一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源及其質(zhì)譜分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源及其質(zhì)譜分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]質(zhì)譜分析(Mass spectrometry, MS)技術(shù)是現(xiàn)代眾多分析測(cè)試技術(shù)中同時(shí)具備了靈敏度高、特異性好、響應(yīng)速度快的普適性方法。對(duì)于絕大多數(shù)質(zhì)譜儀器而言，從待測(cè)物離子產(chǎn)生到獲得離子的響應(yīng)信號(hào)僅僅需要毫秒級(jí)的時(shí)間，封閉結(jié)構(gòu)的ESI等軟電離技術(shù)離子源開發(fā)使常壓條件下大分子的質(zhì)譜分析成為可能，然而目前大部分實(shí)驗(yàn)室裝配的質(zhì)譜儀器完成一個(gè)實(shí)際樣品(如組織樣中的特定蛋白)的定性和定量分析，需要對(duì)樣本組織進(jìn)行提取、純化等步驟將待測(cè)樣品預(yù)先處理后才可以進(jìn)行后續(xù)的質(zhì)譜檢測(cè)，整合過程通常需要數(shù)小時(shí)。可見復(fù)雜的樣品預(yù)處理過程是制約現(xiàn)代質(zhì)譜技術(shù)在生物組織研宄中的瓶頸。
[0003]常壓直接質(zhì)譜技術(shù)作為近年來發(fā)展較快的一種分析技術(shù)，因其分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、物理、醫(yī)學(xué)和生物等學(xué)科領(lǐng)域。通過在大氣壓環(huán)境下對(duì)樣品進(jìn)行離子化，由于較少或不需預(yù)處理，能夠最大可能的保證樣品本身的性質(zhì)，便于重復(fù)實(shí)驗(yàn)以解決分析過程中存在的問題，并對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。但是，迄今為止，無論傳統(tǒng)的質(zhì)譜技術(shù)還是大多數(shù)常壓質(zhì)譜技術(shù)對(duì)于塊狀樣品的直接分析只能達(dá)到樣品的表層或淺表層。例如，電噴霧解吸電離質(zhì)譜(DES1-MS)技術(shù)只能對(duì)樣品表面的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，無法直接分析樣品內(nèi)部深層物質(zhì)，這樣將丟失原始?jí)K狀樣品的內(nèi)部物質(zhì)信息。而各種各式的分析樣品，尤其是生物組織樣品，由于其自身成分的復(fù)雜性，若要揭示其內(nèi)在的信息，一方面需要重復(fù)、大量的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行對(duì)比確定，同時(shí)還需要盡量排除樣品自身物理性質(zhì)如體積、位置不同造成的差異；另一方面，需要進(jìn)行原位活體分析，以保留樣品的原始信息。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源及其質(zhì)譜分析方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中的分析方法和裝置操作復(fù)雜，容易改變樣品，易受組織樣品內(nèi)部結(jié)構(gòu)差異的影響的技術(shù)問題。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0006]一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置，由取樣器手柄11、定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15、手?jǐn)Q接頭16和萃取劑通道17構(gòu)成，所述取樣器手柄11與定量取樣器12構(gòu)成取樣裝置，定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15和手?jǐn)Q接頭16順序連接，并與萃取劑通道17。
[0007]一種內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜分析方法，使用本發(fā)明提供的內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置采集樣品并將樣品內(nèi)部物質(zhì)萃取離子化后將樣品離子引入質(zhì)譜分析
[0008]本發(fā)明提供一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源，由取樣器手柄11、定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15、手?jǐn)Q接頭16和萃取劑通道17構(gòu)成，所述取樣器手柄11與定量取樣器12構(gòu)成取樣裝置，定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15和手?jǐn)Q接頭16順序連接，并與萃取劑通道17連接。能夠?qū)崿F(xiàn)樣品的形狀不改變，保證分析結(jié)果的穩(wěn)定性和可信度。該電離源裝置內(nèi)置電噴霧嘴，取樣后可直接用于形成電噴霧，操作簡(jiǎn)便，并消除了由組織樣品紋路或血管的差異帶來的影響。通過該內(nèi)部萃取電噴霧電離源進(jìn)行質(zhì)譜分析提高了 iEES1-MS的穩(wěn)定性、定量能力和分析速度，并擴(kuò)展了 iEES1-MS的應(yīng)用范圍。
【附圖說明】
[0009]為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0010]圖1為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置全部組件示意圖；
[0011]圖1A為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置全體組件剖面圖；
[0012]圖2為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置完成采樣后示意圖；
[0013]圖2A為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置完成采樣后剖面圖；
[0014]圖3為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜分析方法流程圖；
