的免疫層析檢測(cè)試紙的示意圖。
[0028]圖2是現(xiàn)有的免疫層析檢測(cè)試紙的示意圖。
[0029]圖3人絨毛膜促性腺激素檢測(cè)試紙膠體金免疫層析法示意圖。
[0030]圖4尿微量白蛋白、尿β 2微球蛋白、抑胱素C三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)試紙膠體金免疫層析法示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0031]實(shí)施步驟:
[0032](I)反應(yīng)膜2包被:根據(jù)待檢樣本中的待檢目標(biāo)物確定包被抗體或抗原的種類，設(shè)定檢測(cè)點(diǎn)6及質(zhì)控點(diǎn)7的濃度和數(shù)量；
[0033](2)根據(jù)待檢樣本中的待檢目標(biāo)物制備結(jié)合物釋放墊5 ；
[0034](3)樣本墊4制備；
[0035](4)組裝試紙:試紙由底板1，及依次設(shè)置在底板I上的樣本墊4、結(jié)合物釋放墊5、反應(yīng)膜2、吸收墊3構(gòu)成；
[0036](5)對(duì)待檢樣本進(jìn)行檢測(cè):在試紙樣本墊4中加入待檢樣本，通過(guò)肉眼觀察多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的顯色情況可以對(duì)待檢樣本進(jìn)行定性或者半定量檢測(cè)，或采用具有信號(hào)檢測(cè)功能的儀器采集試紙上檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的特征信號(hào)可以進(jìn)行定量檢測(cè)。或者首先根據(jù)多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6的顯色情況確定待檢樣本中的待檢目標(biāo)物，再通過(guò)肉眼觀察多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的顯色情況可以對(duì)待檢樣本中不同的待檢目標(biāo)物進(jìn)行定性或者半定量檢測(cè)，或采用具有信號(hào)檢測(cè)功能的儀器采集試紙上檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的特征信號(hào)可以進(jìn)行定量檢測(cè)。
[0037]反應(yīng)膜2分成兩個(gè)區(qū)域，一個(gè)是與結(jié)合物釋放墊5相鄰接的檢測(cè)區(qū)T，一個(gè)是與吸收墊3相鄰接的質(zhì)控區(qū)C。
[0038]所述檢測(cè)區(qū)T設(shè)有2至30個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6，檢測(cè)點(diǎn)6不包括僅有條帶圖形狀，檢測(cè)點(diǎn)6為圓點(diǎn)狀、多邊形狀、其它圖形狀或不同圖形狀的組合，亦可為條帶圖形狀與其它圖形狀的組合，檢測(cè)點(diǎn)6的設(shè)定可以是同濃度或者不同濃度的同一種抗體或抗原，通過(guò)肉眼觀察多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的顯色情況可以對(duì)待檢樣本進(jìn)行定性或者半定量檢測(cè)，或采用具有信號(hào)檢測(cè)功能的儀器采集試紙上檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的特征信號(hào)可以進(jìn)行定量檢測(cè)?；蛘呤菣z測(cè)點(diǎn)6包被有同濃度或者不同濃度的不同的抗體或抗原，首先根據(jù)多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6的顯色情況確定待檢樣本中的待檢目標(biāo)物，再通過(guò)肉眼觀察多個(gè)檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的顯色情況可以對(duì)待檢樣本中不同的待檢目標(biāo)物進(jìn)行定性或者半定量檢測(cè)，或采用具有信號(hào)檢測(cè)功能的儀器采集試紙上檢測(cè)點(diǎn)6和質(zhì)控點(diǎn)7的特征信號(hào)可以進(jìn)行定量檢測(cè)。
[0039]所述質(zhì)控區(qū)C設(shè)有I至30個(gè)質(zhì)控點(diǎn)7，質(zhì)控點(diǎn)7為圓點(diǎn)狀、多邊形狀、條帶圖形狀、其它圖形狀或不同圖形狀的組合；質(zhì)控點(diǎn)7包被有可與結(jié)合物釋放墊5上結(jié)合物結(jié)合的抗體或抗原。
[0040]所述結(jié)合物釋放墊5上標(biāo)記有單一待檢目標(biāo)物相關(guān)的特異性抗體或抗原,或標(biāo)記有各待檢目標(biāo)物相關(guān)的多個(gè)特異性抗體或抗原。
[0041]在本實(shí)用新型中，標(biāo)記試劑通常是在免疫層析檢測(cè)中可用作固定抗體或抗原的載體。例如，膠體金顆粒，膠體硒顆粒，有色或熒光乳膠顆粒和磁性顆粒，特別優(yōu)選膠體金顆粒。
[0042]在本實(shí)用新型中，底板I支撐層為不吸水的材料，避免支撐材料吸收待檢樣本從而影響水平方向的移動(dòng)。底板I的材料包括PVC(聚氯乙烯)板及其他塑料材料，優(yōu)選PVC (聚氯乙烯)板。
