；
步驟四、取地衣芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)14h-16h，使地衣芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為19CFU/mL,備用；取凝結(jié)芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)14h-16h，使凝結(jié)芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為10sCFU/mL，備用；
步驟五、將上述步驟三中所制備的發(fā)酵物置于混合機(jī)中，按照地衣芽孢桿菌菌液、凝結(jié)芽孢桿菌菌液和發(fā)酵物的質(zhì)量比為1: 2: 10的比例，將地衣芽孢桿菌菌液和凝結(jié)芽孢桿菌菌液添加到置于混合機(jī)中的發(fā)酵物中，混合5min，得到混合物，將所得混合物采用低溫烘干至混合物含水量為10%，即制備出禽用酵母培養(yǎng)物。
[0014]步驟五所述采用低溫烘干，烘干機(jī)進(jìn)口溫度70°C，出口溫度為60 °C。
[0015]步驟一中所述蒸發(fā)釜內(nèi)濕熱滅菌的方法為，將步驟一所述混合物攤開(kāi)至厚度20cm，溫度120°C，壓力2個(gè)大氣壓，濕熱滅菌20min。
[0016]步驟二中所述三角瓶中麥芽汁培養(yǎng)基的體積為三角瓶體積的40%。
[0017]步驟三中所述將三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液和禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基按照質(zhì)量比為90-100: 5-10的比例進(jìn)行混合的混合時(shí)間為4min。
[0018]按照如下方法對(duì)本發(fā)明所制備的禽用酵母培養(yǎng)物進(jìn)行檢測(cè):
禽用酵母培養(yǎng)物水分的測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB6435— 86 ;粗蛋白測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB/T6432—94 ;粗脂肪測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB/T6433—94 ;飼料中粗纖維測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB/T6434—94 ;粗灰分的測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB/T6438—92 ;飼料中鈣的測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)GB/T6436—92 ;飼料中總磷量的測(cè)定方法——光度法參照國(guó)標(biāo)GB/T、6437— 92 ;氨基酸的測(cè)定參照國(guó)標(biāo)GB/T 18246 ;益生菌總數(shù)的測(cè)定:參照國(guó)標(biāo)GB/T 13093-2006，選擇益生菌專(zhuān)用培養(yǎng)基活菌計(jì)數(shù)。
[0019]最終測(cè)得本發(fā)明所制備的禽用酵母培養(yǎng)物，各成份的質(zhì)量百分比含量為:粗蛋白彡20.0% ;水分彡12.5% ;粗灰分彡8.0% ；小肽彡2.0% ;總有機(jī)酸(以乳酸計(jì))彡2.0% ；甘露聚糖多0.2% ;禽用酵母培養(yǎng)物中益生菌活菌數(shù)量為:地衣芽孢桿菌活菌多25X 18Cfu/g ;凝結(jié)芽孢桿菌活菌彡0.5X 10scfu/g。
[0020]實(shí)施例1
一種禽用酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括以下步驟:
步驟一、取棉籽柏16份，麩皮34份和大豆皮50份置于混合機(jī)中，先混合2分鐘，再添加糖蜜20份、玉米漿80份和水35份，再次混合3分鐘，得到混合物，將所得混合物進(jìn)行濕熱滅菌后，得到禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基，備用；
步驟二、取釀酒酵母菌種接種于裝有麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，置于30°C，220rpm搖動(dòng)培養(yǎng)14h，即釀酒酵母菌液0D600值為0.8 ;將所培養(yǎng)的釀酒酵母菌液接種到裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的一級(jí)生產(chǎn)種子罐中，300C，培養(yǎng)14h，接種量為一級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2% ;接著取一級(jí)生產(chǎn)種子罐培養(yǎng)的菌液接種至裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的二級(jí)生產(chǎn)種子罐，30°C，培養(yǎng)14h，接種量為二級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2% ;最后再取二級(jí)生產(chǎn)種子罐所培養(yǎng)的菌液，接種到裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的三級(jí)生產(chǎn)種子罐中，30°C，培養(yǎng)14h，接種量為三級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2%，得到三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液；步驟三、將三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液和禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基按照質(zhì)量比為90-100:5-10的比例進(jìn)行混合后，裝入發(fā)酵車(chē)，進(jìn)入發(fā)酵車(chē)間發(fā)酵，控制發(fā)酵車(chē)間溫度28-30°C，兼性厭氧發(fā)酵72h，得到發(fā)酵物，備用；
