包含透明質(zhì)酸和甲哌卡因的組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及包含透明質(zhì)酸或其鹽的無菌且可注射的組合物領(lǐng)域，尤其是軟組織填 充物組合物，用于特別是增強(qiáng)和/或修復(fù)軟組織，包括牙周組織，尤其用于治療角蛋白材料 如皮膚的缺陷和瑕疵。本發(fā)明還設(shè)及相關(guān)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 已經(jīng)努力開發(fā)對(duì)糾正皮膚缺陷，如瘤痕和皺紋或?qū)υ鰪?qiáng)受試者的組織有用的組合 物，W改善皮膚，特別是面部皮膚的外觀。糾正運(yùn)樣的缺陷所用的主要方法設(shè)及向臨近目的 或所需組織增強(qiáng)的皮膚的真皮皮層中注射填充物組合物。
[0003] 透明質(zhì)酸是細(xì)胞外基質(zhì)化CM)的主要組分。因此，主要在皮膚上發(fā)現(xiàn)大量的透明質(zhì) 酸。它也是關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的主要生理學(xué)上的組分且在滑液中尤其豐富。
[0004] 因此，透明質(zhì)酸，其酸或鹽形式，是主要用作用于組織工程應(yīng)用，特別是用于真皮 組織或其他軟組織像牙銀組織的增強(qiáng)的可注射填充物材料的生物材料。
[0005] 透明質(zhì)酸是由D-葡糖醒酸和N-乙酷基-D-葡萄糖胺重復(fù)單元組成的線性非硫酸化 的糖胺聚糖（Tammi R. ,A邑ren UM. ,Tuhkanen AL. ,Tammi M.Hyaluronan metabolism in skin.Progress in Histochemistry&Cytochemistry 29(2): I.-81,1994)。
[0006] 在皮膚中，透明質(zhì)酸主要是由真皮成纖維細(xì)胞和表皮角質(zhì)形成細(xì)胞合成（Tammi R.，同上所引）。憑借其殘基帶有負(fù)電荷，透明質(zhì)酸充當(dāng)水累用于保持皮膚的彈性。
[0007] 另外，ECM是對(duì)組織具有結(jié)構(gòu)性和調(diào)節(jié)作用的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。ECM由膠原蛋白和彈性蛋 白，還有基本物質(zhì)，主要是水、礦物質(zhì)和蛋白聚糖組成。該基質(zhì)賦予皮膚充盈和堅(jiān)實(shí)、彈性和 色澤的機(jī)械性能。
[000引關(guān)于皮膚，則發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增長(zhǎng)，透明質(zhì)酸的量和它的聚合度減小，導(dǎo)致保留 在結(jié)締組織量中水的量的下降。
[0009]同時(shí)，ECM組分主要被稱為基質(zhì)金屬蛋白酶或MMP的內(nèi)膚酶型酶降解。
[0010]最后，細(xì)胞防御的減小增力化外部應(yīng)力如氧化應(yīng)激引起的損傷和失調(diào)。
[0011] 然后皮膚經(jīng)歷老化過程，導(dǎo)致角質(zhì)物質(zhì)的，特別是皮膚的缺陷和瑕疵的外觀。
[0012] 在皺紋填充物，主要由透明質(zhì)酸組成的凝膠的領(lǐng)域，出現(xiàn)化學(xué)交聯(lián)的情況下，在旁 側(cè)皮內(nèi)注射填充凹陷乳房。交聯(lián)能增加皮膚內(nèi)產(chǎn)品的持久性。運(yùn)樣的基于透明質(zhì)酸的凝膠， 如有必要的話交聯(lián)的，通過由真空皮膚皺紋產(chǎn)生的填充物的機(jī)械作用使得皺紋減少。
[0013] 然而，已知運(yùn)樣的凝膠的注射往往使患者產(chǎn)生疼痛感，如果凝膠是高粘性和/或彈 性的，則運(yùn)種感覺進(jìn)一步加劇。
