抗體效價(jià)達(dá)212-2"W上；收集被免疫雞所產(chǎn)雞蛋， 分離出卵黃，經(jīng)冷凍干燥，制得卵黃抗體凍干粉。
[0016] 實(shí)施例2, 一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，該添加劑 由W下重量配比的S種原料制成： (1) 抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉83% ; (2) 黃瓊粉10. 5%; (3) 0-環(huán)糊精 5. 5〇/〇; 所述的抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0017] 實(shí)施例3, 一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，該添加劑 由W下重量配比的S種原料制成： (1) 抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉85% ; (2) 黃巧粉10%; (3)e-環(huán)糊精5; 所述的抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉的制備方法與實(shí)施例I相同。
[001引實(shí)施例4, 一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，該添加劑 由W下重量配比的S種原料制成： (1) 抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉82. 5% ; (2) 黃瓊粉11%; (3) 0-環(huán)糊精 6. 50/0; 所述的抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0019] 實(shí)施例5,實(shí)施例1 - 4任何一項(xiàng)一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊 飼料添加劑中：抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉制備方法步驟④中，冷凍干燥時(shí)， 蛋黃液厚度6mm，凍干時(shí)間為IOho
[0020] 實(shí)施例6,實(shí)施例1 - 5任何一項(xiàng)一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊 飼料添加劑中：所述的黃巧粉的粒徑在800~1000目，所述的0-環(huán)糊精的純度不低于80%。
[0021] 實(shí)施例7,實(shí)施例1 - 6任何一項(xiàng)一種抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊 飼料添加劑中：采用噴霧干燥的方式，制得微膠囊飼料添加劑。
[0022] 實(shí)施例8,本發(fā)明抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑的應(yīng)用 實(shí)驗(yàn)及其結(jié)果。
[0023] 實(shí)驗(yàn)時(shí)間：2014年度12月。
[0024] 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：江蘇省淮海工學(xué)院水產(chǎn)動(dòng)物病害實(shí)驗(yàn)室。 陽(yáng)02引實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：異育銀娜。
[00%] (1)使用抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑。使用時(shí)W所獲 得的抗體效價(jià)在21Z~2"的抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體凍干粉82. 5%，粒徑在900 目的黃巧粉11%，含量在80%W上的0 -環(huán)糊精6. 5%，上述原料經(jīng)噴霧干燥(噴口溫度在 140°C)制得微膠囊干粉。抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體凍干粉的制法同實(shí)施例1。
[0027] (2)實(shí)驗(yàn)組異育銀娜（50尾）投喂本發(fā)明抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微 膠囊飼料添加劑，按8%的比例添加在異育銀娜配合飼料，對(duì)照組異育銀娜（50尾）投喂市 售異育銀娜配合飼料。
[0028] (3)投喂1周后，分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組異育銀娜的成活率。
[0029] (4)投喂1周后，對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組異育銀娜進(jìn)行保護(hù)力檢驗(yàn)，分別取異育銀娜30 尾，用溫和氣單胞菌JY081016-1、嗜水氣單胞菌WJ11-3及維氏氣單胞菌混合菌液進(jìn)行浸浴 感染，每株菌體終濃度均達(dá)到l〇6CFU/mL。試驗(yàn)期間繼續(xù)按上述（2)進(jìn)行投喂，試驗(yàn)期為2 周。
