一種新會陳皮及制品中滅線磷等農(nóng)藥的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種新會陳皮及制品中滅線磷等農(nóng) 藥的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 新會陳皮是不可多得的藥食同源、食養(yǎng)倶佳的著名地方特產(chǎn)，為廣東十大地道中 藥材之一，是"廣東三寶"（陳皮、老姜、禾桿草)的第一寶和清庭貢品。但新會陳皮及其制品 面臨的食品安全風(fēng)險十分嚴(yán)峻，近年曾出現(xiàn)新會陳皮農(nóng)殘污染報道，不僅影響人體健康，損 害消費者利益，還會影響新會陳皮及其制品出口競爭力和產(chǎn)品聲譽。
[0003] 我國現(xiàn)有的農(nóng)藥檢測標(biāo)準(zhǔn)中，在樣品前處理中大量使用重蒸丙酮，丙酮對人的肝 腎和胰腺損害極大。而且二氯甲烷和丙酮的重蒸和使用對殘留檢測操作人員健康有一定的 風(fēng)險。因此，建立成本低廉、綠色環(huán)保、準(zhǔn)確快速的新會陳皮及其制品中農(nóng)藥殘留量分析方 法是非常重要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種新會陳皮及制品中滅線磷等農(nóng)藥的測定方 法。所述農(nóng)藥為滅線磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷和水 胺硫磷，所述方法包括以下步驟：
[0005] (1).標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:分別移取上述8種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液1.000ml至25mL棕色容量 瓶中，用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為4.OOOyg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液； 吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備液〇 . 〇〇50mL、0.0125mL、0.050mL、0.50mL、5. OmL，分別置于10mL棕色容量瓶 中，用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，搖勻，制得質(zhì)量濃度分別為0.0020yg/mL、0.0050 yg/mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · 0yg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液;分別取lyL標(biāo)準(zhǔn)工作液注入氣相色 譜儀中，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，組分峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0006] (2).樣品提取:將樣品加水浸泡后用有機溶劑提取；
[0007] (3).樣品凈化:將步驟（2)所得提取液經(jīng)萃取柱凈化后，用氮氣吹至近干，加入有 機溶劑溶解殘渣，經(jīng)濾膜過濾；
[0008] (4).樣品測定:用氣相色譜儀檢測樣品，以保留時間定性、以峰面積計算待測樣品 中所述8種農(nóng)藥的殘留量，以外標(biāo)法計算結(jié)果;色譜條件如下：
[0009] 色譜柱：以（14%-氰丙基-苯基)_甲基聚硅氧烷為固定液的毛細(xì)管柱;載氣：純度 >99.999%的氦氣；流速：1. OmL/min;進樣量：1. OyL，不分流進樣;柱溫：初始100°C，保持 lmin，以20°C/min程序升溫至220°C，保持2min，再以5°C/min程序升溫至250°C，保持lOmin; 進樣口溫度：250°C ;檢測器溫度：250°C ;檢測器:火焰光度檢測器;磷濾光片：526nm;燃燒 氣:純度>99.999%的氫氣，流速:62.5111171^11 ;助燃?xì)?空氣，流速:90.〇111171^11。
[0010] 進一步地，所述樣品為新會柑、陳皮醬、陳皮花色餅、陳皮梅，所述步驟(2)樣品提 取的方法為:稱取2.00g樣品置于50mL離心管中，加入2mL水，振蕩lmin，超聲10min，加入5mL 乙酸乙酯，超聲lOmin，離心5min，吸取上層清液，再加入3mL乙酸乙酯重復(fù)提取，合并上清 液，混勻。
[0011]進一步地，所述樣品為新會陳皮、柑普茶，所述步驟(2).樣品提取的方法為:稱取 2.00g樣品置于50mL離心管中，加入4mL水，振蕩lmin，超聲lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超聲 lOmin，離心5min，吸取上層清液，再加入5mL乙酸乙酯重復(fù)提取，合并上清液，混勻。