[0043]在本實(shí)用新型中，反應(yīng)膜2的材料包括但不限于硝酸纖維素膜、尼龍膜或醋酸纖維素膜。優(yōu)選硝酸纖維素膜。
[0044]在本實(shí)用新型中，吸收墊3指吸收通過(guò)反應(yīng)膜2的待檢樣本以控制樣品擴(kuò)散的液體吸收部分。吸收墊3的材料可以是但不限于濾紙。吸收墊3可以使用一層也可以使用多層。
[0045]在本實(shí)用新型中，樣本墊4是接收待檢樣本的部分，包含任何材料和形式，只要能讓液體和待檢目標(biāo)物通過(guò)。適合于樣本墊4的材料的具體包括但不限于:玻璃纖維、丙烯酸纖維、親水聚乙烯材料、干燥的紙、無(wú)紡布和纖維織物。優(yōu)選使用玻璃纖維和無(wú)紡布。樣本墊4可以使用一層也可以使用多層。
[0046]在本實(shí)用新型中，適合于結(jié)合物釋放墊5的材料包括但不限于紙、纖維素混合物、硝酸纖維素、聚酯纖維、丙烯腈共聚物、玻璃纖維、和無(wú)紡布。優(yōu)選使用無(wú)紡布。
[0047]在本實(shí)用新型中，除了一種免疫層析法檢測(cè)試紙及試紙，還包括塑料卡，可以將試紙安裝在塑料卡之內(nèi)使用。所述的塑料卡與試紙的尺寸、樣本加入的方式和位置、抗體或抗原在反應(yīng)膜2上固化的位置相吻合。
[0048]提供下述實(shí)施例是為了更好地進(jìn)一步理解本實(shí)用新型，并不局限于所述最佳實(shí)施方式，不對(duì)本實(shí)用新型的內(nèi)容和保護(hù)范圍構(gòu)成限制，任何人在本實(shí)用新型的啟示下或是將本實(shí)用新型的其他現(xiàn)有技術(shù)的特征進(jìn)行組合而得出的任何與本實(shí)用新型相同或相近似的產(chǎn)品，均屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0049]實(shí)施例1
[0050]本實(shí)用新型的免疫層析檢測(cè)試紙的制備實(shí)施例1，制備及檢測(cè)人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢測(cè)試紙(膠體金免疫層析法)。
[0051]生物活性原料:a -HCG單克隆抗體、β -HCG單克隆抗體、IgG多克隆抗體均來(lái)自市場(chǎng)購(gòu)買。
[0052]試劑:牛血清白蛋白來(lái)自市場(chǎng)購(gòu)買。
[0053]硝酸纖維素膜來(lái)自市場(chǎng)購(gòu)買。
[0054]試紙制備程序如下:
[0055]步驟1.反應(yīng)膜2包被
[0056]根據(jù)待檢樣本中的待檢目標(biāo)物確定包被抗體種類:a -HCG單克隆抗體、IgG多克隆抗體。
[0057]根據(jù)待檢樣本中的待檢目標(biāo)物設(shè)定檢測(cè)點(diǎn)10及質(zhì)控點(diǎn)11的濃度和數(shù)量:檢測(cè)點(diǎn)10設(shè)置6個(gè)點(diǎn)，4個(gè)不同濃度；質(zhì)控點(diǎn)11設(shè)置2個(gè)點(diǎn)，I個(gè)濃度。
[0058]將15.42mg/ml的a -HCG單克隆抗體、8.02mg/ml的IgG多克隆抗體用按照附圖3的圖形包被于硝酸纖維素膜上，干燥24h，溫度為37°C，濕度=40% RH。
[0059]步驟2.結(jié)合物釋放墊5制備
[0060]取40nm的膠體金溶液，按1.2 %比例加入0.2M的K2CO3 (碳酸鉀)調(diào)節(jié)PH值，按15 μ g/ml比例加入β -HCG單克隆抗體，制成標(biāo)記物，放置室溫5min，按0.8%比例加入BSA(牛血清白蛋白)穩(wěn)定劑。
[0061]4500r離心30min,取濃縮沉淀物；將上清液繼續(xù)6500r離心45min,取濃縮沉淀物；將上清液繼續(xù)9000r離心60min，取濃縮沉淀物；將三次離心濃縮沉淀物混合均勻。
[0062]將離心好的濃縮液稀釋好，鋪于90cmX30cm的無(wú)紡布上，加液量1-1lml/張，干燥24h，溫度37°C，濕度蘭40% RH。
[0063]步驟3.樣本墊4的制備
[0064]將切割成83.5cmX 30cm的玻璃纖維和無(wú)紡布用包含0.5% NaCl (氯化鉀)、0.5%蔗糖、0.1 % BSA (牛血清白蛋白)和Tris-HCl緩沖液(三羥甲基氨基甲烷-鹽酸)(ρΗ7.4)工作液浸泡。在37°C將所述墊干燥24h，獲得樣本墊4。
[0065]步驟4.組裝試紙
[0066]將底板I平放在操作臺(tái)上，貼上雙面膠。
[0067]將包被好的反應(yīng)膜2貼在底板I上。
[0068]將吸收墊3壓反應(yīng)膜2的2mm貼上，另一端與底板I對(duì)齊。
[0069]將一層無(wú)紡布?jí)悍磻?yīng)膜2的2mm處貼上。
[0070]將結(jié)合物釋放墊5齊壓于無(wú)紡布上面。
[0071]將玻璃纖維壓于結(jié)合物釋放墊5 —半位置，另一端與底板I對(duì)齊。
[0072]再將一層無(wú)紡布一端與結(jié)合物釋放墊5上端對(duì)齊,另一端與底板I對(duì)齊。
[0073]步驟5.產(chǎn)品檢測(cè)
[0074]取含有HCG的待檢樣本尿液滴加到樣本墊4上，5min時(shí)判讀結(jié)果，T1顯色，其它T點(diǎn)無(wú)顯色，表示待檢樣本尿液中含HCG濃度為25-125mIU/ml J1和T