表明均可 改善IGT小鼠的糖耐量；與文迪雅對照組相比，黃芪發(fā)酵產物小、中、大劑量組2小時血糖值 差異無統(tǒng)計學意義（乃〇. 05)。
[0014] 表1黃芪發(fā)酵產物對D-gal誘導IGT小鼠 OGTT的影響（土 S)
與正常對照組相比，Λ P〈〇. Ol ;與模型對照組相比，▲ P〈〇. 01， ④黃芪發(fā)酵產物對D-gal誘導IGT小鼠胰島素耐量試驗（ITT)的影響 與正常對照組比較，給小鼠皮下注射胰島素前各組空腹血糖（FBS)差異無統(tǒng)計學意義 (乃0. 05);注射胰島素15min后，模型對照組血糖值與基礎血糖值的比值為89. 23%，正常對 照組的比值為69. 80%，文迪雅組的比值為72. 56%，黃芪發(fā)酵產物小、中、大劑量組的比值分 別為75. 06%、78. 59%、74. 61%，模型對照組血糖值下降幅度最小，提示模型對照組對胰島素 的敏感性降低。
[0015] 注射胰島素90min內血糖值均下降，各組在注射胰島素90min后達血糖谷值， 120min時血糖值有所升高，模型對照組血糖值相對基礎血糖下降幅度最小。；胰島素90min 后，與正常對照組相比，模型對照組血糖谷值差異有統(tǒng)計學意義（P〈〇. 01)，與模型對照組相 比，文迪雅組、黃芪發(fā)酵產物小、中、大劑量組血糖谷值差異有統(tǒng)計學意義（代〇. 01)，與文迪 雅組相比，黃芪發(fā)酵產物小、中劑量組血糖谷值差異有統(tǒng)計學意義（K0. 05)，黃芪發(fā)酵產物 大劑量組血糖谷值差異無統(tǒng)計學意義（乃〇. 05)，提示黃芪發(fā)酵產物大劑量組相比小、中劑 量組對胰島素的敏感性更接近文迪雅組。
[0016] ⑤黃芪發(fā)酵產物對D-gal誘導IGT小鼠胰島素抵抗的影響 各組空腹血糖（FBS)差異無統(tǒng)計學意義（7^0.05);與正常對照組比較，模型對照組空 腹胰島素（FINS)和胰島素抵抗指數（HOMA-IR)明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（K0. 01)，表 明模型對照組胰島素抵抗增強； 由表2可以看出，與模型對照組相比，文迪雅組、黃芪發(fā)酵產物小、中、大劑量組 HOMA-IR明顯降低，F(xiàn)INS、H0MA-IR差異有統(tǒng)計學意義（P〈0. 01)，表明胰島素抵抗改善明顯； 與文迪雅組相比，黃芪發(fā)酵產物小、中劑量組FINS、HOM-IR差異有統(tǒng)計學意義（P〈0. 05)， 黃芪發(fā)酵產物大劑量組FINS、HOM-IR差異無統(tǒng)計學意義（PM). 05)，提示黃芪發(fā)酵產物大 劑量組相比小、中劑量組對胰島素抵抗改善的作用更接近文迪雅組。
[0017] 表2黃芪發(fā)酵產物對D-gal誘導IGT小鼠胰島素抵抗的影響（土S)
與正常對照組相比，Λ P〈〇. 01 ;與模型對照組相比，▲ P〈〇. 01 ;與文迪雅對照組相比， □ Ρ〈0·05〇
[0018] ⑥實驗各組骨骼肌GLUT-4基因表達水平的比較 模型對照組基因表達降低，與正常對照組比較有顯著差異（Ρ〈〇. 01)。文迪雅組、黃 芪發(fā)酵產物小、中、大劑量組基因表達增強，與模型對照組相比有顯著差異（P〈〇.〇l);由 表3可以看出，與文迪雅對照組相比，黃芪發(fā)酵產物小、大劑量組基因表達差異無顯著性 (Ρ>0. 05)，而黃芪發(fā)酵產物中劑量組差異有統(tǒng)計學意義（Ρ〈0. 05)，表明文迪雅對照組、黃芪 發(fā)酵產物小、中、大劑量組都明顯增強GLUT-4基因表達，與黃芪發(fā)酵產物中劑量相比，黃芪 發(fā)酵產物小、大劑量組對基因表達的影響更接近文迪雅對照組。
[0019] 表3黃芪發(fā)酵產物對IGT小鼠骨骼肌GLUT-4基因表達水平的影響（土S)
與正常對照組相比，*Ρ〈〇.〇1 ;與模型對照組相比，ΛΡ〈〇.〇1 ;與文迪雅組相比， ▲ Ρ〈0·05〇
[0020] 研究結論 (1)黃芪發(fā)酵產物對IGT小鼠空腹血糖（FBG)無明顯影響，降低口服葡萄糖耐量試驗 (OGTT)后2h血糖（2hBG)，增加胰島素耐量試驗（ITT)后胰島素的敏感性，降低空腹胰島素 (FINS)和胰島素抵抗指數（HOMA-IR)水平。
