腫瘤等組織；競爭性結合實驗組于60min 處死。
[0098] (4)稱量各個組織的重量并檢測放射性活度，計算各個組織的％ ID/g，標準品校 正因衰變導致的各組的差異。數(shù)據(jù)統(tǒng)計學使用Graphpad Prism5.0軟件進行分析。
[0099] 圖6為C-33A荷瘤鼠的68Ga-DOTA-TMVPP體內分布的結果。
[0100] 體內分布試驗結果：6SGa-D0TA-TMVPr主要經過泌尿系統(tǒng)排泄，腎臟在2h后的百 分劑量率為2. 34% ID/g。T/B (腫瘤組織攝取藥物的百分劑量率/非腫瘤組織攝取藥物的百 分劑量率）隨著注射時間的延長，出現(xiàn)先高后低的特點，在Ih時T/B的比率最大，為3. 03。
[0101] 實施例5異常毒性實驗
[0102] (1)選取4周齡ICR小鼠（購自北京華阜康生物有限公司）8只，體重17-20克， 隨機取5只作為實驗組，3只為空白對照組，試驗前和試驗的整個觀察期均按正常飼養(yǎng)條件 飼養(yǎng)，實驗前稱老鼠的體重。
[0103] (2)實驗組每只小鼠由尾靜脈注射實施例1制備的68Ga-DOTA-TMVPP 500 μ L(37MBq)，5秒內勻速注射完畢，空白對照不做處理。
[0104] (3)觀察：2天內實驗組和空白對照組小鼠無死亡。5天內實驗組和空白對照組小 鼠飲食、呼吸、活動、反射、排便、痛覺、皮膚均正常。
[0105] (4)5天后稱每個小鼠的體重，處死、解剖小鼠，實驗組小鼠各臟器顏色、形態(tài)與對 照組無明顯差異。
[0106] (5)取實驗組與空白對照組的每只老鼠的心、肺、肝、腎做石蠟包埋后取一張切片 做蘇木精-伊紅染色法（即HE染色）處理。實驗組與空白對照組的HE染色無明顯區(qū)別。
[0107] 異常毒性實驗結果：藥物處理組小鼠在整個實驗過程中，未出現(xiàn)死亡，未發(fā)現(xiàn)飲 食、呼吸、活動、反射、排便、痛覺、皮膚異常。藥物處理組小鼠同未處理組小鼠實驗前后體重 變化無明顯差異（P>〇. 05)，器官未見明顯病變（見圖7和圖8)。注射68Ga-DOTA-TMVPr 實驗前后小鼠的體重變化的結果見表3。
[0108] 表3注射68Ga-DOTA-TMVPP實驗前后小鼠的體重變化的結果
[0110] 實施例6安全性檢測
[0111] (I) PH值檢測：取精密pH試紙檢測樣品的pH值，按照中國藥典2010年版二部附 錄VI H規(guī)定，pH值應為3. 0-5. 0。
[0112] (2)細菌內毒素檢測：取本品適量，以細菌內毒素檢查用水稀釋至少30倍后，依法 檢查（中國藥典2010年版二部附錄XI E)，本品每ImL含內毒素的量應小于15EU。
[0113] (3)無菌檢測：取本品，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄XI H)，應符合規(guī) 定。
[0114] 藥品安全性檢測實驗結果：為了監(jiān)控藥品合成過程中的安全性，在不連續(xù)的3天 按照實施例1所述的方法合成三批藥品進行自檢。1)三批藥品的PH值均為4。2)三批藥 品的內毒素含量均小于15EU/mL。3)三批藥品均未檢測到細菌。
[0115] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和 原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
[0116] <ΓΙΘ>珠海雅馬生物工程有限公司 <120> -種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑及其應用 -"130) 2Θ15 <]G0N 1 <17〇> PatentIn version 3. 5 <210> 1 <211> 12： <212> PRT <213〉人工序列 <220> <221〉二硫鍵成環(huán) <222〉 4, 12 <400> 1 Gly Gly ：#ly: Cys Letl Ala Arg GIy Arg Gly Cys I e n
【主權項】
1. 一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑，其特征在于，含有結構式為68Ga-DOTA-GGG-Cycl 1(：化61^1?1?〇的多肽，其中0(^六為1，4,7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4,7，10-四羧酸，通過 1，4, 7, 10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4, 7, 10-四羧酸的螯合作用與靶向VEGFR-3分子多肽連接， 并標記有放射性核素示蹤劑6SGa。2. 根據(jù)權利要求1所述一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑，其特征在于，所述結構式為 68Ga-DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)的多肽具有式1所示的化學式：3. -種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 合成多肽DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC); 2) 將裝有濃鹽酸的注射器接入68GeZ58Ga發(fā)生器淋洗入口，然后推注，收集淋洗液，并檢 測淋洗液中68Ga的放射性計量； 3) 按照每含有IOmci68Ga的淋洗液、加入93yLI. 25MNaAC以及10yg步驟1)合成 的多肽DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)的比例制備混合液；并進行反應； 4) 反應完畢后，得到標記產物6sGa-DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)，檢測放射性活度及 放射性化學純度。4. 根據(jù)權利要求3所述一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑制備方法，其特征在于，步驟 2) 中，所述注射器中的濃鹽酸的濃度為0. 1M，體積為5mL。5. 根據(jù)權利要求3所述一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑制備方法，其特征在于，步驟 3) 中，所述反應的溫度為KKTC，所述反應時間為15分鐘。6. 根據(jù)權利要求3所述一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑制備方法，其特征在于，步 驟4)檢測放射性活度及放射性化學純度后，對制備的新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑進行純 化，具體包括以下步驟： 利用無水乙醇激活C18柱，之后利用生理鹽水清洗該柱殘余乙醇待用。取經濾過的步 驟4)制備的標記產物通過激活的C18柱，利用的生理鹽水清洗殘夜；利用無水乙醇洗脫，收 集洗脫液，即為純化后的6sGa-DOTA-GGG-Cyclic (CGLARGRGC)的多肽。7. 根據(jù)權利要求3所述一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑制備方法，其特征在于，標記 產物68Ga-DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)保存于生理鹽水、半胱氨酸或血清中。8. 如權利要求1或2所述的新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑在腫瘤診斷中的應用。9. 如權利要求1或2所述的新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑在利用正電子成像技術檢測 腫瘤VEGFR-3受體顯像中的應用。10. -種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：將含 有68Ga-DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)的針劑，注射待顯像的腫瘤組織，利用正電子成像技 術進行顯像。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種新型腫瘤VEGFR-3分子顯像劑，含有結構式為68Ga-DOTA-GGG-Cyclic(CGLARGRGC)的多肽，其中DOTA為1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四羧酸，通過1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四羧酸的螯合作用與靶向VEGFR-3分子多肽連接，并標記有放射性核素示蹤劑68Ga。本發(fā)明提供的一種新型的利用PET檢查的分子診斷劑68Ga-DOTA-TMVP1′，填補了利用PET檢查腫瘤新生淋巴管多肽顯像劑的空白，對以后的臨床VEGFR-3分子診斷及指導腫瘤患者個性化有巨大的幫助。
【IPC分類】A61K51/08, A61K103/00
【公開號】CN105126128
【申請?zhí)枴緾N201510581595
【發(fā)明人】馬丁, 奚玲, 馬湘一, 李飛, 張振中
【申請人】珠海雅馬生物工程有限公司
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年9月14日