龍葵消炎片中的沒食子酸、槲皮素、山柰素的含量。但是添加的磷酸溶液 要在色譜柱的承受氛圍內(nèi)，而且比例不能過高，否則出現(xiàn)鹽析出的現(xiàn)象，因此將混合液中甲 醇和體積分?jǐn)?shù)為〇. 4%的磷酸溶液的體積比調(diào)配成55:45時為宜。根據(jù)沒食子酸、槲皮素、 山柰素的特性，以梯度波長的方式在不同的時間、不同的波動準(zhǔn)確地檢測這些藥物。檢測復(fù) 方龍葵消炎藥中的沒食子酸、槲皮素、山柰素時進行梯度洗脫可以增大流動相的脫洗能力， 提高脫洗效率。
[0045] 在檢測澳洲茄邊堿、澳洲茄堿等生物堿時候，采用乙腈和似2即04溶液的混合液進 行洗脫。由于乙腈的洗脫能力很強，加入2mol/L的似2即04溶液以后，在檢測澳洲茄邊堿、 澳洲茄堿等生物堿時候，可以較好的調(diào)整流動相極性，提高色譜峰出峰的質(zhì)量，如：拖尾減 少、峰型變窄、吸收峰值增高等。但是添加的Na2HP0j§液要在色譜柱的承受氛圍內(nèi)，而且比 例不能過高，否則出現(xiàn)鹽析出的現(xiàn)象，因此將混合液中乙腈和2mol/L的
[0046] Na2HP04溶液的體積比調(diào)配成39:61時為宜。檢測復(fù)方龍葵消炎藥中的澳洲茄堿、 澳洲茄邊堿時進行梯度洗脫可以增大流動相的脫洗能力，提高脫洗效率。
【具體實施方式】
[0047] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，以令本領(lǐng)域的技術(shù)人員參照說明 書文字能夠據(jù)以實施。
[0048] 實施例1
[0049] 采用高效液相色譜法（HPLC)進行等度洗脫檢測復(fù)方龍葵消炎片中的沒食子酸、 槲皮素、山柰素、澳洲茄堿、澳洲茄邊堿含量。
[0050] 1、采用高效液相色譜法檢測方法檢測復(fù)方龍葵消炎片中的沒食子酸、槲皮素、山 柰素的含量包括以下步驟：
[0051] 1)色譜條件：
[0052] 色譜柱：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
[0053] 流動相：甲醇和磷酸溶液的混合液，磷酸溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.4%，甲醇和磷酸水 的體積比為55:45;
[0054] 流速：lmL/min;
[0055] 柱溫：25°C;
[0056] 梯度波長檢測：0~15min，檢測波長為270nm;15~30min，檢測波長為362nm;
[0057] 2)制備混合對照溶液：精密稱取沒食子酸對照品、槲皮素對照品、山奈素對照品 適量，加甲醇制成含沒食子酸〇. 5mg/mL，槲皮素lmg/mL、山奈素0. 5mg/mL的對照品混合溶 液；
[0058] 3)制備供試品溶液：取本品粉末約2g，精密稱定，精密加入甲醇100ml，稱定重量， 回流提取lh，放冷，補足減失重量，過濾，精密量取濾液50mL，加鹽酸15mL，水浴回流加熱和 水解處理2h，過濾，濾液置1OOmL量瓶中，用少許甲醇洗滌，洗液并入同一量瓶內(nèi)，加甲醇至 刻度，搖勻，用0. 45nm微孔濾膜濾過，取其濾液；
[0059] 4)測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20yL，注入高效液相色譜儀 進行后測定：
[0060] 5)計算：理論塔板數(shù)按槲皮素峰計算，應(yīng)不低于5000。記錄峰面積，采用外標(biāo)法計 算沒食子酸、槲皮素、山柰素的含量，如表1所示。
[0061] 2、采用高效液相色譜法檢測方法檢測復(fù)方龍葵消炎片中的澳洲茄堿、澳洲茄邊堿 含量包括以下步驟：
[0062]1)色譜條件：
[0063] 色譜柱：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
[0064] 流動相：乙腈和.即04溶液的混合液，Na2即04為2mol/L，乙腈和Na2HP04溶液的 體積比為39:61;
[0065] 流速：lmL/min;
[0066] 檢測波長：205nm;
[0067] 柱溫：25°C;
[0068]1)制備混合對照溶液：精密稱取澳洲茄堿對照品、澳洲茄邊堿對照品適量，加甲 醇制成含澳洲前堿lmg/mL、澳洲前邊堿lmg/mL的對照品混合溶液；
