技術(shù)特征：

1.一種EYFP基因標(biāo)記根瘤菌的方法，其特征在于所述方法步驟如下：

一、將EYFP-pUC19載體酶切純化后獲得EYFP產(chǎn)物；

二、將EYFP產(chǎn)物與載體pBBR1MCS-2相連，酶切驗(yàn)證，將構(gòu)建的EYFP-pBBR1MCS-2轉(zhuǎn)入E.coli DH5α中；

三、將供體菌EYFP-pBBR1MCS-2、輔助菌pRK2013、受體菌慢生型大豆根瘤菌三親本雜交；

四、同源重組：通過在Km^R的平板上生長，篩選重組子；

五、PCR驗(yàn)證，確定篩選的重組子已經(jīng)插入到慢生型大豆根瘤菌的基因組中，而基因組中不含有野生株；

六、顯微鏡下觀察EYFP蛋白基因表達(dá)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EYFP基因標(biāo)記根瘤菌的方法，其特征在于所述步驟一和二中，酶切體系如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EYFP基因標(biāo)記根瘤菌的方法，其特征在于所述步驟二中，EYFP產(chǎn)物與載體pBBR1MCS-2相連的反應(yīng)體系如下：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EYFP基因標(biāo)記根瘤菌的方法，其特征在于所述步驟五中，PCR體系如下：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EYFP基因標(biāo)記根瘤菌的方法，其特征在于所述步驟五中，PCR反應(yīng)參數(shù)如下：