技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于分子生物學(xué)與生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)本發(fā)明涉及基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的gRNA序列及其組合在敲除人PD?1基因的應(yīng)用以及腫瘤治療中的應(yīng)用。本發(fā)明根據(jù)CRISPR/Cas9的設(shè)計(jì)原則，在人基因組中設(shè)計(jì)出25個(gè)靶點(diǎn)，然后將其分別構(gòu)建在px458載體上，并從中篩選得到18個(gè)向?qū)NA（gRNA）。在人T淋巴細(xì)胞中利用這18個(gè)gRNA介導(dǎo)的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，可以有效的敲除人PD?1基因，該系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便、敲除效率高，適用于多種腫瘤細(xì)胞模型。本發(fā)明涉及的gRNA有望在腫瘤的細(xì)胞治療中得到應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：周勇;申友鋒
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶高圣生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司
文檔號(hào)碼：201610871452
技術(shù)研發(fā)日：2016.09.30
技術(shù)公布日：2017.03.08