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一種基于標(biāo)記聯(lián)用的高通量單細(xì)胞蛋白組學(xué)分析方法及應(yīng)用與流程

文檔序號:40606719發(fā)布日期:2025-01-07 20:47閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種基于標(biāo)記聯(lián)用的高通量單細(xì)胞蛋白組學(xué)分析方法,所述方法基于串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)記技術(shù),包括在單細(xì)胞多肽樣本中添加標(biāo)記試劑的步驟,其特征在于,所述標(biāo)記試劑由tmtpro16plex和ibt-16plex組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,包括如下步驟:

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于:所述步驟2)中,將單一的不同標(biāo)簽的所述標(biāo)記試劑先分別加入單一的反應(yīng)容器中,和多肽樣本混合、反應(yīng),終止反應(yīng)后,再將各單個反應(yīng)容器中樣本離心后混合,得到質(zhì)譜上樣樣品。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述步驟2)中,各單一反應(yīng)容器中,蛋白濃度為0-5?ng/μl。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述步驟2)中,各單一反應(yīng)容器中,單一標(biāo)簽的標(biāo)記試劑的濃度為0.5-5?μg/μl。

6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項所述的方法,其特征在于,還包括步驟:

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述歸一化方法為:

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述參考通道為其中任意一個通道,加入1-3x單細(xì)胞樣品量的標(biāo)準(zhǔn)品。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述質(zhì)譜為高分辨質(zhì)譜。

10.權(quán)利要求1至9任一項所述基于標(biāo)記聯(lián)用的高通量單細(xì)胞蛋白組學(xué)分析方法在單細(xì)胞或其他微量樣品的蛋白質(zhì)組組學(xué)分析和鑒定中的應(yīng)用。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種基于標(biāo)記聯(lián)用的高通量單細(xì)胞蛋白組學(xué)分析方法及應(yīng)用。所述方法基于串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)記技術(shù),包括在單細(xì)胞多肽樣本中添加標(biāo)記試劑的步驟,所述標(biāo)記試劑由TMTpro?16plex和IBT?16plex組成。本發(fā)明的分析方法將IBT?16plex和TMTpro?16?Plex標(biāo)記聯(lián)用,將其應(yīng)用于單細(xì)胞蛋白組學(xué)的分析和鑒定,可大大提高質(zhì)譜采集的通量,降低成本,同時也具有較高的靈敏度。

技術(shù)研發(fā)人員:楊云,賀福初,曾清
受保護(hù)的技術(shù)使用者:華南生物醫(yī)藥研究院
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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