N-甲基5-羥色胺和相關(guān)物質(zhì)用于治療/減少絕經(jīng)期相關(guān)熱潮紅的發(fā)生的制作方法
【專利說明】N-甲基5-羥色胺和相關(guān)物質(zhì)用于治療/減少絕經(jīng)期相關(guān)熱潮紅的發(fā)生
[0001]發(fā)明簡述
[0002]本發(fā)明涉及N-甲基5-羥色胺葡糖苷(“匪S-葡糖苷”)和/或N-甲基5-羥色胺(WS)或其它WS前體在治療、預(yù)防或改善絕經(jīng)期相關(guān)熱潮紅(也被稱為潮熱)中的用途。匪S-葡糖苷可獲自植物來源，例如Zanthoxylum piperitum種子或種子提取物。本發(fā)明還涉及多種植物提取物(包括黑升麻)的用途，其已經(jīng)用以下的至少一種加強(qiáng):N-甲基5-羥色胺(“NMS”)、NMS_ 葡糖苷、Zanthoxylum piperitum 種子、含 NMS-葡糖苷的 Zanthoxylumpiperitum種子提取物、其它匪S前體或其混合物。
[0003]發(fā)明背景
[0004]黑升麻(被稱為Actaea racemos 和 Cimicifuga ramcemosa 二者)提取物含有許多未被完全了解的營養(yǎng)物。盡管如此，基于它減輕絕經(jīng)期相關(guān)熱潮紅并改善情緒的傳聞和有限的臨床證據(jù)，人類已經(jīng)使用黑升麻達(dá)幾個(gè)世紀(jì)。黑升麻中的一種營養(yǎng)物N-甲基5-羥色胺(^S)令人關(guān)注，因?yàn)殛P(guān)于這種成分的現(xiàn)有數(shù)據(jù)為以下主張?zhí)峁┝艘恍┲С?，艮P，某些黑升麻提取物可有益于改善熱潮紅。參見，例如，Powell等人2008J.Agric.FoodChem.56:11718。
[0005]5-羥色胺(5-HT)受體參與體溫調(diào)節(jié)(特別是5-HT7異構(gòu)體；圖1A)，且人類中的臨床試驗(yàn)表明:選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)有效治療熱潮紅的癥狀。這些發(fā)現(xiàn)證明:5_羥色胺信號(hào)傳導(dǎo)在體溫調(diào)節(jié)中有一些重要性。有趣的是，相較于其它5-HT受體，NMS優(yōu)先結(jié)合5-肌7受體；且它激活5-HT7受體的親和力(EC5tl= 22nM ;圖1B)等價(jià)于5-羥色胺自身的親和力。然而，單一黑升麻劑量中可能的匪S濃度(80mg黑升麻提取物中?30ppm)僅能遞送2.4 μ g WS。在60-kg人類女性中，該劑量大致轉(zhuǎn)化為最高0.18nM的濃度。該NMR濃度對(duì)結(jié)合5-HT7足夠高，但它可能不足以獨(dú)立地對(duì)5-HT 7(圖1B)或5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體(SERT ；圖1C)產(chǎn)生功能性作用。因?yàn)楹谏樘崛〉男试谏a(chǎn)批次之間可不同，所以該劑量問題可為臨床研宄中利用黑升麻時(shí)觀察到的混合結(jié)果提供一些解釋。此外，黑升麻提取物被標(biāo)準(zhǔn)化為黃肉楠堿含量，而非NMS。
[0006]減輕絕經(jīng)期癥狀所需的匪S劑量很可能高于黑升麻所能提供的劑量，因此，本領(lǐng)域需要能用于改善絕經(jīng)期癥狀(例如熱潮紅)的匪S天然來源。
[0007]發(fā)明詳述
[0008]依照本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn):Zanthoxylum piperitum(通常被稱為日本辣椒)種子(包括其成熟種子)含有WS前體N-甲基5-羥色胺5-0-β-葡糖苷(“WS-葡糖苷”)，其以充足的濃度存在并以充足的效率被代謝以提供有效量的匪S用于改善絕經(jīng)期癥狀，包括熱潮紅/潮熱。因此，本發(fā)明的一方面是日本辣椒種子或含有匪S-葡糖苷的日本辣椒種子提取物在食品補(bǔ)充劑或營養(yǎng)品中用于控制絕經(jīng)期癥狀的用途。
[0009]因此:
[0010]a)日本辣椒種子或者含有NMS或NMS-葡糖苷的日本辣椒種子提取物或者其混合物；或者