[0069] 2)制備供試品溶液：精密稱定復(fù)方龍葵消炎片粗粉2g，精密加入lOOmL甲醇，精密 稱定，回流提取lh，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50mL，蒸干， 加1 %鹽酸溶液50mL溶解，蒸干，用少許甲醇洗滌，洗液并入10mL量瓶內(nèi)，加甲醇至刻度，搖 勻，用0. 45nm微孔濾膜濾過，取其濾液；
[0070] 3)測定：分別精密吸取對照品混合溶液和供試品溶液各20yL，注入高效液相色 譜儀后進行測定；
[0071] 4)計算：理論塔板數(shù)按澳洲茄堿峰計算，應(yīng)不低于5000。記錄峰面積，采用外標(biāo)法 計算澳洲前堿、澳洲前邊堿的含量，如表1所示。
[0072] 實施例2
[0073] 采用高效液相色譜法（HPLC)進行梯度度洗脫檢測復(fù)方龍葵消炎片中的沒食子 酸、槲皮素、山柰素、澳洲茄堿、澳洲茄邊堿含量。
[0074] 1、采用高效液相色譜法檢測方法檢測復(fù)方龍葵消炎片中的沒食子酸、槲皮素、山 柰素的含量包括以下步驟：
[0075] 1)色譜條件：
[0076] 色譜柱：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
[0077] 流動相：流動相A為甲醇，流動相B為0. 4%磷酸溶液，進行梯度洗脫，所述梯度洗 脫程序如下，其中流動相比例均為體積百分比：
[0078] 0~13min，流動相A為：2%，流動相B為：88%;
[0079] 13~14min，流動相A為：2%~52%，流動相B為：48%~88% ;
[0080] 14~30min，流動相A為：52%，流動相B為：48% ;
[0081] 30min以上，流動相A為：55%，流動相B為：45% ;
[0082] 流速：lmL/min;
[0083] 柱溫：25°C;
[0084] 梯度波長檢測：0~15min，檢測波長為270nm;15~30min，檢測波長為362nm;
[0085] 2)制備混合對照溶液：精密稱取沒食子酸對照品、槲皮素對照品、山奈素對照品 適量，加甲醇制成含沒食子酸〇. 5mg/mL，槲皮素lmg/mL、山奈素0. 5mg/mL的對照品混合溶 液；
[0086] 3)制備供試品溶液：取本品粉末約2g，精密稱定，精密加入甲醇100ml，稱定重量， 回流提取lh，放冷，補足減失重量，過濾，精密量取濾液50mL，加鹽酸15mL，水浴回流加熱和 水解處理2h，過濾，濾液置1OOmL量瓶中，用少許甲醇洗滌，洗液并入同一量瓶內(nèi)，加甲醇至 刻度，搖勻，用0. 45nm微孔濾膜濾過，取其濾液；
[0087] 4)測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20yL，注入高效液相色譜儀 后進彳丁測定；
[0088] 5)計算：理論塔板數(shù)按槲皮素峰計算，應(yīng)不低于5000。記錄峰面積，采用外標(biāo)法計 算沒食子酸、槲皮素、山柰素的含量，如表1所示。
[0089] 2、采用高效液相色譜法檢測方法檢測復(fù)方龍葵消炎片中的澳洲茄堿、澳洲茄邊堿 含量包括以下步驟：
[0090] 1)色譜條件：
[0091]色譜柱：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
[0092] 流動相：流動相A為乙腈，流動相B為1%體積分?jǐn)?shù)磷酸溶液，進行梯度洗脫，所述 梯度洗脫程序如下，其中流動相比例均為體積百分比：
[0093] 0~5min，流動相A為：22%，流動相B為：78%;
[0094] 5~20min，流動相A為：22%~25%，流動相B為：78%~75% ;
[0095] 20~25min，流動相A為：25%，流動相B為：75%;
[0096] 25min以上，流動相A為：20%，流動相B為：80%。
[0097]流速：lmL/min;
[0098] 檢測波長：205nm;
[0099]柱溫：25°C;
[0100] 2)制備混合對照溶液：精密稱取澳洲茄堿對照品、澳洲茄邊堿對照品適量，加甲 醇制成含澳洲前堿lmg/mL、澳洲前邊堿lmg/mL的對照品混合溶液；
[0101] 3)制備供試品溶液：精密稱定復(fù)方龍葵消炎片粗粉2g，精密加入100mL甲醇，精密 稱定，回流提取lh，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50mL，蒸干， 加1 %鹽酸溶液50mL溶解，蒸干，用少許甲醇洗滌，洗液并入10mL量瓶內(nèi)，加甲醇至刻度，搖 勻，用0. 45nm微孔濾膜濾過，取其濾液；