供試品溶液所得的液相圖譜中的出峰時(shí)間各異， 如現(xiàn)有的檢測固本益腸制劑中白巧含量的方法是采用流動相為甲醇-己睛-0. 17%磯酸溶 液，配制方法繁瑣，不易重復(fù)；又如，現(xiàn)有的補(bǔ)骨脂含量測定方法是采用流動相為甲醇-水， 供試品溶液制備的采用索氏提取器提取，方法重現(xiàn)性不好；同時(shí)，現(xiàn)有檢測技術(shù)中不能同時(shí) 檢測白巧和補(bǔ)骨脂的含量。
[0041] 本發(fā)明方法采用梯度洗脫技術(shù)，流動相A和B分別配制，操作簡單，不用調(diào)節(jié)PH 值，供試品溶液制備方法易于操作，不同時(shí)間、不同人員操作所得的液相色譜差異不大，且 能同時(shí)對固本益腸制劑中白巧及補(bǔ)骨脂同時(shí)進(jìn)行檢測，故本發(fā)明測定方法均優(yōu)于現(xiàn)有技 術(shù)。通過大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證本發(fā)明方法使得巧藥巧、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素在色譜柱中分離 效果好，靈敏度高，方法操作簡便，重復(fù)性及重現(xiàn)性好。
【附圖說明】
[0042] 圖1為巧藥巧線性回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0043] 圖2為補(bǔ)骨脂素線性回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0044] 圖3為異補(bǔ)骨脂素線性回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0045] 圖4為本發(fā)明方法對照品液相圖譜。
[0046] 圖5為本發(fā)明方法供試品液相圖譜。
[0047] 圖6為固本益腸片含量測定方法的對照品液相圖譜。
[0048] 圖7為固本益腸片含量測定方法的供試品液相圖譜。
[0049] 圖8為補(bǔ)骨脂含量測定方法的對照品液相圖譜。
[0050] 圖9為補(bǔ)骨脂含量測定方法的供試品液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0051] W下通過【具體實(shí)施方式】的描述對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但該并非是對本發(fā)明 的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可W做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫 離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0052] 下述實(shí)施例中的方法，如無特別說明，均為常規(guī)方法。
[0053] 下述的實(shí)施例中的百分含量（％)如無特別說明，均為質(zhì)量百分含量。
[0054] 實(shí)施例1 固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，本實(shí)施例中所用的固本益腸制劑為顆粒 劑。
[00巧](1)儀器與所用試劑 高效液相色譜儀：日本島津；LC-lOAvp ;LV-10Avp粟；SPD-lOAvp可見紫外檢測器； 化enomen皿10260B型超聲器； 對照品；巧藥巧對照品、補(bǔ)骨脂素對照品、異補(bǔ)骨脂素對照品。
[0056] (2)檢測波長的選擇 取巧藥巧、補(bǔ)骨脂素及異補(bǔ)骨脂素對照品的甲醇溶液。在400?200nm波長范圍內(nèi)進(jìn) 行掃描，結(jié)果表明巧藥巧的最大吸收波長為229nm、吸收度A = 200,補(bǔ)骨脂素的最大吸收波 長為 289nm、吸收度 A = 0. 446 和 246nm、吸收度 A = 1. 032 W及 203nm、吸收度 A = 1. 035， 異補(bǔ)骨脂素的最大吸收波長為299皿、吸收度A = 0. 529和247皿、吸收度A = 1. 431 W及 203nm、吸收度A = 1. 212。通過吸收度值的比較，巧藥巧的紫外吸收弱于補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨 脂素的吸，故側(cè)重于巧藥巧的最大吸收波長，考慮到在230皿處巧藥巧、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨 脂素均有較強(qiáng)的吸收，故選用在230nm下測定巧藥巧、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素。
[0057] (3)流動相的考察 現(xiàn)有固本益腸制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定的流動相為"甲醇-己膳-0. 17%磯酸水溶液"， 配制復(fù)雜，傷害色譜柱，無法兼顧巧藥巧，補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素H個成分，同時(shí)考察了 "甲 醇-水"和"己膳-水"為流動相，峰形均有不同程度的異?，F(xiàn)象。選擇流動相己膳-磯酸 溶液，通過改變不同時(shí)間段的流動相比例進(jìn)行梯度洗脫，比較適合本產(chǎn)品，分離的巧藥巧、 補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素峰形良化分離度較高，無干化所W確定其流動相為己膳-磯酸溶 液。W己膳為流動相A，W磯酸溶液為流動相B，在0?22分鐘時(shí)間段用含12%流動相A和 88%流動相B的混合液進(jìn)行洗脫，在22?40分鐘時(shí)間段用含35%流動相A和65%流動相B 的混合液進(jìn)行洗脫。如表1表述。