[0011]b) NMS-葡糖苷
[0012]c)含有WS或匪S-葡糖苷的其它植物來源或其混合物
[0013]d)無論何種來源的能夠被代謝成WS的其它WS前體
[0014]可以以有效量單獨(dú)或以混合物使用以減輕絕經(jīng)期癥狀(包括熱潮紅)，或者可與匪S組合使用以使所述組合為改善熱潮紅的有效量。
[0015]可用于本發(fā)明中的匪S可以是植物制品(例如提取物)的一部分。一種潛在來源是黑升麻，但日本辣椒由于已知較高濃度的NMS前體而成為優(yōu)選的來源?；蛘?，可使用無論何種來源的合成WS。
[0016]因此，本發(fā)明還提供
[0017]a)無論何種物種的任何植物提取物，其含有最低有效劑量的WS、WS前體；或其混合物；
[0018]b)包含最低有效劑量的匪S或匪S前體的組合物的用途，無論匪S是否來源于植物提取物；
[0019]c)植物提取物的用途，所述植物提取物天然含有WS或WS前體，但低于有效劑量，其中已加入額外的NMS或前體以使NMS或前體的總量達(dá)到有效量；
[0020]d)上述的組合；
[0021]e)任意上述a-d與有益于控制絕經(jīng)期、圍絕經(jīng)期和/或絕經(jīng)后期癥狀的其它成分的組合的用途。
[0022]本發(fā)明還提供預(yù)防、治療、改善和/或降低絕經(jīng)期、圍絕經(jīng)期和/或絕經(jīng)后期癥狀的嚴(yán)重性或發(fā)生的方法，所述方法包括:
[0023]施用有效量的成分至經(jīng)歷所述癥狀的女性或絕經(jīng)期、圍絕經(jīng)期和/或絕經(jīng)后期的女性，所述成分選自:NMS_葡糖苷、NMS、Zanthoxylum piperitum種子、包含NMS-葡糖苷的Zanthoxylum piperitum種子提取物、草酸匪S、匪S氫氯化物、匪S 二氫氯化物；和其混合物。
[0024]本發(fā)明還涉及植物提取物(優(yōu)選地黑升麻和日本辣椒)的混合物，其共同含有有效量的至少一種選自以下的活性成分:NMS、NMS前體或其混合物。
[0025]本發(fā)明的另一方面是食品補(bǔ)充劑或營養(yǎng)品，其中有效對(duì)抗絕經(jīng)期癥狀的唯一活性成分是WS、WS前體或其混合物。
[0026]日本辣椒Zanthoxylum piperitum含有為黑升麻多50倍的NMS (以其前體形式，例如匪S-葡糖苷)，其也可被用作本發(fā)明的一部分。因此，Zanthoxylum可作為匪S的可行替代來源。
[0027]本發(fā)明的另一方面是匪S、匪S-葡糖苷或其它匪S前體(單獨(dú)地或以混合物)作為營養(yǎng)品或藥物組合物中針對(duì)熱潮紅的唯一成分的用途。
[0028]還考慮了 Zanthoxylum提取物與葛藤和大豆提取物，或染料木黃酮組合的用途。
[0029]定義
[0030]當(dāng)在本文中使用時(shí)，應(yīng)用下述定義:
[0031]“NMS前體”是吸收后轉(zhuǎn)變成WS的化合物。該定義中包括的具體化合物為:草酸WS、匪S氫氯化物、匪S 二氫氯化物和匪S葡糖苷?！捌渌薙前體”指的是除了匪S-葡糖苷之外的匪S前體。
[0032]“預(yù)防”并非旨在保證所有可能的熱潮紅不發(fā)生。相反，它被用來表示經(jīng)歷熱潮紅的風(fēng)險(xiǎn)降低，發(fā)病率降低，嚴(yán)重性減輕，且/或一般而言的與它們有關(guān)的不適得到改善。它還可被用于表示:經(jīng)歷熱潮紅之間的時(shí)間間隔增加。
[0033]“圍絕經(jīng)期”是絕經(jīng)期(停止月經(jīng)期至少12個(gè)月)之前的一段時(shí)間，其具有一個(gè)或更多個(gè)如下特征:雌激素水平不均衡地上升/下降、月經(jīng)周期不排卵、經(jīng)歷絕經(jīng)期癥狀(例如熱潮紅、睡眠問題、情緒變化、骨質(zhì)疏松或陰道干燥)但仍然經(jīng)歷月經(jīng)周期。這通常出現(xiàn)在40多歲女性中。
[0034]“絕經(jīng)期”是女性不再有月經(jīng)期的點(diǎn)。卵巢已經(jīng)停止產(chǎn)生卵以及產(chǎn)生大部分其雌激素。當(dāng)女性已連續(xù)12個(gè)月無月經(jīng)期時(shí)，即診斷為“絕經(jīng)期”。