[0014] 現(xiàn)在，為了克服運(yùn)個(gè)技術(shù)問題，在局部麻醉劑下可使用基于透明質(zhì)酸的主要填充 物，W確保更大的患者舒適度。該局部麻醉劑僅為利多卡因，劑量約0.3%。
[0015] 然而，已知利多卡因考慮到其血管舒張性質(zhì)可能顯示的缺點(diǎn)指由患者體內(nèi)的過快 吸收和有時(shí)加劇血腫的發(fā)生，為了明顯的美感原因，血腫是盡可能避免的?？朔鲜鰡栴}的 一種解決方案可包括施用與血管收縮劑，尤其是腎上腺素相關(guān)的利多卡因（J.Endod.2013 年5月；39(5) :597-9)。然而，血管收縮劑像腎上腺素的存在，可能需要添加防腐劑，防腐劑 對(duì)患者并不總是惰性的，可能導(dǎo)致過敏。
[0016] 因此，仍然需要開發(fā)主要由透明質(zhì)酸組成的凝膠，產(chǎn)生化學(xué)交聯(lián)的情況，它克服了 上述在注射過程中對(duì)患者的疼痛感的技術(shù)問題且也不設(shè)及任何過敏問題，也不加劇血腫的 發(fā)生。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0017] 根據(jù)第一方面，本發(fā)明設(shè)及一種方法，至少包括通過注射施用給需要其的患者：
[0018] (a)至少有效量的透明質(zhì)酸或其鹽;和
[0019] (b)至少有效量的甲贓卡因或其鹽作為麻醉劑，
[0020] 所述甲贓卡因在透明質(zhì)酸之前施用或與透明質(zhì)酸同時(shí)施用。
[0021 ]根據(jù)特定的方面，本發(fā)明的方法旨在軟組織增強(qiáng)。
[0022] 目標(biāo)組織可W是皮膚，但也可W是牙銀組織。
[0023] 尤其是，本發(fā)明的方法可W有效地(i)用于預(yù)防和/或治療皮膚的表面外觀。
[0024] 因此，本發(fā)明的方法可有利地（ii )用于預(yù)防和/或治療隨時(shí)間而老化的和/或由外 部因素如壓力、空氣污染、煙草或長(zhǎng)時(shí)間暴露于紫外線化V)照射導(dǎo)致的皮膚癥狀，（iii)預(yù) 防和/或治療皮膚損傷的表面外觀，（iv)防止和/或治療皮膚損傷的粘彈性或生物力學(xué)性能 和/或(V)用于長(zhǎng)期填充皮膚的體積缺陷，特別是填充皺紋。
[0025] 此外，本發(fā)明的方法還可有利地用于治療例如隨著牙齒損失、年齡增加、牙周病和 失調(diào)、牙周創(chuàng)傷和牙齒植入后發(fā)生的牙銀結(jié)構(gòu)和外形和骨組織中缺陷的部位和缺陷，用于 增強(qiáng)牙齒修復(fù)術(shù)的配合和功能，包括但不限于植入物、牙冠、橋托...。
[0026] 根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的方法還可有用的用于軟骨再生。
[0027] 根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的方法可W用作治療關(guān)節(jié)炎。
[0028] 最后，透明質(zhì)酸是類似于位于眼睛中的天然流體的粘稠透明液體。因此，已經(jīng)提出 在手術(shù)過程中保持眼睛流體體積。因此，本發(fā)明的方法在大多數(shù)的眼科眼內(nèi)手術(shù)中也是有 用的，包括白內(nèi)障摘出術(shù)、人工晶體(I化)插入和去除、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、創(chuàng)傷手術(shù)、眼 整形手術(shù)和眼肌手術(shù)。
[0029] 根據(jù)第二方面，本發(fā)明設(shè)及無菌和可注射的組合物，尤其是軟組織填充物組合物， 其包含有效量的至少透明質(zhì)酸或其鹽和包含有效量的至少甲贓卡因或其鹽作為麻醉劑。
