.0 lvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0090] 由表3可見，缺血再灌注后第14d，各造模組腦溫和腦含水量與偽手術(shù)組相比均 無顯著性差異（P>〇. 05);缺血再灌注后14d，偽手術(shù)組未見明顯的梗死區(qū)，模型對照組腦 梗塞百分比為41. 4±9. 8%，與模型對照組相比銀靈通高劑量組腦梗塞百分比極顯著性降 低（p〈0. 01)，為19. 5±6. 7% ;銀靈通中劑量組腦梗塞百分比為29. 9±5. 5%，與模型對 照組相比顯著性降低（p〈〇. 05);銀杏葉片組和阿司匹林組腦梗塞百分比也極顯著性降低 (ρ〈0·05)，分別為 16·6±4· 1% 和 14·3±4·4%。
[0091] 與銀杏葉片組相比，銀靈通中、低劑量組腦梗塞百分比極顯著性升高（ρ〈0. 01); 與阿司匹林組相比，銀靈通中、低劑量組腦梗塞百分比極顯著性升高（ρ〈0. 01)。
[0092] 1. 2對學(xué)習(xí)記憶功能、局部腦血流量和腦組織病理學(xué)的影響
[0093] 另取雄性SD大鼠105只，造模及給藥方法同上。于第14次給藥后0. 5h(復(fù)灌后 第13d，采用Y型迷宮測定大鼠學(xué)習(xí)和記憶功能[6]:將受試大鼠放入迷宮內(nèi)適應(yīng)Smin后，給 予電刺激，隨機改變電擊區(qū)和安全區(qū)，電擊時大鼠徑直逃避至安全區(qū)為正確反應(yīng)，否則為錯 誤反應(yīng) m。學(xué)習(xí)成績以在連續(xù)的10次電擊中，正確反應(yīng)達(dá)9次時的累計電擊次數(shù)來表示； 學(xué)習(xí)成績測定后24h，對大鼠連續(xù)電擊10次，其中正確反應(yīng)次數(shù)即為該大鼠的記憶成績。而 后腹腔注射3%水合氯醛（300mg/kg)麻醉大鼠。用大鼠腦立體定位儀將大鼠頭部固定，暴 露顱骨，用齒科打磨器于前囟點右2_/下2_處鉆一直徑為2-3_的骨窗（不能損傷硬腦 膜），將TSD144型激光多普勒探頭置于骨窗中較粗血管的正上方，用腦立體定位儀固定探 頭，連接MP150型十六導(dǎo)生理記錄儀進(jìn)行腦血流監(jiān)測，待曲線平穩(wěn)約15min后，記錄平穩(wěn)區(qū) 段的平均腦血流量 [2]。然后將大鼠處死，取出損傷側(cè)腦于10%甲醛溶液中固定，由病理專 業(yè)人員制片，HE染色，并于光鏡下閱片，觀察大腦皮質(zhì)海馬區(qū)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變 [8]。
[0094] 表4對局灶性腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響(?)
[0095]
[0096] #ρ〈0· 05, ##ρ〈0· 01 模型對照組 vs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #ρ〈0· Olvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0097] 缺血再灌注后第13d進(jìn)行學(xué)習(xí)能力測定，由表4可見，與偽手術(shù)組相比，模型對照 組大鼠學(xué)習(xí)次數(shù)極顯著性增多，表明在缺血再灌注后第13d，大鼠的學(xué)習(xí)能力還是嚴(yán)重受 損。與模型對照組相比，銀靈通高劑量組、銀靈通中劑量、銀杏葉片組和阿司匹林組大鼠學(xué) 習(xí)能力均極顯著性提高（P〈〇. 01)，銀靈通低劑量組學(xué)習(xí)能力顯著性提高（P〈〇. 05)。學(xué)習(xí)能 力測定結(jié)束后24h進(jìn)行記憶能力測定，銀靈通高劑量組和銀杏葉片組及阿司匹林組均能極 顯著性提升缺血再灌注大鼠記憶能力（P〈〇. 01)，銀靈通中、低劑量組能顯著性提升缺血再 灌注大鼠記憶能力（Ρ〈〇·〇5)。
[0098] 表5對局灶性腦缺血再灌注大鼠局部腦血流量的影響( :?)
