益骨口服液、益骨的化合物單體以及口服液的醫(yī)藥應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種益骨口服液及其制備方法和醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 骨質(zhì)疏松癥是一種以骨質(zhì)減少，骨組織微細(xì)結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致骨質(zhì)脆性增加和易于 發(fā)生骨折的全身性骨代謝疾病，屬于中醫(yī)"骨痹"、"骨痿"范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎為先天之本， 腎主骨生髓?！夺t(yī)學(xué)精義》指出"腎藏精，精生髓，髓生骨，故骨者腎之所主也；髓者，腎精所 生，精足則髓足，髓足者則骨強"。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥發(fā)生與腎的關(guān)系密切，腎虛是骨質(zhì)疏松 癥的主要病機(jī)。脾為后天之本，氣血生化之源，腎精依賴于脾精的滋養(yǎng)才能源源不斷得以充 盈。若脾失健運，脾精不足，腎精乏源，骨髓空虛，勢必導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生，故脾虛也是 骨質(zhì)疏松癥的重要病機(jī)之一。"氣虛則血不行"，絕經(jīng)后婦女與年老者多氣虛、血瘀，血瘀則 加速了骨質(zhì)疏松癥腰背疼痛的病理進(jìn)程。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了進(jìn)一步挖掘、優(yōu)化現(xiàn)有的益骨口服液，本發(fā)明旨在提供一種治療效果更優(yōu)的 益骨口服液，同時還提供了一種從自然界補骨脂草藥中首次分離出來的益骨化合物單體以 及它的制備方法，另外，還提供了一種上述益骨口服液的醫(yī)藥用途。
[0004] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0005] -種益骨口服液，藥用成分包括處方比例的生藥和化合物單體，口服液總重量為 所述生藥重量的4~6倍，化合物單體的濃度為80~120yg/mL;所述處方比例的生藥包括淫 羊藿、骨碎補、生地、茯苓、仙靈脾和紅花，它們的重量比為10~14:10~14:10~14:20~30: 10~14:20~30;所述的化合物單體為一種結(jié)構(gòu)新穎的黃酮化合物(I )，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下，
[0006] I X ； 〇
[0007] 進(jìn)一步地，口服液總重量為生藥重量的5倍，化合物單體的濃度為lOOyg/mL;所述 處方比例的生藥包括淫羊藿、骨碎補、生地、茯苓、仙靈脾和紅花，重量比為12:12:12:25: 12：25〇
[0008] 進(jìn)一步地，所述黃酮化合物（I)的制備方法包括如下步驟：
[0009] a、將干燥的生藥補骨脂粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0010] b、步驟a中正丁醇提取物用大孔樹脂除雜，先用5~15 %乙醇洗脫6~10個柱體積， 再用70~80 %乙醇洗脫8~12個柱體積，收集70~80 %洗脫液，減壓濃縮得70~80 %乙醇洗 脫濃縮物；
[0011] C、步驟b中乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65 :1、30:1、15:1和 8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；
[0012] d、步驟C中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為15:1、8:1和5:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；
[0013] e、步驟d中組分2(即按照洗脫次序得到的第二個組分）用十八烷基硅烷鍵合的反 相硅膠分離，用體積百分濃度為70~80 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到純的黃酮化合物(I)。
[0014] 進(jìn)一步地，步驟a中，用85%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0015] 進(jìn)一步地，步驟b中，正丁醇提取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個 柱體積，再用75%乙醇洗脫10個柱體積，收集75%洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫濃縮 物。
[0016]進(jìn)一步地，步驟e中，組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度 為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的黃酮 化合物(I)。
[0017] -種益骨的化合物單體，所述益骨的化合物單體為黃酮化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如（I)
所示：
[0018]
[0019]
[0020] 一種上述益骨的化合物單體的制備方法，包括如下步驟：
[0021] a將干燥的生藥補骨脂粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0022] b步驟a中正丁醇提取物用大孔樹脂除雜，先用5~15 %乙醇洗脫6~10個柱體積， 再用70~80 %乙醇洗脫8~12個柱體積，收集70~80 %洗脫液，減壓濃縮得70~80 %乙醇洗 脫濃縮物；c步驟b中乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1、30:1、15:1和 8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；
[0023] d步驟c中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為15:1、8:1和5:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；
[0024] e步驟d中組分2(即按照洗脫次序得到的第二個組分）用十八烷基硅烷鍵合的反相 硅膠分離，用體積百分濃度為70~80 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到純的黃酮化合物(I)。
[0025] 上述益骨口服液在制備防治骨質(zhì)疏松癥的藥物中的應(yīng)用。
[0026] 所述益骨的化合物單體在制備防治骨質(zhì)疏松癥的藥物中的應(yīng)用。
[0027] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點:本發(fā)明通過在改進(jìn)現(xiàn)有的益骨口服液的配方，并 在新的益骨口服液的配方的基礎(chǔ)上，加入一種從補骨脂中分離純化到的結(jié)構(gòu)新穎的黃酮化 合物，顯著提高了現(xiàn)有的益骨口服液的療效，是對現(xiàn)有益骨口服液配方的一次重大升級。
[0028] 同時，從補骨脂中分離純化到的結(jié)構(gòu)新穎的黃酮化合物單體屬于首次分離的新化 合物，也具有很好的益骨作用，另外由于其單體純粹，單位含量的有效性更好，因此不僅具 有直接的藥用價值，而且配上上述益骨口服液，因提取了其有效成分，進(jìn)而大大提高了治療 的有效性?？梢姡景l(fā)明的益骨口服液可以在相同療效的情況下，大大降低了原來中藥煎煮 的藥用量，這樣不僅能節(jié)省用藥成本，而且還降低了用藥副作用。實驗結(jié)果也表明，本發(fā)明 提供的益骨口服液比現(xiàn)有技術(shù)中的益骨口服液更能增加去勢大鼠脊柱與股骨上端骨密度。
【附圖說明】
[0029]圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0030] 圖2為化合物（I)計算E⑶和實驗E⑶圖。
【具體實施方式】
[0031]下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0032] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0033]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司；甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司；乙醇為藥用級別乙醇，所述濃度為體 積百分濃度。
[0034]實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0035] (a)將干燥的生藥補骨脂(8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提取(25LX 3次），合并提 取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水飽和的正丁醇 (3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物(375g);(b)步驟 (a)中正丁醇萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用75%乙醇洗 脫10個柱體積，收集75%洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫濃縮物（I29g);(c)步驟(b)中 75%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1 (10個柱體積）、30:1 (10個柱體 積）、15:1(8個柱體積)和8:1(10個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步 驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為12:1(8個柱體積）、8:1(10個 柱體積)和5:1(8個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2 (15g)