[0030] (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組異育銀娜投喂抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊 飼料添加劑（8%)后，可獲得較高的抗病能力，成活率比對(duì)照組高28%。實(shí)驗(yàn)異育銀娜用溫和 氣單胞菌JY081016-1、嗜水氣單胞菌WJl1-3及維氏氣單胞菌混合菌液進(jìn)行浸浴感染，投喂 所述的抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑（8%)及市售異育銀娜配合 飼料（92%)的實(shí)驗(yàn)組，異育銀娜感染2周后存活率達(dá)72%，投喂市售配合飼料對(duì)照組異育銀 娜存活率僅為44%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抗異育銀娜細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑 可使異育銀娜獲得較高的免疫保護(hù)力。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，其特征在于，該添加 劑由以下重量配比的三種原料制成： (1) 抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉80~85% ; (2) 黃芪粉 10%~12% ; (3 ) 0 _ 環(huán)糊精 5~8% ; 所述的抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉的制備方法步驟如下： ① 將引起異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的病原溫和氣單胞菌（JeromwassoAria) JY081016-1、嗜水氣單胞菌 Aji/rOjOAiJa)WJ11-3及維氏氣單胞菌 DF-I菌株分別接種在普通營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基上，28-30 °C搖床培養(yǎng)24h，加入體積終 濃度0. 3%的甲醛28°C滅活48h，離心得滅活菌體； ② 取黃芪用蒸餾水浸泡30-60min后煎煮，過濾，濃縮至終濃度為原藥lg/mL，得黃芪浸 出液； ③ 將三種滅活菌體與黃芪浸出液混合，制得水劑型疫苗；疫苗液中病原溫和氣單胞菌 JY081016-1、嗜水氣單胞菌WJ11-3及維氏氣單胞菌DF-I免疫原均達(dá)到Iow-IO12CellsAiL, 黃芪浸出液為lg/mL; ④ 用制得的三種病原氣單胞菌油乳劑滅活疫苗，采用口服及滴鼻免疫的方法免疫成年 產(chǎn)蛋雞，第1次免疫劑量為：口服免疫是將疫苗液加入到飲水中，加入量為5mL;滴鼻免疫 是將疫苗液滴入蛋雞鼻腔，滴入量為ImL;-周后按前述方法加強(qiáng)免疫，連續(xù)加強(qiáng)免疫5 次，共免疫6次，免疫結(jié)束后第6周，卵黃抗體效價(jià)達(dá)2 12-214以上；收集被免疫雞所產(chǎn)雞蛋， 分離出卵黃，經(jīng)冷凍干燥，制得卵黃抗體凍干粉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，其 特征在于：抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉制備方法步驟④中，冷凍干燥時(shí)，蛋黃 液厚度6mm，凍干時(shí)間為IOh03. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，其 特征在于：所述的黃芪粉的粒徑在800~1000目，所述的(6-環(huán)糊精的純度不低于80%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，其 特征在于：采用噴霧干燥的方式，制得微膠囊飼料添加劑。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，其 特征在于，各原料的重量配比如下： (1) 抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉82. 5% ; (2) 黃芪粉11%; (3) (6-環(huán)糊精 6. 5%。
【專利摘要】本發(fā)明是一種抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥的卵黃抗體微膠囊飼料添加劑，該添加劑由三種原料組成，抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉、黃芪粉及β-環(huán)糊精；其中抗異育銀鯽細(xì)菌性敗血癥卵黃抗體凍干粉，主要是使異育銀鯽降低或免受三種嗜溫氣單胞菌的感染，黃芪粉是提高異育銀鯽免疫力，β-環(huán)糊精主要是使卵黃抗體凍干粉起到包埋緩釋作用。該微膠囊飼料添加劑按一定的比例與市售異育銀鯽配合飼料一起投喂使用，能預(yù)防與治療異育銀鯽養(yǎng)殖期間由三種病原嗜溫氣單胞菌引起的疾病，增加異育銀鯽養(yǎng)殖產(chǎn)量，顯著地提高異育銀鯽養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。解決目前異育銀鯽養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中易發(fā)生細(xì)菌性敗血癥的問題。
【IPC分類】A61P31/04, A61K39/395, A23K1/16, A61K9/50
【公開號(hào)】CN105169391
【申請(qǐng)?zhí)枴?br>【發(fā)明人】張曉君, 高曉建, 畢可然, 安振華, 董小敬, 徐加濤
【申請(qǐng)人】揚(yáng)州大學(xué)
【公開日】2015年12月23日
【申請(qǐng)日】2015年10月16日