[0012]具體地，所述步驟⑶中有機溶劑為ImL乙酸乙酯。
[0013] 具體地，所述離心速度為3000r/min。
[0014] 具體地，所述農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為100yg/mL，溶劑為丙酮。
[0015]具體地，所述濾膜的孔徑為0·22μπι。
[0016]具體地，所述萃取柱包括柱管、下篩板、下層填料、隔離篩板、上層填料和上篩板； 所述下篩板、下層填料、隔離篩板、上層填料和上篩板依次由下至上分布于所述柱管中；其 中所述下層填料為改性多壁碳納米管，用量為〇. 5g;所述上層填料為Ν-丙基乙二胺填料，用 量為〇. 5g;所述上篩板的厚度大于所述下篩板。因為上篩板承受更大壓力。
[0017]具體地，所述萃取柱的制備方法為:取10mL所述柱管，底部鋪設(shè)所述下篩板，裝入 〇. 5g改性多壁碳納米管，輕輕敲打使均勻填充，用隔離篩板壓平后在隔離篩板上部裝入 〇.5g N-丙基乙二胺填料，輕輕敲打，用所述上篩板壓平，依次用6mL甲醇、6mL乙酸乙酯活 化，即得。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用乙酸乙酯作為提取溶劑，用量少但加標(biāo)回收率高，該 試劑對人體健康危害低，本發(fā)明對環(huán)境友好;本發(fā)明使用自制固相萃取小柱，檢測成本低； 樣品含量在0.001~lmg/kg范圍內(nèi)具有良好的線性響應(yīng)，且在0.001mg/kg、0.005mg/kg和 0.01mg/kg三種添加水平下的加標(biāo)回收試驗均具有較高的回收率。本發(fā)明還具有操作簡單 快速、靈敏度高、抗基質(zhì)干擾能力強的優(yōu)點，適用于新會陳皮及其制品中農(nóng)藥殘留的定性和 定量分析。
[0019] 為了更好地理解和實施，下面結(jié)合附圖詳細(xì)說明本發(fā)明。
【附圖說明】
[0020] 圖1是本發(fā)明8種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液氣相色譜圖（2.0yg/mL)，按出峰順序依次為： 滅線磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷和水胺硫磷；
[0021] 圖2是新會陳皮空白加混標(biāo)樣品通過SPE小柱(PSA+C18)凈化后的色譜圖；
[0022]圖3是新會陳皮空白加混標(biāo)樣品通過SPE小柱(Cl 8+MWNTs)凈化后的色譜圖；
[0023]圖4是新會陳皮空白加混標(biāo)樣品通過SPE小柱(PSA+MWNTs)凈化后的色譜圖；
[0024]圖5是本發(fā)明萃取柱剖面圖；
[0025] 圖6是新會陳皮加混標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線定性定量的氣相色譜圖；
[0026] 圖7是柑普茶加混標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線定性定量的氣相色譜圖。
【具體實施方式】
[0027] 儀器與試劑:GCMS-QP 2010Ultar(日本島津公司）：配FH)檢測器、A0C-20si自動進 樣系統(tǒng)，SGH-300高純氫發(fā)生器(北京東方精華苑公司），KQ 2200DB型超聲振蕩器(昆山超聲 儀器有限公司），2-16型通用臺式高速離心機(德國Sigma公司），IKA渦旋混合器，DN-12W氮 吹儀(上海比郎公司），SPE裝置(美國Supelco公司），SPE空柱管(上海德理安公司）。
[0028] 8種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：規(guī)格為lOOyg/mL，安碚瓶密封保存，均購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研 檢測所。
[0029]甲醇、乙腈、乙酸乙酯為色譜純、購自德國默克公司，正己烷為分析純、購自天津富 宇公司，十八烷基鍵合硅膠（以下簡稱為C18)固相萃取填料購自蘇州賽分公司，N-丙基乙二 胺填料（以下簡稱PSA)購自山東奧秘公司，多壁碳納米管（以下簡稱MWNTs)購自深圳市納米 港有限公司，實驗用水為去離子蒸餾水。改性多壁碳納米管的制備方法在《改性多壁碳納米 管固相萃取-高效液相色譜法測定農(nóng)產(chǎn)品中痕量殘留的4種有機氯農(nóng)藥》（《色譜》雜志， V〇1.30，N〇.9,966 ~970)中有所公開。
[0030]以下實施例所用樣品均購自本地超市。
[0031] 實施例1:樣品測定
