[0048]從表1不同有機溶劑提取的加標回收率對比分析可知，乙酸乙酯作為提取溶劑得 到的回收率較高且穩(wěn)定，最適宜用于提取本發(fā)明所述新會陳皮及其制品中的農(nóng)藥殘留。 [0049] 實施例3:固相萃取柱填料類型的選擇
[0050] 由于新會陳皮特有的某些揮發(fā)油、黃酮化合物、生物堿等化學成分用常規(guī)方法不 易除去，加之還有蛋白質(zhì)、脂肪、糖和有機酸等組分，這些雜質(zhì)會嚴重干擾目標分析物的測 定，同時也會大大縮短色譜柱的使用壽命，因此需要對樣品進行凈化前處理。選用單一填料 的SPE小柱，去除雜質(zhì)的效果不明顯。
[0051] C18填料對蛋白質(zhì)、脂肪、維生素等雜質(zhì)有較高的吸附量，但是也能牢固吸附目標 化合物，影響了加標回收率。PSA填料能有效吸附黃酮、生物堿、糖類、酚類、脂肪酸、有機酸 和色素等雜質(zhì)，MWNTs可以有效除去樣品中的水溶性和脂溶性雜質(zhì)。本實施例將3種SPE填料 03六、(：18、11階8)兩兩組合使用對比圖譜效果。本實施例中標準儲備液、標準工作液的配 制、樣品的提取以及色譜條件與實施例1相同，結(jié)果見圖2~4。
[0052]請參閱圖5,其為PSA+MWNTs填料萃取柱剖面圖。包括柱管1、下篩板2、下層填料3、 隔離篩板4、上層填料5和上篩板6。所述下篩板2、下層填料3、隔離篩板4、上層填料5和上篩 板6依次由下至上分布于所述柱管1中。其中所述上篩板6的厚度要大于所述下篩板2。
[0053] 所述柱管1的容量為10ml，可通過商業(yè)渠道購得。所述下篩板2的孔徑為5~100μπι、 厚度為3~5mm。所述隔離篩板4的孔徑為5~100μπι，厚度為2~5mm。所述上篩板6的孔徑為5 ~100μπι，厚度為6~10mm。
[0054] 所述下層填料3為改性多壁碳納米管，用量為0.5g，所述改性多壁碳納米管的純度 >95%，直徑為10~20nm，長度為300~800nm。其制備方法在《改性多壁碳納米管固相萃取-高效液相色譜法測定農(nóng)產(chǎn)品中痕量殘留的4種有機氯農(nóng)藥》(《色譜》雜志，Vo 1.30，No. 9，966 ~970)中有所公開。所述上層填料5為N-丙基乙二胺填料，用量為0.5g，所述N-丙基乙二胺 填料的平均粒度45μπι，比表面積480m 2/g。
[0055] 本發(fā)明的PSA+MWNTs填料萃取柱的制備方法如下：取柱管1，底部鋪設下篩板2，稱 取0.5g的改性多壁碳納米管，置于所述下篩板2上，輕輕敲打使填料均勻填充，用隔離篩板4 壓平，再稱取〇. 5g的N-丙基乙二胺填料，置于所述隔離篩板4上，輕輕敲打，用上篩板6壓平， 即得。
[0056] PSA+C18填料萃取柱:該萃取柱的制備方法與PSA+MWNTs填料萃取柱的制備方法基 本相同，其區(qū)別點在于上層填料為〇.5g PSA、下層填料為0.5g C18。
[0057] C18+MWNTS填料萃取柱:該萃取柱的制備方法與PSA+MWNTs填料萃取柱的制備方法 基本相同，其區(qū)別點在于上層填料為〇.5g C18、下層填料為0.5g MWNTs。
[0058] 由圖2、圖3可見，使用其他兩種組合填料的SPE柱，雜質(zhì)峰數(shù)量多，會干擾結(jié)果分 析，某些目標化合物回收率低。由圖4可見，使用PSA+MWNTs填料填充的SPE柱，雜質(zhì)峰對各農(nóng) 藥目標峰沒有干擾，各峰之間分離度良好，分離度見表2,各目標化合物回收率高。使用自制 混合型SPE柱(PSA+MWNTs)進行前處理，該柱使用了可在廣泛的pH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定的活性 功能基團和陰離子交換吸附劑，能夠保證凈化的最優(yōu)化和高選擇性，獲得很好的使用效果。 因此，最后選用PSA+MWNTs作為自制SPE柱的吸附填料。
[0059]〈表2 8種農(nóng)藥標準品的分離度〉
[00611 實施例4:線性關(guān)系實驗
[0062]本實施例中標準儲備液、標準工作液的配制以及色譜條件與實施例1相同，取一系 列不同質(zhì)量濃度(〇 · 0020yg/mL、0 · 0050yg/mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · 0yg/mL)的標準工 作液，以儀器響應峰面積對各目標化合物的濃度進行線性回歸，繪制標準曲線，實驗結(jié)果見 表3〇