[0030] 最后，根據(jù)另一個(gè)方面，本發(fā)明設(shè)及制備無菌和可注射的組合物，尤其是軟組織填 充物組合物，所述方法至少包括W下步驟：
[0031] a)提供透明質(zhì)酸或其鹽的至少一種凝膠，所述透明質(zhì)酸選自于交聯(lián)的透明質(zhì)酸形 式、非交聯(lián)的透明質(zhì)酸形式和它們的混合物；
[0032] b)向所述透明質(zhì)酸的凝膠加入至少甲贓卡因或其鹽作為麻醉劑;和
[0033] C)將步驟b)中獲得的混合物滅菌。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 根據(jù)第一方面，本發(fā)明設(shè)及一種方法，至少包括通過注射施用給需要其的患者：
[0035] (a)至少有效量的透明質(zhì)酸或其鹽;和
[0036] (b)至少有效量的甲贓卡因或其鹽作為麻醉劑，
[0037] 所述甲贓卡因在透明質(zhì)酸之前施用或與透明質(zhì)酸同時(shí)施用。
[0038] 本發(fā)明人確實(shí)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的方法可構(gòu)成目前方法可行的替代，尤其用 于預(yù)防和/或治療皮膚的表面外觀，其考慮施用透明質(zhì)酸與利多卡因而且（i)用于治療牙銀 結(jié)構(gòu)和外形和骨組織中缺陷的部位和缺陷，（ii)用于眼科眼內(nèi)手術(shù)，（iii)用于軟骨的再生 和(iv)用于治療關(guān)節(jié)炎。
[0039] 首先，與利多卡因相比，甲贓卡因相比于利多卡因不顯示顯著的血管舒張性質(zhì)。
[0040] 此外，甲贓卡因具有7,6的地曰，而利多卡因具有7,9的pKa。因此，甲贓卡因具有比 利多卡因更低的地曰，它顯示更好的脂溶性，運(yùn)提高了其通過脂質(zhì)屏障的擴(kuò)散。因此，由于運(yùn) 樣的事實(shí)，甲贓卡因可能比利多卡因更快地被吸收，因此，甲贓卡因適合于更好地防止在注 射過程中的疼痛感。
[0041] 但是，最重要的是，本發(fā)明人已出乎意料地觀察到，根據(jù)本發(fā)明的填充物組合物， 即包括甲贓卡因作為麻醉劑，可W在不顯著影響透明質(zhì)酸凝膠穩(wěn)定性的情況下進(jìn)行滅菌。
[0042] 確實(shí)已知，透明質(zhì)酸的凝膠對(duì)于如用于其滅菌所需的熱處理特別敏感，在如麻醉 劑的其它材料的存在下可增加該低穩(wěn)定性。出乎意料的是，使用與利多卡因相當(dāng)?shù)募宗E卡 因顯著降低運(yùn)種不希望的現(xiàn)象，如在下面的實(shí)施例1和2中所示的。此外，本發(fā)明人已經(jīng)表 明，根據(jù)本發(fā)明的組合物還符合時(shí)間上穩(wěn)定性方面的要求，如下面實(shí)施例3中所示的。
[0043] 根據(jù)本發(fā)明人，包含透明質(zhì)酸的軟組織填充物組合物內(nèi)的運(yùn)些上述有利效果的表 現(xiàn)形式是未知的。
[0044] 優(yōu)選地，透明質(zhì)酸或其鹽與甲贓卡因或其鹽同時(shí)施用。
[0045] 優(yōu)選地，通過注射施用是表皮內(nèi)和/或皮內(nèi)和/或皮下注射。然而，它還可通過牙 銀、關(guān)節(jié)和眼內(nèi)途徑施用。
[OOW 透明質(zhì)酸
[0048] 如上述的透明質(zhì)酸(也稱為透明質(zhì)酸或透明質(zhì)酸鹽)是由D-葡糖醒酸和N-乙酷基-D-葡萄糖胺重復(fù)單元組成的線性非硫酸化的糖胺聚糖（Tammi R. ,Agren UM. ,Tuhkanen AL.,Tammi M.Hyaluronan metabolism in skin. Progress in Histochemistryfe Cytochemistry 29(2):1.-81,1994)。
[0049] 在皮膚中，透明質(zhì)酸主要是由真皮成纖維細(xì)胞和表皮角質(zhì)