自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置及其使用方法
【專利說明】自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置及其使用方法
[0001]相關(guān)申請的交叉引用
[0002 ]本申請要求2013年10月24日提交的美國臨時專利申請61 /895，170的優(yōu)先權(quán)，其公 開內(nèi)容全文W引用方式并入本文。
[圓]發(fā)明背景
[0004] 很多細(xì)菌對氧氣敏感，在存在氧氣的情況下不會生長。確定此類厭氧微生物在多 種環(huán)境中的生存力可能很有用。例如，確定食品加工和/或包裝設(shè)備中是否存在厭氧微生物 可能很重要。確定醫(yī)療環(huán)境中是否存在厭氧微生物，例如，利用診斷分析法確定是否存在病 原體也可能很重要。又如，水處理設(shè)施檢測水樣，確定是否存在此類微生物。
[0005] 現(xiàn)有多種裝置可用來培養(yǎng)微生物。例如，長期W來用皮氏培養(yǎng)皿培養(yǎng)微生物。如本 領(lǐng)域已知，皮氏培養(yǎng)皿是底部淺而平的圓形培養(yǎng)皿，其中盛裝支持微生物生長的適宜培養(yǎng) 基，如瓊脂和營養(yǎng)素。然而，使用瓊脂培養(yǎng)基可能不方便，且耗費(fèi)時間。例如，在添加樣品前， 必須先將瓊脂培養(yǎng)基滅菌、融化，再冷卻。
[0006] 另外，使用皮氏培養(yǎng)皿可能難W提供適宜培養(yǎng)厭氧微生物的環(huán)境。由于厭氧微生 物在存在氧氣的情況下無法大量生長，所W可能需要繁瑣的理化工藝來促使此類微生物生 長。通常必須改造此類裝置，也就是說，必須將其成形或構(gòu)造成能夠提供阻止氧氣透過的物 理屏障。
[0007] 現(xiàn)已開發(fā)出使用滲入?yún)捬跖囵B(yǎng)裝置的化學(xué)試劑除去氧氣的其他技術(shù)。此類裝置通 常包含滲入凝膠或營養(yǎng)培養(yǎng)基的還原劑或細(xì)菌無菌膜碎片。另外，美國專利3,38,794描述 了一種厭氧細(xì)菌培養(yǎng)裝置，該裝置由不透氧的膜層與位于膜之間的營養(yǎng)培養(yǎng)基構(gòu)成，其中 營養(yǎng)培養(yǎng)基包含還原化合物。
[000引但是，運(yùn)些裝置和別的裝置可能造價高昂，也許不適合用后即丟棄。運(yùn)些裝置的組 裝和/或使用也可能繁瑣不便。盡管本領(lǐng)域已嘗試生產(chǎn)在有氧環(huán)境中培養(yǎng)厭氧微生物的簡 易裝置，但仍需要改良的厭氧培養(yǎng)裝置。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明大體上設(shè)及檢測樣品中的微生物，任選地對樣品中的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。具 體地講，本發(fā)明設(shè)及培養(yǎng)并檢測微耐氧微生物、微需氧微生物或?qū)Ｐ詤捬跷⑸?。目前?知，可使用自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置培養(yǎng)并檢測運(yùn)些微生物。
