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一種高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌及其構(gòu)建方法與流程

文檔序號(hào):12577328閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌,其特征在于:紅酵母工程菌為紅發(fā)夫酵母菌株SXD,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏號(hào)為CGMCC No.10519,保藏日期為2015年2月4日。

2.一種權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于:以紅發(fā)夫酵母CBS 6938菌株作為宿主,通過(guò)代謝工程方式,將提高紅發(fā)夫酵母乙酰輔酶A合成、降低甾體類(lèi)物質(zhì)合成以及提高蝦青素合成途徑代謝通量的基因元件表達(dá)盒轉(zhuǎn)化宿主,進(jìn)而獲得高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌。

3.按權(quán)利要求2所述的高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于:通過(guò)代謝工程方式,在宿主CBS 6938中過(guò)量表達(dá)紅發(fā)夫酵母蝦青素合成酶基因CrtS、細(xì)胞色素P450還原酶基因CrtR、GGPP合成酶基因CrtE和茄紅素合成酶基因CrtYB;同時(shí)表達(dá)釀酒酵母HMG-CoA還原酶基因HMGR,并且敲除紅發(fā)夫酵母C22-甾醇去飽和酶基因CYP61,表達(dá)細(xì)菌丙酮酸脫氫酶基因LpdA、AceE和AceF基因,進(jìn)而獲得高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌。

4.按權(quán)利要求2或3所述的高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于:所述高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌基因的整合位點(diǎn)為紅發(fā)夫酵母基因組rDNA、CYP61或/和DHS3位點(diǎn)。

5.按權(quán)利要求2或3所述的高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于:所述高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的啟動(dòng)子和終止子分別為紅發(fā)夫酵母基因ADH4、TPI、ACT、TEF1、GPD、GDH或ACT中任意的啟動(dòng)子和終止子。

6.按權(quán)利要求2或3所述的高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于:所述高產(chǎn)蝦青素紅酵母工程菌的抗性篩選標(biāo)記為遺傳霉素(G418)、潮霉素(Hgr)、放線(xiàn)菌酮(CHX)、博萊霉素(BLM)中的一種或幾種的組合。

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