[0100] #ρ〈0· 05, ##p〈0.0 lvs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #p〈0.0 lvs.模型對照組；ap〈0. 05， aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0101] 由表5可見，與偽手術(shù)組相比，銀杏葉片組局部腦血流量無顯著性差異（p > 0. 05)，銀靈通高劑量組腦血流量顯著性降低（p〈0. 05)，其他各組15d后局部腦血流量均極 顯著性降低（P〈〇. 01)。與模型對照組相比，除復(fù)方低劑量組外其他各組15d后局部腦血流 量均極顯著性升高（P〈〇. 01)。
[0102] 與銀杏葉片組相比，銀靈通中劑量組腦血流量顯著性降低（p〈0. 05)，銀靈通低劑 量組局部腦血流量極顯著性降低（p〈〇. 01);與阿司匹林組相比，銀靈通低劑量組腦血流量 極顯著性降低（P〈〇. 01)，其他各組間比較無顯著性差異（P > 0. 05)。
[0103] 病理組織檢查標(biāo)本分為7組，分別為偽手術(shù)組、模型組、復(fù)方銀靈通膠囊高、中和 低劑量組、陽性藥1組和陽性藥2組，每組8例。檢測結(jié)果如下所述：
[0104] 偽手術(shù)組：大腦皮質(zhì)層和海馬區(qū)結(jié)構(gòu)清楚，完整，神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞核膜清 楚，核仁明顯，染色質(zhì)豐富。
[0105] 模型對照組：右側(cè)大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)結(jié)構(gòu)紊亂，見不同程度的梗死區(qū)，梗死區(qū)嗜伊 紅淡染，梗死區(qū)中心神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)纖維壞死，結(jié)構(gòu)破壞，組織結(jié)構(gòu)疏松呈篩 網(wǎng)狀，個別的梗死灶周邊有炎性細(xì)胞浸潤。
[0106] 復(fù)方銀靈通膠囊高、中和低劑量組：高、中和低劑量組部分例大腦與模型組大腦病 理特點相似，右側(cè)大腦皮質(zhì)和/或海馬區(qū)結(jié)構(gòu)紊亂，見不同程度的梗死區(qū)，梗死區(qū)嗜伊紅淡 染，梗死區(qū)中心神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)纖維壞死，結(jié)構(gòu)破壞，組織結(jié)構(gòu)疏松呈篩網(wǎng)狀， 個別的梗死灶周邊有炎性細(xì)胞浸潤。低劑量組的梗死區(qū)范圍與模型組接近，中劑量組的梗 死區(qū)范圍略小于模型組，高劑量的梗死區(qū)范圍明顯小于模型組。
[0107] 陽性藥1銀杏葉提取物組和陽性藥2阿司匹林組
[0108] 陽性藥1組和陽性藥2組大腦與模型組大腦病理特點相似，只是程度較輕，均見右 側(cè)大腦皮質(zhì)和/或海馬區(qū)結(jié)構(gòu)紊亂，見程度較輕的梗死區(qū)，梗死區(qū)嗜伊紅淡染，梗死區(qū)中心 神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)纖維壞死，結(jié)構(gòu)破壞，組織結(jié)構(gòu)疏松，個別的梗死灶周邊有炎 性細(xì)胞浸潤。
[0109] 1. 3對腦組織及血清生化指標(biāo)的影響
[0110] 取雄性SD大鼠105只，造模及給藥方法同上。末次給藥后0. 5h，眼眶靜脈叢取血 分離出血清，取血后立即處死大鼠，取出大腦，將損傷側(cè)腦前部分離，用組織剪充分剪碎并 混勻，稱取0. 5g加4. 5ml冰冷的生理鹽水中充分研磨使組織勻漿化，4°C 1500轉(zhuǎn)離心10分 鐘，取上清即為10%腦組織勻漿液，用于生化指標(biāo)的測定。按試劑盒說明書測定大鼠血清中 乳酸脫氫酶（LDH)活力 [9]，及腦組織中總抗氧化能力（T-AOC)活力、超氧化物歧化酶（SOD) 活力[1°]、丙二醛（MDA)含量、Na +-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶、肌酸激酶（CK)活力、乳酸（LD) 含量，組織蛋白測定用BCA蛋白測定法。結(jié)果見表6~表8。