[0010] 本發(fā)明公開的培養(yǎng)裝置和方法甚至可W在含氧（如含正常的大氣氧)環(huán)境中溫育 微生物的同時，支持微耐氧微生物、微需氧微生物或?qū)Ｐ詤捬跷⑸铮ɡ缂?xì)菌、酵母)生 長，還支持對運(yùn)些微生物進(jìn)行檢測、區(qū)分。運(yùn)有利于省去對培養(yǎng)厭氧微生物通常需要的?？?溫育設(shè)備和試劑(例如厭氧菌罐、一次性厭氧菌袋、鈕催化劑、厭氧手套箱）的需要。另外，本 發(fā)明的方法允許檢測各單獨(dú)菌落產(chǎn)生的二氧化碳?xì)怏w，由此支持對細(xì)菌進(jìn)行區(qū)分，從而省 去了分離純培養(yǎng)物所需的額外溫育時間、還避免了使用發(fā)酵管來檢測氣體產(chǎn)量。此外，本發(fā) 明設(shè)及對樣品中的微耐氧細(xì)菌、微需氧細(xì)菌或?qū)Ｐ詤捬跫?xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。微耐氧微生物、微需 氧微生物和專性厭氧微生物具有共同的特征，即，它們需要在低氧環(huán)境中生長繁殖。
[0011] 在一個方面，本發(fā)明提供了一種檢測樣品中的微生物的方法。該方法可包括：自主 產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域與該培養(yǎng)裝置中的預(yù)定體積的含水液體接觸，在使該 生長區(qū)域與該預(yù)定體積的含水液體接觸運(yùn)一步驟之前，生長區(qū)域包含冷水可溶的干燥膠凝 劑和酶介導(dǎo)耗氧體系中有效量的基本干燥的酶組分。該方法還可包括使生長區(qū)域與樣品接 觸;溫育培養(yǎng)裝置足夠長的時間段W允許微生物菌落形成;然后檢測微生物菌落。
[0012] 在另一方面，本發(fā)明提供了一種檢測樣品中的微生物的方法。該方法可包括:使自 主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域與該培養(yǎng)裝置中的預(yù)定體積的含水液體接觸，在使 該生長區(qū)域與該預(yù)定體積的含水液體接觸運(yùn)一步驟之前，生長區(qū)域包含冷水可溶的干燥膠 凝劑。該方法還可包括使酶介導(dǎo)耗氧體系中有效量的酶組分沉積到生長區(qū)域中；使該生長 區(qū)域與樣品接觸;溫育培養(yǎng)裝置足夠長的時間段W允許微生物菌落形成;然后檢測微生物 菌落。在任一實(shí)施方案中，該方法還可包括使酶介導(dǎo)耗氧體系中有效量的酶底物組分沉積 到生長區(qū)域中。
[0013] 在又一方面，本發(fā)明提供了一種檢測樣品中的微生物的方法。該方法可包括:使自 主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域與該培養(yǎng)裝置中的預(yù)定體積的含水液體接觸，在使 該生長區(qū)域與該預(yù)定體積的含水液體接觸運(yùn)一步驟之前，生長區(qū)域包含冷水可溶的干燥膠 凝劑。該方法還可包括使酶介導(dǎo)耗氧體系中有效量的酶底物組分沉積到生長區(qū)域中；使該 生長區(qū)域與樣品接觸;溫育培養(yǎng)裝置足夠長的時間段W允許微生物菌落形成;然后檢測微 生物菌落。在任一實(shí)施方案中，該方法還可包括使酶介導(dǎo)耗氧體系中有效量的酶組分沉積 到生長區(qū)域中。
[0014] 在又一方面，本發(fā)明提供了一種用于對微生物菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)的培養(yǎng)裝置。該培養(yǎng) 裝置可包括:第一基底，該第一基底具有相背的內(nèi)外表面;第二基底，該第二基底具有相背 的內(nèi)外表面;生長區(qū)域，該生長區(qū)域被布置在第一基底的內(nèi)表面與第二基底的內(nèi)表面之間； 酶介導(dǎo)耗氧體系中第一有效量的基本干燥的酶組分;該酶介導(dǎo)耗氧體系中第二有效量的基 本干燥的酶底物組分；W及被布置在生長區(qū)域中的冷水可溶的干燥膠凝劑。第一有效量的 基本干燥的酶組分可被布置生長區(qū)域內(nèi)的第一涂層中。第二有效量的基本干燥的酶底物組 分可被布置生長區(qū)域內(nèi)的第二涂層中。第一基底和第二基底可能基本無法透過氣態(tài)氧。