[0058] 表1流動相梯度洗脫
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于該方法中含有白芍、補(bǔ) 骨脂的含量測定方法，其步驟如下： 用高效液相色譜儀進(jìn)行測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，采用梯度洗脫方法， 以乙腈為流動相A，以磷酸溶液為流動相B，檢測波長為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算 應(yīng)不低于7000,在流動相洗脫過程中，在0?22分鐘使用含流動相A為12%和流動相B為 88%的混合液進(jìn)行洗脫，在22?40分鐘使用含流動相A為35%和流動相B為65%的混合液 進(jìn)行洗脫； 對照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷對照品、補(bǔ)骨脂素對照品、異補(bǔ)骨脂素對照品，各 對照品分別加醇類溶劑制成每lml含50 y g、10 y g、10 y g的溶液； 供試品溶液的制備：取固本益腸制劑lg，精密加入醇類溶劑，超聲處理，濾過，即得； 測定方法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 Ul，注入高效液相色譜儀，測 定，以對照品溶液和供試品溶液的溶液濃度與峰面積進(jìn)行計(jì)算； 檢測標(biāo)準(zhǔn)：每lg固本益腸制劑中含白芍以芍藥苷計(jì)算不得少于1. 60mg，每lg固本益 腸制劑中含補(bǔ)骨脂以補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總量計(jì)算不得少于〇. 80mg。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的乙腈為色譜純乙腈或分析純乙腈。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的流動相B為質(zhì)量百分比濃度0. 05%?0. 15%的磷酸溶液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的流動相B為質(zhì)量百分比濃度0. 08%?0. 12%的磷酸溶液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的流動相B為質(zhì)量百分比濃度0. 1%磷酸溶液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的供試品溶液的制備步驟中精密加入醇類溶劑的量為30?70ml。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的精密加入醇類溶液的量為50ml。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的醇類溶劑為甲醇、乙醇或甲醇與乙醇體積比1:1的混合液。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在于 所述的醇類溶劑為甲醇。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在 于所述的超聲處理為功率250W、頻率33KHz。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在 于所述的超聲處理時(shí)間為30?50分鐘。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在 于所述的超聲處理時(shí)間為40分鐘。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法，其特征在 于所述的固本益腸制劑為顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液體制劑、針劑、外用貼膏劑、凝膠劑、 膜劑、氣霧劑、搽劑或酊劑。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藥品的檢測方法，特別是涉及一種固本益腸制劑中有效成分的含量檢測方法。該方法含有白芍、補(bǔ)骨脂的含量測定方法，用高效液相色譜儀進(jìn)行測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，采用梯度洗脫方式，以乙腈為流動相A，以磷酸溶液為流動相B，檢測波長為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于7000；檢測標(biāo)準(zhǔn)為每1g固本益腸制劑中含白芍以芍藥苷計(jì)算不得少于1.60mg，每1g固本益腸制劑中含補(bǔ)骨脂以補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總量計(jì)算不得少于0.80mg。采用本發(fā)明方法可同時(shí)檢測固本益腸制劑中白芍和補(bǔ)骨脂的含量，且芍藥苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素色譜峰分離效果好，靈敏度高，測得樣品重復(fù)性好。
【IPC分類】G01N30-02, G01N30-34
【公開號】CN104597150
【申請?zhí)枴緾N201410840028
【發(fā)明人】賴福平
【申請人】沈陽綠洲制藥有限責(zé)任公司
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2014年12月30日