步驟四、取地衣芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)14h，使地衣芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為109CFU/mL，備用；取凝結(jié)芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)14h，使凝結(jié)芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為10sCFU/mL，備用；
步驟五、將上述步驟三中所制備的發(fā)酵物置于混合機(jī)中，按照地衣芽孢桿菌菌液、凝結(jié)芽孢桿菌菌液和發(fā)酵物的質(zhì)量比為1: 2: 10的比例，將地衣芽孢桿菌菌液和凝結(jié)芽孢桿菌菌液添加到置于混合機(jī)中的發(fā)酵物中，混合5min，得到混合物，將所得混合物采用低溫烘干(烘干機(jī)進(jìn)口溫度70°C，出口溫度為60°C)至混合物含水量為10%，即制備出禽用酵母培養(yǎng)物。
[0021]步驟二中所述三角瓶中麥芽汁培養(yǎng)基的體積為三角瓶體積的40%。
[0022]步驟三中所述將三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液和禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基按照質(zhì)量比為90-100: 5-10的比例進(jìn)行混合的混合時(shí)間為4min。
[0023]所制備的禽用酵母培養(yǎng)物，各成份的質(zhì)量百分比含量為:粗蛋白20.8%;水分
11.5% ;粗灰分7.6% ;小肽2.4% ;總有機(jī)酸(以乳酸計(jì))2.6% ;甘露聚糖0.2%。益生菌活菌數(shù)量:地衣芽孢桿菌活菌3.2 X 109cfu/g ;乳酸菌(凝結(jié)芽孢桿菌)活菌1.5 X 108cfu/g ;
實(shí)施例2
一種禽用酵母培養(yǎng)物的制備方法，包括以下步驟:
步驟一、取棉籽柏16份，麩皮34份和大豆皮50份置于混合機(jī)中，先混合2分鐘，再添加糖蜜20份、玉米漿80份和水35份，再次混合3分鐘，得到混合物，將所得混合物進(jìn)行濕熱滅菌后，得到禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基，備用；
步驟二、取釀酒酵母菌種接種于裝有麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，置于30°C，220rpm搖動(dòng)培養(yǎng)14h，即釀酒酵母菌液0D600值為1.0 ;將所培養(yǎng)的釀酒酵母菌液接種到裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的一級(jí)生產(chǎn)種子罐中，300C，培養(yǎng)14h，接種量為一級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2% ;接著取一級(jí)生產(chǎn)種子罐培養(yǎng)的菌液接種至裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的二級(jí)生產(chǎn)種子罐，30°C，培養(yǎng)14h，接種量為二級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2% ;最后再取二級(jí)生產(chǎn)種子罐所培養(yǎng)的菌液，接種到裝有到麥芽汁培養(yǎng)基的三級(jí)生產(chǎn)種子罐中，30°C，培養(yǎng)14h，接種量為三級(jí)生產(chǎn)種子罐的麥芽汁培養(yǎng)基體積的2%，得到三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液；步驟三、將三級(jí)培養(yǎng)釀酒酵母菌液和禽用酵母培養(yǎng)物培養(yǎng)基按照質(zhì)量比為90-100:5-10的比例進(jìn)行混合后，裝入發(fā)酵車(chē)，進(jìn)入發(fā)酵車(chē)間發(fā)酵，控制發(fā)酵車(chē)間溫度28-30°C，兼性厭氧發(fā)酵72h，得到發(fā)酵物，備用；
步驟四、取地衣芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)15h，使地衣芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為109CFU/mL，備用；取凝結(jié)芽孢桿菌菌種，進(jìn)行活化后，逐級(jí)擴(kuò)大到生產(chǎn)種子罐中，接種量為培養(yǎng)基體積的2% ;培養(yǎng)15h，使凝結(jié)芽孢桿菌菌液中地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)量為10sCFU/mL，備用；
步驟五、將上述步驟三中所制備的發(fā)酵物置于混合機(jī)中，按照地衣芽孢桿菌菌液、凝結(jié)芽孢桿菌菌液和發(fā)酵物的質(zhì)量比為1: 2: 10的比例，將地衣芽孢桿菌菌液和凝結(jié)芽孢桿菌菌液添加到置于混合機(jī)中的發(fā)酵物中，混合5min，得到混合物，將所得混合物采用低溫烘干至混合物含水量為10%，即制備出禽用酵母培養(yǎng)物。
[0024]步驟一中所述蒸發(fā)釜內(nèi)濕熱滅菌的方法為，將步驟一所述混合物攤開(kāi)至厚度20cm，溫度120°C，壓力2個(gè)大氣壓，濕熱滅菌20min。
[0025]所制備的禽用酵母培養(yǎng)物，各成份的質(zhì)量百分比含量為:粗蛋白21.8%;水分11.5% ;粗灰分7.7% ；小肽2.5% ;總有機(jī)酸(以乳酸計(jì))2.3% ；甘露聚糖0.2%。禽用酵母培養(yǎng)物中益生菌活菌數(shù)