H-13 與 C-8、C-12、C-13 和 C-15，H2-16 與 C-14、C-15 和 C-17，H2-18 與 C-9、C-11 和 C-12，H3-19 與 C-1、 C-2和C-3，H3-20與C-5、C-6和C-7相關(guān)信號，通過上述匪R譜中的相關(guān)信息可以構(gòu)建該化合 物的連接方式，并且可以確定該化合物為rhamnofolane型二砲類化合物。HMBC譜中，H-7與 C-5、C-6、C-8和C-14以及H3-20與C-5、C-6和C-7的相關(guān)性可知C-6和C-7分別連有一個羥基。 此外，通過H-12與H-13化學位移及偶合常數(shù)可知C-12和C-13之間為雙鍵。R0ESY譜中H-7和 H-8與Me-20相關(guān)信號可知兩個-OH為α構(gòu)型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和R0ESY譜，以及文獻關(guān) 于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型進一步通過ECD試驗確定， 理論值與實驗值基本一致。
[0018]該化合物的化學結(jié)構(gòu)式及碳原子編號如下所示：
〇
[0020] 實施例2:對D-半乳糖致衰老模型小鼠學習記憶的影響
[0021] 1、材料與方法 [0022] 1.1動物、藥品與試劑
[0023] 昆明種健康小鼠，雌雄各半，體重18~22g，由貴陽醫(yī)學院動物實驗中心提供，清潔 級。
[0024] 阿洛西林鈉購自中國藥品生物制品檢定所。化合物（I)自制，制備方法見實施例1。 D-半乳糖(美國Amresco公司）；考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒;超氧化物歧化酶(S0D)檢測試 劑盒;丙二醛(MDA)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所）；吡拉西坦片（商品名：腦復康， 湖北華中藥業(yè)有限公司）。
[0025] 1.2儀器
[0026] 721紫外可見分光光度計(上海第三分析儀器廠hMorris水迷宮（泰盟科技有限公 司）。
[0027] 1.3動物分組與給藥
[0028] 小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機分為6組，每組10只：正常對照組，模型對照組，化 合物（I)組(20mg/kg)，阿洛西林鈉組(20mg/kg)，阿洛西林鈉與化合物（I)組合物組（10mg/ 1^+1〇11^/1^)，陽性對照組化;[瓜06七3111，？;[1'，36011^/1^，臨床劑量的10倍量）。藥物處理于第1 天開始，除正常對照組和模型對照組給予蒸餾水外，其余各組動物均灌胃給予上述劑量藥 物，連續(xù)給藥70d。
[0029] 1.4D-半乳糖致衰老小鼠模型的建立
[0030]上述動物除正常對照組外，其余給藥l〇d后均頸背部皮下注射D-半乳糖（120mg/ kg)，連續(xù)注射60d。
[0031] 1.5Morris 水迷宮法
[0032] 分別記錄定向航行實驗中小鼠在120s內(nèi)找到安全平臺的時間（逃避潛伏期）和游 泳路徑長度(搜索距離）。
[0033] 1 · 6S0D活性及MDA含量測定
[0034]學習記憶測試完畢后，頸椎脫白處死小鼠，取其大腦組織，按每克腦組織中加入生 理鹽水9mL的比例制成10%腦勻漿（勻漿過程始終處于冰水浴中），3500r/min低溫離心 1 Omin。取適量上清，測定S0D活性及MDA含量，具體步驟按試劑盒操作說明進行。
[0035] 2、實驗結(jié)果
[0036] 2· 1學習記憶能力測試(Morris水迷宮法）
[0037]結(jié)果表明，模型對照組小鼠學習記憶能力明顯降低，定向航行實驗中游抵平臺的 時間和距離較正常對照組顯著增加(P<〇.05)，說明造模成功；陽性對照組的小鼠游抵平臺 的時間和距離與模型對照組比較明顯減少(P<〇.01);化合物（I)組、阿洛西林鈉組的小鼠 游抵平臺的時間和距離與模型對照組比較減少(P<〇.05);阿洛西林鈉與化合物（I)組合物 組的小鼠游抵平臺的時間和距離與模型對照組比較明顯減少(P<〇.01)，與陽性對照組基 本一致。結(jié)果見下表。
[0039] 2 · 2腦組織S0D活性和MDA含量測定
[0040] 結(jié)果表明，與正常對照組比，模型對照組小鼠 S0D活性明顯降低(P<0.05)，MDA含 量明顯升高(P < 〇. 〇 5);與模型對照組比，陽性對照組的小鼠 S 0 D活性明顯升高(P < 0.01)， MDA含量明顯降低(P<0.01);與模型對照組比，化合物（I)組、阿洛西林鈉組的小鼠 S0D活性 明顯升高(P<〇.05)，MDA含量明顯降低(P<0.05);與模型對照組比，阿洛西林鈉與化合物 (I)組合物組的小鼠 S0D活性明顯升高(P<0.01)，MDA含量明顯降低(P<0.01)，與陽性對照 組基本一致。結(jié)果見下表。
[0042]上述結(jié)果表明，阿洛西林鈉和化合物（I)單獨作用于D-半乳糖模型小鼠時，均能改 善小鼠的學習記憶能力，當阿洛西林鈉和化合物（I)聯(lián)合作用時，改善作用更強。同時，阿洛 西林鈉和化合物(I)單獨作用于D-半乳糖模型小鼠時，均能提高機體S0D抗氧化酶活力的功 能，具有延緩衰老的作用，當阿洛西林鈉和化合物（I)聯(lián)合作用時，這種作用更為明顯。這些 結(jié)果均提示阿洛西林鈉和化合物（I)之間存在協(xié)同改善學習記憶能力、提高機體抗氧化抗 衰老的作用。
[0043]上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，2. -種阿洛西林鋼的藥物組合物，其特征在于:包括阿洛西林鋼、如權(quán)利要求1所述的 化合物(I)和藥學上可W接受的載體。3. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含W下操作步驟：（a)將知 母的干燥根粉碎，用80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸 乙醋和水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物； (b)步驟(a)中正下醇萃取物用DlOl型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用 70%乙醇洗脫10個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b) 中70 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲 燒-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步驟(C)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比 為10:1、5:1和2:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基 硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~15個 柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。4. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備抗衰老的藥物中的應用。5. 權(quán)利要求2所述的阿洛西林鋼的藥物組合物在制備抗衰老的藥物中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿洛西林鈉的藥物組合物及其抗衰老作用，本發(fā)明提供的阿洛西林鈉的藥物組合物中含有阿洛西林鈉和一種從知母的干燥根中分離得到的結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，阿洛西林鈉和化合物(Ⅰ)單獨作用于D-半乳糖模型小鼠時，均能改善小鼠的學習記憶能力，當阿洛西林鈉和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時，改善作用更強。同時，阿洛西林鈉和化合物(Ⅰ)單獨作用于D-半乳糖模型小鼠時，均能提高機體SOD抗氧化酶活力的功能，具有延緩衰老的作用，當阿洛西林鈉和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時，這種作用更為明顯，可以開發(fā)成抗衰老的藥物。
【IPC分類】C07C45/79, A61K31/122, A61K31/431, C07C49/743, A61P39/06, C07C45/78
【公開號】CN105646170
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】李晨露
【申請人】李晨露
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月22日