[0015]圖4為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置配合質(zhì)譜使用示意圖；
[0016]圖5為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜法分析肺癌組織質(zhì)譜圖；
[0017]圖6為本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜法分析肺部癌旁組織質(zhì)譜圖；
[0018]圖7為iEESI源主要結(jié)構(gòu)及工作原理圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0020]本發(fā)明實(shí)施例提供了一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置，如圖1、圖1A、圖2、圖2A、圖3所示，由取樣器手柄11、定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15、手?jǐn)Q接頭16和萃取劑通道17構(gòu)成，所述取樣器手柄11與定量取樣器12構(gòu)成取樣裝置，定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15和手?jǐn)Q接頭16順序連接，并與萃取劑通道17。
[0021]其中，所述取樣器手柄11設(shè)有防滑套，與定量取樣器12連接口既能保證結(jié)合緊密，又能保證定量取樣器12方便脫離，取樣器手柄11材質(zhì)可按需選擇。
[0022]定量取樣器12由不銹鋼制成，所述定量取樣器12的樣品切割端為鋒利結(jié)構(gòu)，而所述定量取樣器12的電噴霧端成錐形，所述定量取樣器12的內(nèi)部靠近樣品切割端為空心結(jié)構(gòu)，可用于盛放樣品，所述電噴霧端中心設(shè)有小孔且內(nèi)部光滑。
[0023]毛細(xì)管固定器13 —端可與定量取樣器12無縫隙緊密連接，另一端與手?jǐn)Q接頭16緊密連接，毛細(xì)管固定器材質(zhì)具有防裂功能。
[0024]固定器內(nèi)套管14與毛細(xì)管固定器13同軸緊密結(jié)合，中心小孔按需加工，便于不同尺寸毛細(xì)管從中心小孔通過并插入定量取樣器12內(nèi)樣品中，其材質(zhì)可為不帶來污染的任意硬度大的材料。
[0025]萃取劑毛細(xì)管15尺寸可按需選擇，萃取劑毛細(xì)管15涂層穩(wěn)定不解離，萃取劑毛細(xì)管15從手?jǐn)Q接頭16卡頭處插入至樣品不外露。
[0026]萃取劑通道17由微量進(jìn)樣器、進(jìn)樣泵和石英毛細(xì)管構(gòu)成。
[0027]手?jǐn)Q接頭16內(nèi)置毛細(xì)管卡頭，細(xì)管卡頭可根據(jù)萃取劑毛細(xì)管尺寸進(jìn)行更換，手?jǐn)Q接頭16 —端與毛細(xì)管固定器13無縫隙緊密連接，另一端與萃取劑通道17連接。
[0028]采用以上設(shè)計(jì)，本發(fā)明內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置創(chuàng)造性的使用精密設(shè)計(jì)和加工的定量取樣器采集定量的樣品，控制了萃取深度，保證每次分析時(shí)不會(huì)因有效樣品量的差異對(duì)分析結(jié)果造成難以解釋的影響。同時(shí)，由于樣品被束縛在定量取樣器內(nèi)，被分析時(shí)樣品形狀不會(huì)因?yàn)檩腿┑囊攵l(fā)生改變，保證同一樣品不同批次被分析的位置相同，進(jìn)而更容易對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行比較，從而對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行確定。本發(fā)明的內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置內(nèi)置電噴霧嘴，不會(huì)因?yàn)樯飿悠返募y理或血管等影響噴霧方向造成結(jié)果的不穩(wěn)定性。本發(fā)明的內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置結(jié)構(gòu)小巧緊湊，設(shè)計(jì)精密，使用方便，方便進(jìn)行高通量的不規(guī)則樣品分析；本發(fā)明的的內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置中定量取樣器、萃取劑毛細(xì)管和毛細(xì)管固定器為一次性使用，可用于分析大量樣品，并且避免交叉污染。本發(fā)明的內(nèi)部萃取電噴霧電離質(zhì)譜分析法，能夠獲得穩(wěn)定、可信的分析結(jié)果。因此，該方法特別適用于對(duì)樣品形狀不規(guī)則、內(nèi)部信息不易獲取的樣品進(jìn)行分析。
[0029]本發(fā)明提供一種內(nèi)部萃取電噴霧電離源，由取樣器手柄11、定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15、手?jǐn)Q接頭16和萃取劑通道17構(gòu)成，所述取樣器手柄11與定量取樣器12構(gòu)成取樣裝置，定量取樣器12、毛細(xì)管固定器13、固定器內(nèi)套管14、萃取劑毛細(xì)管15和手?jǐn)Q接頭16順序連接，并與萃取劑通道17連接，并通過該內(nèi)部萃取電噴霧電離源進(jìn)行質(zhì)譜分析。能夠?qū)崿F(xiàn)樣品的形狀不改變，保證分析結(jié)果的穩(wěn)定性和可信度。該電離源裝置內(nèi)置電噴霧嘴，取樣后可直接用于形成電噴霧，操作簡(jiǎn)便，并消除了由組織樣品紋路或血管的差異帶來的影響。本發(fā)明提高了 iEES1-MS的穩(wěn)定性、定量能力和分析速度，并擴(kuò)展了 iEES1-MS的應(yīng)用范圍。
[0030]利用本發(fā)明實(shí)施例提供的內(nèi)部萃取電噴霧電離源裝置采集樣品并將樣品內(nèi)部物質(zhì)萃取離子化后將樣品離子引入質(zhì)譜分析，如圖3所示，分析方法包括:
[0031]步驟301、從毛細(xì)管固定器B端將固定器內(nèi)套管裝配于毛細(xì)管固定器中；
[0032]步驟302、將毛細(xì)管固定器B端與手?jǐn)Q接頭緊密連接；
[0033]步驟303、將取樣器手柄與定量取樣器組合，對(duì)樣品進(jìn)行按壓切割后完成取樣；
[0034]步驟304、將結(jié)合在取樣器手柄上的攜有樣品的定量取樣器按入毛細(xì)管固定器A端，取下取樣器