[0063]〈表3 8種農(nóng)藥的線性關(guān)系〉
[0064]
[0065]由表2結(jié)果可知，8種農(nóng)藥的濃度(X)在0.0020~2. Oyg/mL范圍內(nèi)與響應峰面積(y) 呈線性關(guān)系。
[0066] 實施例5:精密度、檢出限與定量限
[0067]在實施例1的色譜條件下，測定0.020yg/mL的混合標準溶液6次，計算精密度(相對 標準偏差，RSD)。依據(jù)3倍信噪比峰面積對應的8種化合物含量為檢出限(L0D)，10倍信噪比 峰面積對應的化合物含量為定量限(L0Q)，經(jīng)計算，結(jié)果見表4。
[0068] 〈表4 8種農(nóng)藥的精密度、檢出限與定量限〉
[0069]
[0070] 實施例6:實際樣品測定
[0071]本實施例中標準儲備液、標準工作液的配制、樣品的凈化以及色譜條件與實施例1 相同，檢測市場上在售的新會柑、新會陳皮、柑普茶、陳皮醬、陳皮花色餅和陳皮梅等樣品， 當樣品為新會柑、陳皮醬、陳皮花色餅、陳皮梅時樣品的提取方法為:稱取2.OOg樣品置于 50mL離心管中，加入2mL水，振蕩lmin，超聲lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超聲lOmin，以3000r/ min離心5min，吸取上層清液，再加入3mL乙酸乙酯重復提取，合并上清液，混勾。當樣品為新 會陳皮、柑普茶時樣品的提取方法為:稱取2.OOg樣品置于50mL離心管中，加入4mL水，振蕩 lmin，超聲lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超聲lOmin，以3000r/min離心5min，吸取上層清液，再 加入5mL乙酸乙酯重復提取，合并上清液，混勻。
[0072]對其8種農(nóng)藥殘留進行分析，并分別在每個樣品中加入1. Oyg/kg、5. Oyg/kg和10μ g/kg三種濃度水平的混合標準品測定其回收率，結(jié)果見表5~7和圖6~7。
[0073] 〈表5新會柑與新會陳皮測定結(jié)果和加標回收率〉
[0074]
[0075] 〈表6柑普茶與陳皮醬測定結(jié)果和加標回收率〉
[0076]
[0077]
[0078] 〈表7陳皮花色餅與陳皮梅測定結(jié)果和加標回收率〉
[0079]
[0080] 表5~7中表示未檢出，試驗結(jié)果說明，本發(fā)明采用GC方法，可以準確、快速、方 便地檢測出新會陳皮及其制品中8種農(nóng)藥的殘留量。
[0081] 本發(fā)明并不局限于上述實施方式，如果對本發(fā)明的各種改動或變形不脫離本發(fā)明 的精神和范圍，倘若這些改動和變形屬于本發(fā)明的權(quán)利要求和等同技術(shù)范圍之內(nèi)，則本發(fā) 明也意圖包含這些改動和變形。
【主權(quán)項】
1. 一種新會陳皮及制品中滅線磷等農(nóng)藥的測定方法，其特征在于:所述農(nóng)藥為滅線磷、 治螟磷、特丁硫磷、久效磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷和水胺硫磷，所述方法包括 以下步驟： (1) .標準曲線的制作：分別移取所述8種農(nóng)藥標準品溶液1. OOOmL至25mL棕色容量瓶 中，用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為4. OOOyg/mL的標準儲備液;吸 取標準儲備液0.005011^、0.01251^、0.0501^、0.5011^、5.011^，分別置于1011^棕色容量瓶中， 用色譜純乙酸乙酯稀釋并定容至刻度，搖勻，制得質(zhì)量濃度分別為0.0020yg/mL、0.0050yg/ mL、0 · 020yg/mL、0 · 20yg/mL、2 · Oyg/mL的標準工作液;分別取lyL標準工作液注入氣相色譜 儀中，以質(zhì)量濃度為橫坐標，組分峰面積為縱坐標，繪制標準曲線； (2) .樣品提取:將樣品加水浸泡后用有機溶劑提?。? (3) .