[0021] (2)黃芪發(fā)酵產物明顯增加 IGT小鼠骨骼肌組織葡萄糖轉運蛋白4(GLUT-4)基因 表達水平。
[0022] 對于本領域技術人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細節(jié)，而且在不背 離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪 一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權利要 求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和范圍內的所有變化 囊括在本發(fā)明內。不應將權利要求中的任何附圖標記視為限制所涉及的權利要求。
【主權項】
1. 一種黃芪發(fā)酵產物對防治糖尿量低下的研究方法，其特征在于，具體步驟如下： (1) 藥物的配制 稱取黃芪發(fā)酵產物溶于0. 9%的生理鹽水后配成混懸液，稱取文迪雅粉碎后溶于0. 9% 的生理鹽水后配成混懸液，放-4°C冰箱中保存?zhèn)溆?；D-半乳糖用生理鹽水按500mg/Kg ? d 配成30mg/ml，即用即配；胰島素注射液，臨用前用生理鹽水配制成0. 025U/mL ; (2) 使用劑量 根據臨床用藥情況，折算成小鼠使用劑量；黃芪發(fā)酵產物大、中、小劑量分別是60kg成 人日用藥量的20倍、10倍、5倍，并稀釋成相同的給藥容量；對照組文迪雅取60kg成人日用 藥量的10倍，并稀釋成相同的給藥容量； (3) 分組及給藥方法：動物購置后適應性喂養(yǎng)一周后，按體重隨機分組；除正常對照組 灌服等容量生理鹽水并同時腹腔注射等量生理鹽水外，其余模型對照組、文迪雅組、黃芪發(fā) 酵產物小劑量組、黃芪發(fā)酵產物中劑量組、黃芪發(fā)酵產物大劑量組，每組12只小鼠，分別灌 服等容量配制溶液的同時腹腔注射D-gal 500mg/kg，每天1次共42天，檢測完血液各項指 標后，處死并取右大腿股四頭肌肌肉-70°C下冷凍保存?zhèn)溆茫? (4) 觀察指標 給藥期間每周稱體重，共6周，每隔一周的體重進行比較； ① 葡萄糖耐量試驗 于末次給藥后禁食12h，剪尾取血，用血糖測試儀及試紙測定空腹血糖作為0時血糖， 然后灌胃4g/kg葡萄糖溶液，按同樣方法取血檢測30min、60min和120min時的血糖值； ② 胰島素耐量試驗 喂養(yǎng)2天后禁食12h，剪尾取血作為0時血糖，然后皮下注射0. 5WJ/kg胰島素，取血檢 測 15min、30min、60min、90min 和 120min 時血糖； ③ 胰島素抵抗指數測定及計算 繼續(xù)喂養(yǎng)2天后禁食12h，眼眶取血，于4000r/min離心15min分離血清，并儲存 于-70°C溫度下待測，采用放免法測定血清胰島素，并計算胰島素抵抗指數，計算公式，胰島 素抵抗指數=空腹胰島素X空腹血糖/22. 5 ; (5) 數據統(tǒng)計處理：對實驗數據進行處理，計量資料數據以均數土標準差表示，采用方 差分析對各組均數進行顯著性檢驗。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種黃芪發(fā)酵產物對防治糖尿量低下的研究方法，先進行藥物的配制，然后根據臨床用藥情況，折算成小鼠使用劑量，再進行分組及給藥，進行觀察，定期稱體重并進行比較，然后分別進行葡萄糖耐量試驗、胰島素耐量試驗以及胰島素抵抗指數測定及計算，最后對實驗數據進行處理，采用方差分析對各組均數進行顯著性檢驗。本發(fā)明方法能有效降低口服葡萄糖耐量試驗后的血糖，增加胰島素耐量試驗后胰島素的敏感性，降低空腹胰島素和胰島素抵抗指數水平，探究層次深，精確度高。
【IPC分類】G01N33/50
【公開號】CN105137057
【申請?zhí)枴緾N201510681641
【發(fā)明人】劉必旺, 趙換, 李欽青, 郭羽, 張惠忠, 柴金苗, 王永輝, 薛慧清, 郭蕾, 馮前進, 冀來喜, 張俊龍, 周然
【申請人】山西中醫(yī)學院
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年10月20日