[0015] 在又一方面，本發(fā)明提供了一種制造用于培養(yǎng)厭氧微生物的培養(yǎng)裝置的方法。該 方法可包括:將第一涂層沉積到第一基底的一部分上，該第一涂層是使用包含液體和酶介 導(dǎo)耗氧體系中有效量的酶組分的液體混合物形成的；干燥第一涂層;將第二涂層沉積到第 二基底上，該第二涂層包含酶介導(dǎo)耗氧體系中的酶底物組分;將第一基底定位在第二基底 附近，使第一涂層面向第二涂層，并使被布置在第一基底和第二基底之間的生長區(qū)域與第 一涂層的一部分和第二涂層的一部分重疊。
[0016] 詞語"優(yōu)選的"和"優(yōu)選地"指在某些情況下可提供某些有益效果的本發(fā)明實(shí)施方 案。然而，在相同的情況下或其他情況下，其他實(shí)施方案也可能是優(yōu)選的。此外，述及一個或 多個優(yōu)選的實(shí)施方案并非暗示其他實(shí)施方案不可用，也并非旨在將其他實(shí)施方案排除在本 發(fā)明的范圍之外。
[0017] 術(shù)語"包括"及其變型形式在說明書和權(quán)利要求中出現(xiàn)運(yùn)些術(shù)語的地方不具有限 制的含義。
[0018] 本文使用的"一種（個)"、"所述（該）"、"至少一種（個rW及"一種（個）或多種 (個r可互換使用。因此，舉例來說，一種營養(yǎng)素可被理解為"一種或多種"營養(yǎng)素。
[0019] 術(shù)語"和/或"、"并且/或者"、及/或者"意指所列要素中的一個或全部要素，或 所列要素中任意兩個或更多個要素的組合。
[0020] 另外，在本文中，通過端點(diǎn)表述的數(shù)值范圍包括該范圍內(nèi)所含的所有數(shù)值(例如，1 至5 包括 1、1.5、2、2.75、3、3.80、4、5等）。
[0021] 本發(fā)明的上述
【發(fā)明內(nèi)容】
并非意圖描述本發(fā)明的每一個公開的實(shí)施方案或本發(fā)明 的每種實(shí)施方式。下文的【具體實(shí)施方式】更具體地舉例說明了示例性實(shí)施方案。通觀申請全 文，在幾個部分用示例列表提供指導(dǎo)，列表中的示例可按不同方式組合使用。在每種情況 下，引用的列表都只用作代表性的組，并且不應(yīng)被理解為排他性列表。
[0022] 下文將結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】介紹上述實(shí)施方案和其他實(shí)施方案的更多細(xì)節(jié)。 通過【具體實(shí)施方式】、附圖和權(quán)利要求書，其他特征、對象和優(yōu)點(diǎn)將變得明顯。
【附圖說明】
[0023] 圖1為根據(jù)本發(fā)明的自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置的一個實(shí)施方案的頂部透視圖 (局部剖視）。
[0024] 圖2為根據(jù)本發(fā)明的自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置的另選實(shí)施方案的頂部透視 圖。
[0025] 圖3為圖2所示培養(yǎng)裝置的橫截面視圖，該培養(yǎng)裝置被顯示為第一基底12和第二基 底18分開，便于將液體和/或樣品沉積到該培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域中。
[0026] 圖4示出培養(yǎng)裝置中的氧濃度與時間的關(guān)系，圖示的一些培養(yǎng)裝置中接收了酶介 導(dǎo)耗氧體系。
