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一種梅毒螺旋體TPP17特異性抗體的檢測方法

文檔序號:40595123發(fā)布日期:2025-01-07 20:35閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述蛋白a/g修飾磁珠、所述tpp17-hgluc蛋白和所述經(jīng)稀釋的血清樣本在混合后,利用核酸提取機進(jìn)行孵育;

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述孵育的條件為10分鐘~20分鐘,35℃~40℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述包含抗體-tpp17-hgluc復(fù)合物的磁珠顆粒清洗時的方法為:先經(jīng)緩沖液a清洗,再經(jīng)hgluc緩沖液清洗;

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述經(jīng)稀釋的待測血清樣本為待測血清樣本經(jīng)20倍~80倍的稀釋倍數(shù)得到的。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述待測血清樣本的獲得方法為:將血液先在36℃~38℃放置1.5小時~2.5小時,再放入0℃~4℃低溫放置8小時~16小時,然后以1800rpm~3000rpm的速度離心血液4分鐘~6分鐘,吸取上層血清,獲得所述待測血清樣本。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述tpp17-hgluc蛋白的制備方法為:采用人腎上皮細(xì)胞系進(jìn)行tpp17-hgluc蛋白表達(dá),并進(jìn)行超濾濃縮,獲取所述tpp17-hgluc蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述人腎上皮細(xì)胞系為293f細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種梅毒螺旋體tpp17特異性抗體的檢測方法,其特征在于,所述超濾濃縮的方法為:使用8kda~12kda的超濾管進(jìn)行濃縮,且超濾濃縮時的轉(zhuǎn)速為3750×g~3850×g。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于梅毒特異性抗體檢測技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種梅毒螺旋體TPP17特異性抗體的檢測方法。該檢測方法包括如下步驟:將濃度為0.9mg/mL~1.2mg/mL的蛋白A/G修飾磁珠、TPP17?hGluc蛋白以及經(jīng)稀釋的待測血清樣本混勻后,孵育10分鐘~20分鐘;其中,所述蛋白A/G修飾磁珠、所述TPP17?hGluc蛋白和所述經(jīng)稀釋的血清樣本的體積比為1:4~6:3~5;將包含抗體?TPP17?hGluc復(fù)合物的磁珠顆粒中加入5μL~20μL濃度為180μM~220μM的腔腸素底物,進(jìn)行測量。本發(fā)明采用蛋白A/G固定化的磁粒來精準(zhǔn)捕獲血清中的抗體,同時利用TPP17抗原嵌合蛋白與人源化的Gaussia熒光素酶進(jìn)行特異性標(biāo)記,從而確保了檢測的高靈敏度和高特異性。

技術(shù)研發(fā)人員:張赟,張藝冰,郭先娥,王明永,郭慶合,余軍平
受保護(hù)的技術(shù)使用者:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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