樣品凈化:將步驟(2)所得提取液經(jīng)萃取柱凈化后，用氮氣吹至近干，加入有機溶 劑溶解殘渣，振蕩lmin，經(jīng)濾膜過濾； (4) .樣品測定：用氣相色譜儀檢測樣品，以保留時間定性、以峰面積計算待測樣品中所 述8種農(nóng)藥的殘留量，以外標法計算結(jié)果;色譜條件如下： 色譜柱：以（14%-氰丙基-苯基)-甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管柱;載氣:體積百分 比>99.999 %的氦氣;流速：1. OmL/min;進樣量：1. OyL，不分流進樣;柱溫:初始100 °C，保持 lmin，以20°C/min升溫至220°C，保持2min，再以5°C/min升溫至250°C，保持lOmin;進樣口溫 度 ：250°C;檢測器溫度:250°C;檢測器:火焰光度檢測器;磷濾光片：526nm;燃燒氣:體積百 分比> 99.999 %的氫氣，流速:62.5mL/min;助燃氣：空氣，流速:90.0 mL/min。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述樣品為新會柑、陳皮醬、陳皮花色餅、 陳皮梅，所述步驟(2)樣品提取的方法為:稱取2.00g樣品置于50mL離心管中，加入2mL水，振 蕩lmin，超聲lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超聲lOmin，離心5min，吸取上層清液，再加入3mL乙 酸乙酯重復提取，合并上清液，混勻。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述樣品為新會陳皮、柑普茶，所述步驟 (2).樣品提取的方法為：稱取2.00g樣品置于50mL離心管中，加入4mL水，振蕩lmin，超聲 lOmin，加入5mL乙酸乙酯，超聲lOmin，離心5min，吸取上層清液，再加入5mL乙酸乙酯重復提 取，合并上清液，混勻。4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述步驟（3)中有機溶劑為lmL乙酸乙 酯。5. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于:所述離心速度為3000r/min。6. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于:所述農(nóng)藥標準品溶液濃度為lOOyg/mL， 溶劑為丙酮。7. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于:所述濾膜的孔徑為0.22μπι。8. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于:所述萃取柱包括柱管、下篩板、下層填 料、隔離篩板、上層填料和上篩板;所述下篩板、下層填料、隔離篩板、上層填料和上篩板依 次由下至上分布于所述柱管中；其中所述下層填料為改性多壁碳納米管，用量為0.5g;所述 上層填料為N-丙基乙二胺填料，用量為0.5g;所述上篩板的厚度大于所述下篩板。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述萃取柱的制備方法為：取10mL所述柱 管，底部鋪設所述下篩板，裝入〇 . 5g改性多壁碳納米管，輕輕敲打使均勻填充，用隔離篩板
【專利摘要】一種新會陳皮及制品中滅線磷等農(nóng)藥的測定方法，所述農(nóng)藥為滅線磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷和水胺硫磷，所述方法包括：標準曲線的制作、樣品提取、樣品凈化和樣品測定，本發(fā)明具有操作簡單快速、靈敏度高、抗基質(zhì)干擾能力強的優(yōu)點，適用于新會陳皮及其制品中農(nóng)藥殘留的定性和定量分析。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105699516
【申請?zhí)枴緾N201610057213
【發(fā)明人】彭曉俊, 梁偉華, 蔡璇, 龐晉山, 李蓉
【申請人】新會出入境檢驗檢疫局綜合技術(shù)服務中心
【公開日】2016年6月22日
【申請日】2016年1月27日