[0027] 圖5示出若干種自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置中的氧濃度與時間的關(guān)系，圖示的 培養(yǎng)裝置中都接收了各種有效量的酶底物。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 在詳細(xì)解釋本發(fā)明的任何實(shí)施方案之前，應(yīng)當(dāng)了解，本發(fā)明在其應(yīng)用中不僅限于 下文描述內(nèi)容中提及或下文附圖中示出的構(gòu)造細(xì)節(jié)和部件布置方式。本發(fā)明容許其他實(shí)施 方案，也容許W各種方式實(shí)施或執(zhí)行。另外，應(yīng)當(dāng)了解，本文使用的措詞和術(shù)語是用于說明 目的而不應(yīng)被視為限制性的。本文使用的"包括"、"包含"或"具有"及其變型形式，涵蓋其后 列出的項(xiàng)目及其等同形式，W及額外的項(xiàng)目。除非另外說明或限定，否則術(shù)語"連接"和"聯(lián) 接"及其變型形式W廣義方式使用，既涵蓋直接地連接、聯(lián)接，又涵蓋間接地連接、聯(lián)接。此 外，"連接"和"聯(lián)接"不限于物理或機(jī)械連接或聯(lián)接。應(yīng)當(dāng)理解，可采用其他的實(shí)施方案，并 且可W在不偏離本發(fā)明范圍的情況下作出結(jié)構(gòu)變化或邏輯變化。此外，術(shù)語例如"前部"、 "后部"、"頂部"、"底部"等等僅用于在元件彼此有關(guān)時描述元件，但絕非意在描述設(shè)備的具 體取向、指明或暗示設(shè)備的必要或必需取向、或規(guī)定本文所述本發(fā)明在使用時將如何使用、 安裝、顯示或定位。
[0029] 本發(fā)明整體設(shè)及檢測樣品中的微生物，任選地對樣品中的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。具體 地講，本發(fā)明設(shè)及培養(yǎng)并檢測微耐氧微生物、微需氧微生物或?qū)Ｐ詤捬跷⑸?。目前已知?可使用自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置培養(yǎng)并檢測運(yùn)些微生物。
[0030]目前還已知，可制造出干燥、可再水化的自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置。運(yùn)種培養(yǎng) 裝置包括有效量的基本干燥的酶組分和有效量的基本干燥的酶底物組分，運(yùn)些組分被布置 在培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域中，并能夠在該培養(yǎng)裝置內(nèi)的預(yù)定體積的水溶液中再水化，運(yùn)些組 分一旦再水化，便能夠參加耗氧反應(yīng)。此外，目前已知，耗氧反應(yīng)可消耗足量的氧氣，從而有 利微耐氧微生物、微需氧微生物或?qū)Ｐ詤捬跷⑸锷L。此外，可將該培養(yǎng)裝置保持在有氧 環(huán)境中，在該環(huán)境中，培養(yǎng)裝置可維持低氧環(huán)境至少約8天，從而有利前述微生物生長。
[0031 ]可W分析可源自任何來源的試驗(yàn)樣品中的所關(guān)注菌種，所述任何來源例如:生理 流體(如血液、唾液、晶狀體液、滑膜液、腦脊液、脈汁、汗液、滲出物、尿液、粘液）、黏膜組織 (如口腔黏膜、齒銀黏膜、鼻黏膜、眼黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、胃腸黏膜、直腸黏膜、尿道 黏膜、輸尿管黏膜、陰道黏膜、子宮頸黏膜、子宮粘膜）、哺乳期乳汁、糞便等。另外，試驗(yàn)樣品 可源自身體部位，例如傷口、皮膚、前鼻孔、鼻咽腔、鼻腔、鼻前庭、頭皮、指/趾甲、外耳、中 耳、口、直腸、陰道、蔽窩、會陰、肛口，或其他類似的部位。
