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脂蛋白磷脂酶a2免疫層析定量檢測試紙條的制作方法_2

文檔序號:8622602閱讀:來源:國知局

[0035]圖4是本實用新型實施例四的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實施方式】
[0036]以下將結(jié)合實施例和附圖對本實用新型的構(gòu)思、具體結(jié)構(gòu)及產(chǎn)生的技術(shù)效果進行清楚、完整地描述,以充分地理解本實用新型的目的、特征和效果。顯然,所描述的實施例只是本實用新型的一部分實施例,而不是全部實施例,基于本實用新型的實施例,本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的其他實施例,均屬于本實用新型保護的范圍。另外,文中所提到的所有聯(lián)接/連接關(guān)系,并非單指構(gòu)件直接相接,而是指可根據(jù)具體實施情況,通過添加或減少聯(lián)接輔件,來組成更優(yōu)的聯(lián)接結(jié)構(gòu)。
[0037]參照圖1,脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其包括底板5,所述底板5上依次設(shè)有樣品墊1、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2、硝酸纖維素膜3和吸水墊4,所述吸水墊4和熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2分別交疊壓在硝酸纖維素膜3的兩端后在硝酸纖維素膜3的表面形成檢測區(qū),熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2為玻璃纖維膜,所述樣品墊I交疊壓在熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2上,所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2上固定有生物素標(biāo)記的脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體(濃度0.3?
1.5mg/mL)和鏈霉親和素標(biāo)記(或親和素)的熒光蛋白(使用激發(fā)光波長530nm,發(fā)射光波長570nm,濃度0.1?1.0mg/mL);所述檢測區(qū)內(nèi)的硝酸纖維素膜3上固定有識別脂蛋白磷脂酶A2另外一個表位的單克隆抗體構(gòu)成的檢測線T (濃度0.5?3mg/mL)和羊抗鼠IgG多克隆抗體構(gòu)成的質(zhì)控線C(濃度0.2?2.0mg/mL),質(zhì)控線C用于檢測試紙條的有效性。
[0038]將生物素標(biāo)記的脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體和鏈霉親和素(或親和素)標(biāo)記的熒光蛋白固定在熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2上,將有識別脂蛋白磷脂酶A2另外一個表位的單克隆抗體和羊抗鼠IgG多克隆抗體固定于硝酸纖維素膜上分別作為檢測線T和質(zhì)控線C。當(dāng)待測樣品加到樣品墊I上后,通過層析作用向前移動,樣品中脂蛋白磷脂酶A2與熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2上結(jié)合熒光標(biāo)記物(熒光蛋白)的脂蛋白磷脂酶A2抗體(Mab-LP-PLA2*Fluoro)反應(yīng)形成復(fù)合物L(fēng)P-PLA2-Mab-LP-PLA2*Fluoro,在層析作用下反應(yīng)復(fù)合物繼續(xù)向前移動經(jīng)過硝酸纖維膜上包被的LP-PLA2抗體(檢測線)時,反應(yīng)復(fù)合物被包被的LP-PLA2抗體捕獲形成復(fù)合物(Mab-LP-PLA2-LP-PLA2-Mab-LP-PLA2*Fluoro)(檢測線),通過熒光免疫分析儀讀取檢測線的反應(yīng)信號,在激發(fā)光源的作用下,熒光物質(zhì)發(fā)射特定波長的熒光信號,熒光免疫分析儀俘獲熒光信號,通過信號轉(zhuǎn)化及設(shè)定的標(biāo)準曲線自動轉(zhuǎn)化為定量數(shù)值,計算出樣本中脂蛋白磷脂酶A2的濃度,得到脂蛋白磷脂酶A2檢測結(jié)果。
[0039]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,參照圖3,所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2包括層疊的第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊20和第二熒光標(biāo)記物結(jié)合墊21,所述第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊20的一端墊在樣品墊I的下方,所述第二熒光標(biāo)記物結(jié)合墊21交疊壓在硝酸纖維素膜3的一端。熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2的分層設(shè)置,便于將熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2安裝在樣品墊I和硝酸纖維素膜3之間。
[0040]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,參照圖3所述第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊20中插入樣品墊下方的一端設(shè)有定位條22,所述樣品墊I的下端面設(shè)有能容納定位條22的定位槽。通過定位條22便于熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2和樣品墊I之間的安裝固定。
[0041]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,參照圖2和圖4,還包括卡殼,所述底板5、樣品墊1、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊2、硝酸纖維素膜3和吸水墊4均置于卡殼6內(nèi),所述卡殼6殼面上對應(yīng)于硝酸纖維膜3的位置設(shè)有觀察窗8,卡殼6殼面上對應(yīng)于樣品墊I的位置設(shè)有加樣孔?。
