)品溶液相同體積的純化水加入，采用步驟(1)中的B-C的方法，測(cè)定樣品的峰面積，對(duì)照前述的標(biāo)準(zhǔn)曲線算出樣品中環(huán)氧乙烷含量。
本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述步驟(1)中C，用進(jìn)樣針抽取頂空瓶?jī)?nèi)上層氣體500μL。
本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述步驟(1)中C，采用弱極性毛細(xì)柱對(duì)環(huán)氧乙烷進(jìn)行分離檢測(cè)。
本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述步驟(1)中C，采用安捷倫HP-5柱對(duì)環(huán)氧乙烷進(jìn)行分離檢測(cè)。
本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述步驟(1)中C，氣相色譜儀的檢測(cè)條件為：針對(duì)色譜柱的內(nèi)徑，將載氣，氫氣和空氣的氣壓均設(shè)置為0.12MPa，使檢測(cè)器能順利點(diǎn)火；測(cè)定的條件進(jìn)樣器溫度200℃，柱溫120℃，檢測(cè)器溫度250℃，在此溫度下目標(biāo)峰和雜峰能有效分開，且出峰時(shí)間較快，提高檢測(cè)效率，頂空瓶水浴的溫度設(shè)置為60℃，在此溫度下使環(huán)氧乙烷充分揮發(fā)至上層空氣中；分流比設(shè)置為5:1，目標(biāo)峰不至于拖尾，且具有較大的峰面積，便于積分計(jì)算。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：采用頂空進(jìn)樣法，將樣品放入裝有水的頂空進(jìn)樣瓶中浸提，在適當(dāng)?shù)臏囟认?，環(huán)氧乙烷會(huì)揮發(fā)至上部空氣，而其他沸點(diǎn)較高的雜質(zhì)則不易揮發(fā)，用進(jìn)樣器吸取上部空氣進(jìn)樣，進(jìn)樣量遠(yuǎn)大于液體進(jìn)樣，進(jìn)樣誤差小。使用安捷倫HP-5或類似極性的毛細(xì)柱，出峰時(shí)間早，且能夠與雜質(zhì)峰分離，提高了檢測(cè)速率。
附圖說(shuō)明
圖1為微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測(cè)方法一實(shí)施例的流程示意圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)上述方案做進(jìn)一步說(shuō)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例是用于說(shuō)明本發(fā)明而不限于限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中采用的實(shí)施條件可以根據(jù)具體廠家的條件做進(jìn)一步調(diào)整，未注明的實(shí)施條件通常為常規(guī)實(shí)驗(yàn)中的條件。
介紹和概述
本發(fā)明通過(guò)舉例而非給出限制的方式來(lái)進(jìn)行說(shuō)明。應(yīng)注意的是，在本公開文件中所述的“一”或“一種”實(shí)施方式未必是指同一種具體實(shí)施方式，而是指至少有一種。
下文將描述本發(fā)明的各個(gè)方面。然而，對(duì)于本領(lǐng)域中的技術(shù)人員顯而易見的是，可根據(jù)本發(fā)明的僅一些或所有方面來(lái)實(shí)施本發(fā)明。為說(shuō)明起見，本文給出具體的編號(hào)、材料和配置，以使人們能夠透徹地理解本發(fā)明。然而，對(duì)于本領(lǐng)域中的技術(shù)人員將顯而易見的是，本發(fā)明無(wú)需具體的細(xì)節(jié)即可實(shí)施。在其他例子中，為不使本發(fā)明費(fèi)解而省略或簡(jiǎn)化了眾所周知的特征。
實(shí)施例1
1.環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)液的配制
1.1在25ml的容量瓶中先稱取約20g水，并稱重，精確到0.1mg，用滴管吸取約50-100mg環(huán)氧乙烷，迅速加入瓶中，蓋緊瓶蓋，輕輕搖勻，稱重，精確到0.1mg。兩次的重量差為所加環(huán)氧乙烷的質(zhì)量，定容后作為母液，計(jì)算出母液中環(huán)氧乙烷濃度，放入冰箱待用。
1.2將母液分別稀釋，配制成環(huán)氧乙烷濃度為1μg/mL,2μg/mL,4μg/mL,6μg/mL,8μg/mL,10μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，取5g標(biāo)準(zhǔn)液裝入20mL頂空瓶中(每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液兩份)，放入60℃水浴鍋水浴30分鐘。
2.試樣制備
試驗(yàn)樣制備應(yīng)在取樣后立即進(jìn)行，將支架系統(tǒng)自外桿近端到尖端部分(包括襯絲)，截為5mm碎塊，放入頂空進(jìn)樣瓶中稱重，加水5g，蓋緊瓶蓋，搖勻，放入60℃水浴鍋水浴30分鐘。
3.試驗(yàn)步驟
用玻璃注射器按濃度由低到高的順序依次從制備好的標(biāo)準(zhǔn)樣和供試樣中取1000μL上層氣體，注入進(jìn)樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰面積，每一樣品平行進(jìn)樣2針，面積響應(yīng)值的相對(duì)偏差應(yīng)≤5％，取平均值含量。
4.結(jié)果計(jì)算
以同一濃度兩次進(jìn)樣的平均峰面積計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線，將供試樣的峰面積帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出供試樣中環(huán)氧乙烷的濃度。
4.1計(jì)算樣品中環(huán)氧乙烷殘留：
Md＝(C1*M水)/M樣
式中：C1---供試品溶液中環(huán)氧乙烷的濃度，μg/g；
M水---供試品溶液中水的總重量，g
M樣---樣品的質(zhì)量，g
Md---樣品中殘留環(huán)氧乙烷的量，μg/g
以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)例的限制，上述實(shí)例和說(shuō)明書中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等同物界定。