[0032] 除了生理流體外，其他試驗(yàn)樣品可包含其他液體W及溶解或懸浮于液體介質(zhì)中的 一種或多種固體。所關(guān)注的樣品可包括工藝物料流、水、食品、食品成分、飲料、±壤、植株或 其他植被、空氣、表面(如制造工廠、醫(yī)院、診所或住宅里的墻壁、地板、設(shè)備、用具），等等。
[0033] 需要在氧張力降低的環(huán)境中生長的細(xì)菌（即微需氧細(xì)菌)和/或耐受氧張力降低的 環(huán)境且可在其中生長的細(xì)菌（即耐氧細(xì)菌）的非限制性例子包括幽口螺桿菌化elicobacter pylori)、彎曲菌屬（Campylobacter)菌種（例如，空腸彎曲菌（C. jejuni)、大腸彎曲菌 (C. coli )、胎兒彎曲菌（C.fetus))、中間鏈球菌（Sheptococ州S intermedins)、血鏈球菌 (Streptococcus sanguis)、星座鏈球菌（Streptococcus constellatus)、麻疹李生球菌 (Gemella morbillorum)、乳桿菌屬化日。1:〇6日。;[11113)菌種、釀脈鏈球菌（5化日91:0。0。。113 pyo邑enes)0
[0034] 厭氧細(xì)菌在自然界中普遍存在。厭氧細(xì)菌可W是專性厭氧的，或可W是兼性厭氧 的。專性厭氧細(xì)菌的非限制性例子包括放線菌屬（A C t i η omy C e S )菌種、梭菌屬 (Clostridium)菌種（如產(chǎn)氣芙膜梭菌（C.perfringens)、破傷風(fēng)梭菌(C. tetani)、生抱梭菌 (C sporogenes)、肉毒梭菌（C.botulinum)、艱難梭菌（〔.difficile)、下酸梭菌 (C.butyricum)、丙酬下醇梭菌（C.acetobutylicum))、乳酸細(xì)菌（如乳桿菌屬 化日(：1：〇6日(3；[11113)菌種、明串珠菌屬化611(30]10 31：0(3)菌種、片球菌屬。6(1；[0(30(3(3113)菌種、乳 球菌屬(XactOCOCCUS)菌種）、擬桿菌屬（日日。161'01(16 3)菌種（如脆弱擬桿菌（日打日肖；[113))， W及消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus)菌種（如微小消化鏈球菌（P micros)、大消化鏈 球菌（P . magnus )、不解糖消化鏈球菌（P . asaccharo 1 y t i CUS )、厭氧消化鏈球菌 (P.anaerobius)、四鏈消化鏈球菌(P. tetradius))。兼性厭氧細(xì)菌的非限制性例子包括腸 細(xì)菌化nterobacteria)(如大腸桿菌化.coli))、沙口氏菌屬（Salmonella)菌種、弗氏巧樣 酸桿菌（Citrobacter打eundii)、金黃色葡萄球菌（Sl:a地ylococcus aureus)、李斯特菌屬 (Xisteria)菌種(如單核細(xì)胞增多性李斯特菌化.monocytogenes))。
[0035] 因?yàn)楹芏嘟湍妇N是兼性厭氧的，并且一部分酵母菌種是專性厭氧的，所W預(yù)期 本發(fā)明公開的自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置也可用于培養(yǎng)并檢測酵母微生物。