[0111] 表6對局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織T-AOC、SOD、MDA的影響(1句，《=8)
[0113] #ρ〈0· 05, ##ρ〈0· 01 模型對照組 vs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #ρ〈0· Olvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0114] 由表6可見
[0115] 模型對照組與偽手術(shù)組相比，總抗氧化能力（T-AOC)、SOD活力及MDA活力均極顯 著性降低（P〈〇.〇l);
[0116] 與模型對照組相比，銀靈通高劑量組、阿司匹林組能極顯著性升高腦組織T-AOC 的活力（P〈〇. 01)，銀杏葉片、銀靈通中劑量組能顯著性提高腦組織T-AOC的活力（p〈0. 05)， 銀杏葉片、阿司匹林、銀靈通高、中劑量組均能極顯著性提高腦組織SOD活力（p〈0. 01)，銀 靈通低劑量組能顯著性提高腦組織SOD活力（p〈0. 05)，銀杏葉片、銀靈通高劑量組能極顯 著性降低腦組織MDA活力（p〈0. 01)，阿司匹林、銀靈通中劑量組能顯著性降低腦組織中MDA 的活力（Ρ〈〇· 05)。
[0117] 與銀杏葉片組相比，銀靈通低劑量組MDA活力極顯著性升高（ρ〈0.01);與阿司匹 林組相比，銀靈通中、低劑量組T-AOC顯著性降低（ρ〈0. 05)，銀靈通低劑量組MDA活力顯著 性升高（ρ〈0. 05);銀靈通其他各劑量組與陽性藥組比較均無顯著性差異（ρ>0. 05)。
[0118] 表7對局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織Na+-K+ATP酶/Ca 2+-Mg2+ATP酶的影響 (?, π=8)
[0120] #ρ〈0· 05, ##ρ〈0· 01 模型對照組 vs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #ρ〈0· Olvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0121] 由表7可見，模型對照組與偽手術(shù)組相比，模型對照組Na+-K+ATP酶活力、 Ca2+-Mg2+ATP酶活力極顯著性降低（ρ〈0· 01);
[0122] 與模型對照組相比，銀杏葉片、阿司匹林、銀靈通高劑量組均能顯著性升高腦組織 Na+-K+ATP酶活力（ρ〈0. 05)，銀杏葉片、阿司匹林、銀靈通高劑量組能顯著性升高腦組織中 Ca2+-Mg2+ATP酶活力（ρ〈0· 05)，其他各組比較無顯著性差異（ρ>0· 05);
[0123] 與銀杏葉片組相比，銀靈通低劑量組Ca2+-Mg2+ATP酶活力顯著性降低（ρ〈0. 05);銀 靈通其他各劑量組與陽性藥組比較均無顯著性差異（Ρ>〇. 05)。
[0124] 表8對局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織CK、LD活力及血清LDH的影響 (-AiS, B=B )
[0127] #ρ〈0· 05, ##ρ〈0· 01 模型對照組 vs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #ρ〈0· Olvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0. 01銀靈通組vs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0. 01銀靈通組vs.阿司匹林組
[0128] 由表8可見，模型對照組與偽手術(shù)組相比，各組間CK活力均無顯著性差異 (p>0. 05)，模型對照組腦組織LD含量及血清LDH活力均極顯著性升高（p〈0. 01);
[0129] 與模型對照組相比，銀靈通高、中劑量組、銀杏葉片組、阿司匹林組腦組織LD活力 顯著性降低（P〈〇. 05)，銀靈通高、中劑量組、銀杏葉片組、阿司匹林組血清LDH活力均極顯 著性降低（P〈〇.〇l);
[0130] 與銀杏葉片組相比，銀靈通低劑量組血清LDH活力顯著性降低（p〈0. 05);其他各 組間比較均無顯著性差異（P>〇. 05)。
[0131] 2、復(fù)方銀靈通膠囊治療大鼠大腦中動脈閉塞所致永久性腦缺血的實驗研究（第 一天給藥3次，以后每天給藥一次，連續(xù)給藥15天）
[0132] 2. 1對死亡率、神經(jīng)行為學(xué)評分、腦含水量、梗塞率的影響