[0032] 1.1標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制：分別準(zhǔn)確吸取滅線磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、甲基對 硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷和水胺硫磷100.0 yg/mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液1. OOOmL至25mL棕色容量 瓶，用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，分別配制成質(zhì)量濃度為4.OOOyg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備 液，4°C保存，備用。
[0033] 1.2標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：分別準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.0050mL、0.0125mL、0.050mL、 0.50mL、5. OmL，分別置于10mL棕色容量瓶中，用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，搖勻， 制得質(zhì)量濃度分別為〇 · 0020yg/mL、0 · 0050yg/mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · 0yg/mL 的標(biāo)準(zhǔn) 工作液，4°C保存，備用。
[0034] 1.3繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:分別取lyL標(biāo)準(zhǔn)工作液注入氣相色譜儀中，以質(zhì)量濃度為橫坐 標(biāo)，組分峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0035] 1.4樣品的提取:稱取2.00g陳皮梅樣品置于50mL離心管中，加入2mL7K，振蕩lmin， 超聲10min，加入5mL乙酸乙酯，超聲10min，以3000r/min離心5min，吸取上層清液，再加入 3mL乙酸乙酯重復(fù)提取，合并上清液，混勻。
[0036] 1.5樣品的凈化:取10mL固相萃取空柱管，底部鋪下篩板，裝入0.5g改性多壁碳納 米管，輕輕敲打使均勻填充，用隔離篩板壓平后再加入0.5g N-丙基乙二胺填料，輕輕敲打， 壓好上篩板，即得自制固相萃取小柱。使用前依次用6mL甲醇、6mL乙酸乙酯活化。取樣品提 取上清液過自制固相萃取小柱，收集流出液，氮氣吹至近干，加lmL色譜純乙酸乙酯溶解殘 渣，振蕩lmin，溶液過0.22μηι有機相濾膜上機測定。
[0037] 1.6GC的檢測：采用氣相色譜（GC)對試液進行檢測。氣相色譜條件：色譜柱： Agi lent RTX-1701 (30m X 0 · 32mm X 0 · 25μπι);載氣：高純氦氣（體積百分比 >99 · 999 % );流 速:1. OmL/min;進樣量:1. OyL;進樣方式:程序升溫不分流進樣;升溫程序:初始100 °C，保持 lmin，以20°C/min升溫至220°C，保持2min，再以5°C/min升溫至250°C，保持lOmin;進樣口溫 度:250°C ;檢測器溫度:250°C ;檢測器:火焰光度檢測器(FH));磷濾光片:526nm;燃燒氣:氫 氣(體積百分比>99.999 % )，流速:62.5mL/min;助燃?xì)猓嚎諝?，流?90.0 mL/min。
[0038]其中，8種農(nóng)藥殘留氣相色譜圖如圖1所示。農(nóng)藥殘留結(jié)果按下式計算:計算結(jié)果需 扣除空白值。
[0040] 式中:X--供試試樣中農(nóng)藥的殘留量，單位為mg/kg;
[00411 c--試樣溶液中農(nóng)藥的濃度，單位為yg/mL;
[0042] V 最終樣液的定容體積，單位為mL;
[0043] m--供試試樣的質(zhì)量，單位為g;
[0044] 實施例2:提取溶劑的選擇
[0045] 本實施例中標(biāo)準(zhǔn)儲備液、標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制、樣品的凈化以及色譜條件與實施例1 相同，樣品的提取方法如下：稱取陰性新會陳皮粉末2.00g樣品置于50mL離心管中，添加 0.20yg/mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液，加入2mL水，振蕩并超聲，分別用5mL石油醚、甲醇和乙酸乙酯進行2 次提取。實驗結(jié)果見表1。
[0046] 〈表1不同有機溶劑提取的加標(biāo)回收率〉
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