[0035]“絕經(jīng)后期”:絕經(jīng)期之后的時(shí)間。當(dāng)女性已一整年無月經(jīng)期時(shí)，她被認(rèn)為處于絕經(jīng)后期。
[0036]附圖簡述
[0037]圖1.N-甲基5-羥色胺(^S)可通過5-HT7受體減輕熱潮紅并可通過抑制5_羥色胺攝取改善情緒。A)在野生型(WT)動(dòng)物中，當(dāng)5-HT7受體被激活時(shí)，其降低體溫；但在5-111'7敲除(KO)動(dòng)物中，5-HT7激動(dòng)劑不降低體溫(Hedlund等人，2004)。B) NMS最大程度激活5-HT7受體出現(xiàn)在50-100nM且EC 50為?22nM。C)匪S最大程度抑制5-羥色胺再攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體出現(xiàn)在1-10M且IC5tl為?500nM(親和力比百憂解(Prozac)低100倍；Powell等人，2008)。
[0038]圖2.評(píng)估膳食匪S對(duì)絕經(jīng)期動(dòng)物模型中的熱潮紅和情緒相關(guān)行為的影響的研宄設(shè)計(jì)。使動(dòng)物經(jīng)受手術(shù)誘導(dǎo)的絕經(jīng)期(卵巢切除術(shù)；0VX)并飼喂含不同水平匪S的膳食。然后，檢測(cè)動(dòng)物在開放場(chǎng)地的活動(dòng)活性、在高架十字迷宮(elevated plus maze)上的焦慮狀行為和在游泳試驗(yàn)中的抑郁狀行為。然后利用靜脈內(nèi)(1.v.)降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)誘導(dǎo)熱潮紅并監(jiān)測(cè)皮膚溫度。CGRP挑戰(zhàn)后2小時(shí)，收集組織?？s略語:s.c.，皮下；st.，直身體重?fù)Q算(straight body weight convers1n) ;BSA，體表面積換算；BC 540，黑升麻商業(yè)劑量；cAMP，環(huán)腺苷單磷酸；Vmax，酶反應(yīng)的最大速度；SERT，5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體；IC5tl，最高半抑制濃度；Imax，最高抑制濃度。
[0039]圖3.在實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的熱潮紅期間，皮膚溫度的代表性原始數(shù)據(jù)和基線-校正數(shù)據(jù)。未接受膳食處理的動(dòng)物(Oug/kg/d ^S)具有最高基礎(chǔ)溫度和超過它們的計(jì)算基線的最高CGRP反應(yīng)。通過其膳食接受0.48或18.5ug/kg/dNMS的動(dòng)物展示出比未經(jīng)處理的對(duì)照更低的基礎(chǔ)溫度和更低的CGRP反應(yīng)。接受皮下雌二醇且不接受膳食匪S的動(dòng)物(正對(duì)照)具有最低的基礎(chǔ)溫度和最低的CGRP反應(yīng)。
[0040]圖4.膳食WS降低了基線皮膚溫度并減弱了 CGRP誘導(dǎo)的熱潮紅反應(yīng)。與未經(jīng)處理的對(duì)照相比，接受18.5ug/kg/d匪S的組具有降低的基礎(chǔ)皮膚溫度。當(dāng)利用重復(fù)測(cè)量ANOVA分析基線校正數(shù)據(jù)并利用單向ANOVA分析曲線下面積時(shí)，檢測(cè)到匪S對(duì)熱潮紅反應(yīng)的類似效果。將不具有與其相關(guān)的日內(nèi)(within-day)對(duì)照的處理組從分析中除去。統(tǒng)計(jì)參數(shù)在圖中。誤差線代表平均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)。在Tukey’ s事后檢驗(yàn)中，不共有共同字母的處理彼此具有顯著性差異(P〈0.05)。
[0041]圖5.N-甲基5-羥色胺(NMS)提高了去卵巢雌性大鼠中的循環(huán)(血漿)雌二醇水平，這暗示:WS調(diào)節(jié)17 β -雌二醇的非