一種測定卷煙濾嘴中亞硝胺含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于卷煙煙氣分析技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及濾嘴中煙氣有害成分的檢驗，特別 是卷煙濾嘴中亞硝胺含量的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 煙草特有亞硝胺（TSNAs)主要包括N-亞硝基降煙堿（順腳、4-(甲基亞硝胺 基化晚基）-1- 了酬（NNK)、N-亞硝基假木賊堿（NAB)和N-亞硝基新煙堿（NAT) 等。國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC)、化cht研究團(tuán)隊等，加拿大政府名單中有害成分的毒性評價 結(jié)果表明，且有足夠的證據(jù)認(rèn)為，TSNAs中的NNK對實驗室動物有致癌性。近年，國家煙草 專賣局組織實施的"卷煙危害性指標(biāo)體系研究"項目也表明，在卷煙煙氣的實際環(huán)境下，對 人體影響最大的7種有害化學(xué)成分指標(biāo)中，NNK是其中之一。
[0003] 卷煙濾嘴對煙氣中的TSNAs有一定的截留作用，卷煙煙氣TSNAs濾嘴截留量可W 應(yīng)用于評價煙氣接觸風(fēng)險，因此，檢測濾嘴中TSNAs含量具有重要意義。
[0004] 目前關(guān)于TSNAs的檢測方法主要有氣相色譜-熱能分析法（GC-TEA)、氣質(zhì)聯(lián)用法 佑C - M巧和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/M巧。GC-TEA法作為CORESTA推薦的主流煙 氣中TSNAs的檢測方法，使用的最為廣泛。但是GC-TEA方法的樣品前處理過程復(fù)雜，選擇 性較差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 鑒于此，本發(fā)明目的在于提供一種前處理相對簡單、靈敏度更高、分析速度快的亞 硝胺含量檢測方法，該方法專用于分析卷煙濾嘴中亞硝胺含量。
[0006] 為解決W上技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是，提供一種測定卷煙濾嘴中亞硝 胺含量的方法，包括W下步驟：
[0007] 步驟a)提取目標(biāo)物
[000引截取近嘴端濾嘴放入萃取管，加入萃取液和內(nèi)標(biāo)；所述萃取管為離屯、管；
[0009] 步驟b)禍旋振蕩與過濾
[0010] 將離屯、管置于禍旋振蕩儀，禍旋振蕩，靜置；吸取上清液經(jīng)水相濾膜過濾，濾液待 測；
[0011] 步驟C)標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制
[0012] 用甲醇配置TSNAs標(biāo)準(zhǔn)儲備液，儲存于棟色玻璃瓶中，低溫保存；量取儲備液用甲 醇稀釋定容，制得TSNAs工作液；
[0013] 用甲醇準(zhǔn)確配置TSMs-d4內(nèi)標(biāo)儲備液，用內(nèi)標(biāo)儲備液配制內(nèi)標(biāo)工作液，并儲存于 棟色玻璃瓶中；所有的儲備液低溫保存，使用前將其恢復(fù)到室溫；
[0014] 用萃取液配制不同濃度的TSNAs標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；
[0015] 步驟d)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定
[0016] 吸取配制好的不同濃度的TSNAs標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，注入UPLC-MS/MS系統(tǒng)，按內(nèi)標(biāo)法 W峰面積計算出樣品待測液中TSNAs含量。
[0017] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，步驟a)中，濾嘴截取長度為1cm。
[0018] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，步驟a)中，選取5支濾嘴段，加入的lOOmmol/L 的萃取液10血和10 y g/mL的內(nèi)標(biāo)30 y L。
[0019] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，所述萃取液為醋酸錠水溶液。
[0020] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，步驟b)中，禍旋振蕩時間為3min，禍旋振蕩轉(zhuǎn) 速為2400轉(zhuǎn)/min。
[0021] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，步驟C)中，步驟C)中，避光低溫保存是W棟色 玻璃瓶為容器，-20°C下保存。
[0022] 作為本發(fā)明的一個【具體實施方式】，所述步驟d)具體操作為；吸取配制好的不同濃 度的TSNAs標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，注入UPLC-MS/MS系統(tǒng)，繪制TSNAs的線性回歸方程，對純化稀釋 后的樣品待測液進(jìn)行測定，測得分析物與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值，代入一元線性回歸方程，求得 樣品待測液中分析物的含量。
[002引作為本發(fā)明的一個【具體實施方式】，步驟d)中，UPLC-MS/MS系統(tǒng)的色譜條件；選用 色譜柱為Atlantis UPLC 肥H 沈ield RPC18,規(guī)格為50mmX2. lmm，1.7um;流動相A;98% 甲 酸氨水和流動相B ;2%甲酸己膳；梯度洗脫條件為；0~2min，98%A~50%A ;2~2. Imin， 50% A ~10% A ;2. 1 ~3. 5min，10% A ~10% A ;3. 5 ~3. 51min，10% A ~98% A ;3. 51 ~ 5. 0min，98% A ~98% A ;流動相流速為 0. 8mL/min。
[0024] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式，所述甲酸氨水體積分?jǐn)?shù)0. 1 %，所述甲酸己膳體 積分?jǐn)?shù)0. 1%。
[0025] 作為本發(fā)明的一個【具體實施方式】，步驟d)中，串聯(lián)質(zhì)譜檢測的條件為；電噴霧離 子源，噴霧電壓（I巧2. 6kV ;離子化溫度450°C ;霧化氣流量1000L/化；錐孔氣流量50L/化； 碰撞氣為氣氣，流量0. 15ml/min;其余氣體為氮?dú)?；駐留時間為30msec，正離子MRM模式采 集。
[0026]與現(xiàn)有技術(shù)相比，上述技術(shù)方案中的一個技術(shù)方案具有如下優(yōu)點(diǎn)；
[0027] 1、與傳統(tǒng)的GC-TEA檢測方法比較，采用醋酸錠萃取，禍旋振蕩，過濾進(jìn)樣的方式， 簡化了前處理過程，提高了分析靈敏度。
[002引 2、與現(xiàn)有的LC-MS/MS方法相比，用禍旋振蕩法振蕩時間明顯短于超聲萃取或振 蕩萃取，提取效率增加，振蕩時間縮短了 10倍。
[0029] 3、本發(fā)明選取了超高效液相色譜柱，使得柱子的分離度明顯提高，分析時間顯著 縮短，提高檢測通量。串聯(lián)質(zhì)譜的使用使得方法的選擇性和靈敏度提高，更有利于吸煙者濾 嘴中低含量TSNAs的測定。
[0030] 4、本發(fā)明使用內(nèi)標(biāo)為気代內(nèi)標(biāo)，使用気代內(nèi)標(biāo)定量，有效消除基質(zhì)干擾和前處理 過程中引起的誤差。
[0031] 5、本發(fā)明具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏度及重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說明】
[0032] 圖1是本發(fā)明一較佳實施例樣品中TSNAs的選擇離子流色譜圖。
[003引圖2是本發(fā)明一較佳實施例樣品中気代TSNAs的選擇離子流色譜圖。
【具體實施方式】
[0034] W下結(jié)合具體實例做進(jìn)一步描述。
[0035] 本實施例所用儀器與試劑為；Waters Xevo TQ超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（美 國Waters公司），配備電噴霧電離源巧SI) ;VtexMixer 230VeU振蕩器（美國L油net公 司）。
[0036] 甲酸為HPLC級（濃度為49-51 %，德國Sigma公司）；己膳、甲醇均為色譜純（美國