[0133] 清潔級雄性SD大鼠105只，體重250-300g，參考Longa等人的方法，采用頸內(nèi)動脈 線栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞（MCAO)模型 [1]。假手術(shù)組大鼠麻醉后，僅暴露頸內(nèi)外動脈 分叉，不閉塞MCA。造模后將動物分為7組，每組15只，復(fù)方銀靈通膠囊3個劑量組，分別 為：1. 2g/kg(0. 24g/ml)，0· 6g/kg(0. 12g/ml)，0· 3g/kg(0. 06g/ml)。陽性對照藥 1 銀杏葉片 組4mg/kg(0. 8mg/ml)。陽性對照藥2阿司匹林組30mg/kg(6mg/ml)。另設(shè)假手術(shù)組及缺血 模型對照組（均給以等容積的0. 5% CMC-Na)。于缺血后3h開始給藥，每天灌胃給藥一次， 連續(xù)給藥15天，首次給藥劑量為維持量的3倍，給藥容積為0. 5ml/100g體重。
[0134] 實驗過程中觀察并記錄動物的死亡情況（死亡前癥狀和死亡數(shù)）。
[0135] 漁線的制備：將一長40mm，直徑0. 26mm的漁線的一端用記號筆標(biāo)記，在距離此標(biāo) 記端18_處用記號筆再做一標(biāo)記，置于生理鹽水中備用。
[0136] 于末次給藥后0. 5h，參照神經(jīng)功能缺陷評分法（18分標(biāo)準(zhǔn)[2])對各組大鼠進(jìn)行評 分，標(biāo)準(zhǔn)如試驗1.1。上述指標(biāo)測定后，斷頭處死大鼠，取出全腦稱重。迅速置于-20°c速凍 10-15min，至鼠腦變硬時，從額極2mm開始，做冠狀均切五刀，后方至大腦與后腦交界處，切 成2mm厚的六片后迅速將腦片置5ml含有1 % TTC的磷酸緩沖溶液中，避光溫孵30分鐘，在 溫孵過程中每隔7~8分鐘翻動一次，溫孵30分鐘后取出腦片，用數(shù)碼相機拍照輸入電腦， 之后用Image pro plus計算蒼白區(qū)（梗塞區(qū)）和非蒼白區(qū)（正常區(qū)）體積，計算梗塞百分 比如下[3]:
[0137] 腦梗死體積百分比={[總梗死體積_(右半腦體積-左半腦體積）]/左半腦體 積} XlOO % 〇
[0138] 將染色后的腦組織置于IKTC烘箱烘干，對照大腦濕重求出腦含水量如下：
[0139] 腦組織含水量（％) = (1-腦組織干重/腦組織濕重）X 100%
[0140] 表9對永性腦缺血大鼠死亡率的影響（1打，《=/5)
[0142] 各組死亡率如上表所示。隨銀靈通劑量升高，大鼠死亡率呈逐漸降低趨勢。
[0143] 表10對永久性腦缺血大鼠神經(jīng)行為、腦梗塞率和腦含水量的影響?土y)
[0145] #ρ〈0· 05, ##p〈0. 01 模型對照組 vs.偽手術(shù)組；*ρ〈0· 05, #p〈0.0 lvs.模型對照組； ap〈0. 05, aap〈0.0 lvs.銀杏葉片組；bp〈0. 05, bbp〈0.0 lvs.阿司匹林組
[0146] 由表10可見，與偽手術(shù)組比較，模型組腦組織含水量顯著性性升高（p〈0. 05)，其 他各組腦組織含水量與偽手術(shù)組相比均無顯著性差異（P>〇. 05);
[0147] 與模型組相比，銀杏葉片組、阿司匹林、復(fù)方銀靈通高劑量組神經(jīng)行為學(xué)評分極顯 著性升高（p〈0. 01)，復(fù)方銀靈通中劑量組神經(jīng)行為學(xué)評分顯著性升高（p〈0. 05)，銀杏葉 片、阿司匹林、復(fù)方銀靈通高、中劑量組均能極顯著性降低腦梗塞百分比（P〈0. 01)，銀杏葉 片組、復(fù)方銀靈通高劑量組能顯著性降低腦組織含水量（P〈〇. 05)，其他各組與模型組相比 均無顯著性差異（P>〇. 05)。
[0148] 與銀杏葉片組相比，阿司匹林組、銀靈通高劑量組腦梗塞百分比極顯著性降 低（p〈0.01);與阿司匹林組相比，銀靈通高、中、低劑量組腦梗塞百分比均極顯著性升高 (P〈〇. 01);銀靈通其他各劑量組與陽性藥組比較均無顯著性差異（P>〇. 05)。
[0149] 2. 2對死亡率、學(xué)習(xí)記憶功能、腦血流量和腦組織學(xué)的影響
[0150] 另取雄性SD大鼠105只，造模及給藥方法同上。實驗過程中觀察并記錄動物的死 亡情況（死亡前癥狀和死亡數(shù)）。采用Y型迷宮測定大鼠學(xué)習(xí)和記憶功能，具體方法同1. 2， 學(xué)習(xí)成績以達(dá)到連續(xù)10次電擊有9次正確所受的