[0042]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,所述觀察窗8為長方形孔。
[0043]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,所述熒光蛋白可以是綠色熒光蛋白、藻膽蛋白中的一種。
[0044]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,所述樣品墊I為經(jīng)表面活性劑緩沖液浸泡處理后干燥的玻璃纖維構(gòu)件。樣品墊由玻璃纖維構(gòu)成,經(jīng)表面活性劑緩沖液浸泡處理,干燥后使用。所述樣品墊I的裁剪寬度為0.3?0.5cm。
[0045]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,所述底板5為聚苯乙烯構(gòu)件或者聚乙烯構(gòu)件。
[0046]作為上述技術(shù)方案的進一步改進,所述卡殼6包括塑料上殼60和塑料下殼61,所述塑料上殼61扣合塑料下殼61上后形成卡殼6。
[0047]以上是對本實用新型的較佳實施方式進行了具體說明,但本發(fā)明創(chuàng)造并不限于所述實施例,熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不違背本實用新型精神的前提下還可作出種種的等同變型或替換,這些等同的變型或替換均包含在本申請權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:其包括底板,所述底板上依次設(shè)有樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊,所述吸水墊和熒光標(biāo)記物結(jié)合墊分別交疊壓在硝酸纖維素膜的兩端后在硝酸纖維素膜的表面形成檢測區(qū),所述樣品墊交疊壓在熒光標(biāo)記物結(jié)合墊上,所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊上固定有生物素標(biāo)記的脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體和鏈霉親和素標(biāo)記的熒光蛋白;所述檢測區(qū)內(nèi)的硝酸纖維素膜上固定有識別脂蛋白磷脂酶A2另外一個表位的單克隆抗體構(gòu)成的檢測線和羊抗鼠IgG多克隆抗體構(gòu)成的質(zhì)控線。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊包括層疊的第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊和第二熒光標(biāo)記物結(jié)合墊,所述第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊的一端墊在樣品墊的下方,所述第二熒光標(biāo)記物結(jié)合墊交疊壓在硝酸纖維素膜的一端。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述第一熒光標(biāo)記物結(jié)合墊中插入樣品墊下方的一端設(shè)有定位條,所述樣品墊的下端面設(shè)有能容納定位條的定位槽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:還包括卡殼,所述底板、樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊均置于卡殼內(nèi),所述卡殼殼面上對應(yīng)于硝酸纖維膜的位置設(shè)有觀察窗,卡殼殼面上對應(yīng)于樣品墊的位置設(shè)有加樣孔。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述觀察窗為長方形孔。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述熒光蛋白可以是綠色熒光蛋白、藻膽蛋白中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述樣品墊為經(jīng)表面活性劑緩沖液浸泡處理后干燥的玻璃纖維構(gòu)件。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述底板為聚苯乙烯構(gòu)件或者聚乙烯構(gòu)件。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,其特征在于:所述卡殼包括塑料上殼和塑料下殼,所述塑料上殼扣合塑料下殼上后形成卡殼。
【專利摘要】本實用新型公開了一種脂蛋白磷脂酶A2免疫層析定量檢測試紙條,包括底板、樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素和吸水墊;所述試紙條由樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素、吸水墊依次搭接粘貼在底板上構(gòu)成。所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊含有鏈霉親和素標(biāo)記熒光蛋白和生物素標(biāo)記的脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體;所述硝酸纖維膜上有檢測線和質(zhì)控線,檢測線被脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體,其與上述生物素標(biāo)記的脂蛋白磷脂酶A2單克隆抗體具有不同的識別表位。本實用新型與目前常見的檢測脂蛋白磷脂酶A2的方法相比(如:化學(xué)發(fā)光法/免疫增強比濁法/膠體金法),不僅大大縮短了檢測時間,同時還提高了檢測靈敏度。
【IPC分類】G01N33-68
【公開號】CN204330781
【申請?zhí)枴緾N201420645366
【發(fā)明人】王小明, 夏坤, 佟順剛
【申請人】廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2014年10月28日
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