[0036] 在一個方面，本發(fā)明提供了一種用于培養(yǎng)并檢測在低氧環(huán)境中生長的微生物的培 養(yǎng)裝置。參見圖1，本發(fā)明公開的自主產(chǎn)生厭氧環(huán)境的培養(yǎng)裝置10包括第一防水基底12、第 二防水基底18, W及被布置在第一基底12和第二基底18之間的生長區(qū)域45。第一基底12具 有內(nèi)表面14,和與內(nèi)表面14相背的外表面16。第二基底18具有內(nèi)表面20,和與內(nèi)表面20相背 的外表面22。在任一實(shí)施方案中，第一基底12的內(nèi)表面14面向第二基底18的內(nèi)表面20布置。
[0037] 第一干燥涂層30被布置在第一基底12的內(nèi)表面14上。第一干燥涂層30在第一基底 12的內(nèi)表面14上至少固定至生長區(qū)域45并至少將生長區(qū)域45覆蓋住。第一干燥涂層30包含 冷水可溶的干燥膠凝劑，和酶介導(dǎo)耗氧體系中的組分。在任一實(shí)施方案中，第一涂層中的所 述組分包括酶介導(dǎo)耗氧體系中第一有效量的基本干燥的酶組分?；蛘撸谌我粚?shí)施方案中， 第一涂層中的所述組分包括能夠在利用氧氣的反應(yīng)中與所述酶組分反應(yīng)的第二有效量的 基本干燥的酶底物。第一干燥涂層30可覆蓋住第一基底12的整個內(nèi)表面14,但優(yōu)選地至少 覆蓋住內(nèi)表面14上至少限定培養(yǎng)裝置10中生長區(qū)域45的第一部分40的一部分。生長區(qū)域45 位于培養(yǎng)裝置10內(nèi)部，在用樣品接種該培養(yǎng)裝置期間、W及培養(yǎng)并檢測微生物(如果樣品中 有微生物的話)期間，生長區(qū)域45用于保持樣品。
[0038] 在圖1示出的實(shí)施方案中，第一干燥涂層30覆蓋住第一基底12的基本上整個內(nèi)表 面14。因此，生長區(qū)域可W在培養(yǎng)裝置10中位于第一基底12和第二基底18之間的任何可觸 及位置。優(yōu)選的是，生長區(qū)域位于遠(yuǎn)離周邊邊緣50的位置。
[0039] 生長區(qū)域45被限定為布置在第一基底12的內(nèi)表面14和第二基底18的內(nèi)表面20之 間的空間，該空間包含第一干燥涂層30和/或第二干燥涂層(下文將論及）的至少一部分。因 此，當(dāng)含水液體分散到生長區(qū)域中時，便與第一干燥涂層30和/或第二干燥涂層的至少一部 分發(fā)生流體接觸。生長區(qū)域45的厚度可取決于多種因素而變化，例如:沉積在培養(yǎng)裝置中的 含水液體(未示出）的體積，存在與樣品（未示出）相關(guān)聯(lián)的固體(例如懸浮顆粒物和/或膜濾 器），和/或培養(yǎng)裝置10中的間隔構(gòu)件(如果存在）（下文將論及）。
[0040] 第一基底12優(yōu)選地為相對剛性的防水膜，其由不會吸水，或者說是不受水不利影 響的材料(例如聚醋、聚丙締或聚苯乙締）制成。第一基底12優(yōu)選地使用基本無法透過氣態(tài) 氧的材料制成。用于制造第一基底12的適宜材料的非限制性例子包括至少約15WI1到至少約 180皿的聚醋膜，至少約100皿到至少約200皿的聚丙締膜，W及至少約300皿至約380皿的聚 苯乙締膜。其他適宜的第一基底包括乙締-乙締醇共聚物膜、聚乙締醇膜、聚偏二氯乙締膜。 如果希望透過第一基底12觀察菌落，則第一基底12可W是透明的。
[0041] 第二基底18覆蓋住第一基底12的內(nèi)表面14,用于限定生長區(qū)域45,任選地，在運(yùn) 輸、儲存、溫育和/或菌落計(jì)數(shù)過程中用于觀察生長區(qū)域。第二基底18優(yōu)選地為相對剛性的 防水膜，其由不會吸水，或者說是不受水不利影響的材料（如聚醋、聚丙締或聚苯乙締）制 成。第二基底18優(yōu)選地是透明的，W利于在不打開培養(yǎng)裝置10的情況下對菌落計(jì)數(shù)，并且基 本上不可滲透微生物和水蒸汽。
