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一種高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):40593847發(fā)布日期:2025-01-07 20:34閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,試劑盒由測(cè)試卡、ic卡及樣本稀釋組成;

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述的解離試劑為與糖皮質(zhì)類(lèi)固醇結(jié)合蛋白的親和力比cortisol強(qiáng)的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物,可包括孕酮、ans鹽等一個(gè)或多個(gè),用于競(jìng)爭(zhēng)解離樣本中與糖皮質(zhì)類(lèi)固醇結(jié)合蛋白的cortisol。tris-hcl?緩沖液、牛血清白蛋白等作為穩(wěn)定劑和封閉劑,以及調(diào)節(jié)類(lèi)似物與糖皮質(zhì)類(lèi)固醇結(jié)合蛋白的結(jié)合力達(dá)到最適條件,使五種標(biāo)志物在一個(gè)試紙條上同時(shí)檢測(cè)時(shí)降低交叉相互干擾。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,試紙條上的硝酸纖維素膜上按前后順序包被固定了cortisol、acth、renin單克隆抗體和偶聯(lián)bsa的ald、aⅱ小分子抗原。acth、renin單克隆抗體用于捕獲樣本中cortisol、acth、renin待測(cè)分子與玻璃纖維上釋放出來(lái)標(biāo)記的cortisol、acth、renin熒光標(biāo)記單克隆抗體一起形成夾心反應(yīng),而偶聯(lián)bsa的ald、aⅱ小分子抗原可與樣本中的ald、aⅱ小分子待測(cè)物競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合玻璃纖維墊上的熒光標(biāo)記抗體。所述的玻璃纖維上cortisol熒光標(biāo)記抗體與解離劑中類(lèi)似物無(wú)交叉反應(yīng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述熒光物質(zhì)的制備方法為:nhs活化生物素溶于無(wú)水dmf有機(jī)溶劑中,在pbs緩沖體系中與抗體上的氨基進(jìn)行結(jié)合,具有鏈霉親和素融合表達(dá)的熒光蛋白,在含有bsa的pbs溶液中在室溫?cái)嚢杌旌戏磻?yīng)10min,獲得抗體蛋白熒光顆粒。所屬抗體標(biāo)記的熒光物質(zhì)亦可為熒光微球、量子點(diǎn)、時(shí)間分辨熒光微球等。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,生物素標(biāo)記抗體與鏈霉親和素融合的熒光蛋白摩爾比為1:2-10。并在反應(yīng)結(jié)束加入0.1-10mm過(guò)量生物素進(jìn)行預(yù)封閉和終止反應(yīng)。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高血壓多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述檢測(cè)方法中組合了cortisol、acth、renin雙抗體夾心法和ald、aⅱ競(jìng)爭(zhēng)法在同一試紙條上,通過(guò)ic卡標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)于不同反應(yīng)模式進(jìn)行校準(zhǔn),同時(shí)以兔抗雞igy多克隆抗體固定在硝酸纖維素膜上作為獨(dú)立的內(nèi)部參考質(zhì)控線,相對(duì)傳統(tǒng)羊抗鼠參考質(zhì)控線,可在多項(xiàng)聯(lián)檢時(shí)更好的消除不同標(biāo)志物待測(cè)物濃度變化帶來(lái)的參考質(zhì)控值的變化。所述競(jìng)爭(zhēng)法也可用小分子雙抗體夾心法。其所述兔抗雞igy多克隆抗體質(zhì)控線亦可使用同類(lèi)型dnp抗體作為獨(dú)立質(zhì)控控制不同項(xiàng)目待測(cè)物濃度差異對(duì)參考線影響的差異。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種醛固酮(aldosterone,ALD)、皮質(zhì)醇(Cortisol)、促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotrophic?hormone,ACTH)、腎素(Renin)、血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AⅡ)五個(gè)高血壓標(biāo)志物的多項(xiàng)聯(lián)合定量檢測(cè)方法,該檢測(cè)方法由測(cè)試卡、IC卡、樣本稀釋液及使用說(shuō)明書(shū)組成;樣本稀釋液包括Tris?HCl緩沖液、牛血清白蛋白、解離試劑;測(cè)試卡由試紙條、塑料卡殼組成,試紙條上的主要成分有:a)高血壓五項(xiàng)的(Cortisol、ACTH、Renin)單克隆抗體和偶聯(lián)BSA的小分子抗原(ALD、AⅡ)依次分別固定在硝酸纖維素膜上;b)兔抗雞IgY多克隆抗體,固定在硝酸纖維素膜上;c)熒光標(biāo)記的高血壓五項(xiàng)標(biāo)志物單克隆抗體以及熒光標(biāo)記的雞IgY抗體添加在預(yù)處理的玻璃纖維上。

技術(shù)研發(fā)人員:王小明,盧艷華,陳泳釵,梁梓媚
受保護(hù)的技術(shù)使用者:廣州天寶頌原生物科技開(kāi)發(fā)有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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