技術特征:
技術總結
本發(fā)明公開了一種活細胞線粒體數(shù)量染色檢測方法,包括以下步驟:(1)原液配制:噻唑藍溶于100?ml的磷酸緩沖液中,配制成濃度為0.3?1wt%的溶液,過濾以除去細菌,避光保存;(2)接種細胞:用培養(yǎng)液配成單個細胞懸液,以每孔約2000?10000個細胞接種到96孔板中,每孔體積200?300μL;(3)培養(yǎng)細胞:根據(jù)細胞類型設置培養(yǎng)條件,培養(yǎng)2?8天;(4)染色:每孔加入上述噻唑藍原液20?30μL,細胞培養(yǎng)箱內繼續(xù)孵育3?5h;(5)觀察:小心吸取孔內培養(yǎng)上清液10?50μL,加入200?300μL新鮮的培養(yǎng)液,并于高倍光學顯微鏡下觀察藍紫色顆粒數(shù)量。本發(fā)明方法利用MTT進行線粒體染色計數(shù)的方法,和現(xiàn)有的多種染色方法互為補充,能夠更好的為細胞科學研究工作提供輔助分析方法。
技術研發(fā)人員:沈柱
受保護的技術使用者:四川省人民醫(yī)院
技術研發(fā)日:2017.06.26
技術公布日:2017.10.24