[0042] -般來講，第二基底可由例如用于制造第一基底12的那些材料制成。第二基底18 優(yōu)選地使用基本無法透過氣態(tài)氧的材料制成。用于制造第一基底12的適宜材料的非限制性 例子包括至少約15WI1到至少約180WI1的聚醋膜，至少約lOOwii到至少約200μπι的聚丙締膜，W 及至少約300WI1至約380WI1的聚苯乙締膜。其他適宜的第一基底包括乙締-乙締醇共聚物膜、 聚乙締醇膜、聚偏二氯乙締膜。如圖1所示，第二基底18可沿著第一基底12和第二基底18各 自內(nèi)表面的一個邊緣，W折葉狀方式(如使用雙面膠帶)附接。
[0043] 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會認(rèn)識到，可通過增大聚合物膜的厚度，來降低氧氣穿透 給定類型聚合物膜的百分比。在任一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的第一基底和第二基底都為 厚度適宜的聚合物膜，兩者的厚度都導(dǎo)致其基本無法透過氣態(tài)氧。
[0044] 若第一涂層30主要由干燥粉末或干燥粉末的團(tuán)塊組成，則優(yōu)選將第一涂層30布置 在粘合劑層32上，該粘合劑層32被布置在第一基底12的內(nèi)表面14的至少一部分上。可使用 (例如)美國專利4,565,783、5,089,413和5,232,838中所述的配混工藝、粘合劑涂布工藝、 液體涂布工藝和/或干涂工藝，將第一干燥涂層30沉積到第一基底12上，或任選的粘合劑層 32上，前述Ξ份專利都全文W引用方式并入本文。
[0045] 就第一干燥涂層30來說，其任選地可包含任一種營養(yǎng)素或營養(yǎng)培養(yǎng)基，該營養(yǎng)素 或營養(yǎng)培養(yǎng)基可用冷水復(fù)水、基本上不妨礙膠凝劑的冷水膠凝性質(zhì)，并支持厭氧微生物生 長。適用于培養(yǎng)裝置的一種或多種特定的營養(yǎng)素取決于將在該裝置中生長的微生物，并且 可由本領(lǐng)域技術(shù)人員輕松地選擇出來。一般來講，此類營養(yǎng)素可溶于冷水。支持細(xì)菌生長的 適宜營養(yǎng)素是本領(lǐng)域已知的，包括但不限于酵母提取物、蛋白腺、糖類、合適的鹽，等等。在 任一實(shí)施方案中，第一干燥涂層還可包含選擇劑(如營養(yǎng)素、抗生素及其組合），特定厭氧微 生物或微生物群相比另外的微生物或微生物群，生長受該選擇劑促進(jìn)的程度更強(qiáng)。本領(lǐng)域 的技術(shù)人員將會認(rèn)識到，可使用多種其他配方，運(yùn)些配方不減損本發(fā)明的范圍。
[0046] 第一干燥涂層30中使用的適宜膠凝劑包括冷水可溶的天然膠凝劑與合成膠凝劑。 天然膠凝劑（例如褐藻膠、簇甲基纖維素、塔拉膠、徑乙基纖維素、瓜爾膠、刺槐豆膠、黃原 膠)與合成膠凝劑(例如聚丙締酷胺、聚氨醋、聚環(huán)氧乙燒、聚乙締醇)及其混合物通常是適 用的?？梢罁?jù)本發(fā)明的教導(dǎo)內(nèi)容和美國專利4,565,783、5,089,413和5,232,838的公開內(nèi)容 選擇適用的膠凝劑。優(yōu)選的膠凝劑包括瓜爾膠、刺槐豆膠、黃原膠;運(yùn)些膠凝劑可單獨(dú)使用， 優(yōu)選地可彼此組合使用。
[0047] 本發(fā)明的培養(yǎng)裝置包括被布置在其中的酶介導(dǎo)耗氧體系，該體系包含至少一種基 本干燥的組分。在如本文所述那樣將樣品材料引入（如接種到）培養(yǎng)裝置的生長區(qū)域中之 前、期間或之后，所述至少一種干燥