的。小圖A以綠色顯示采用兔多克隆抗體（1:1000,由BD開發(fā)）的DPPX免疫染色；小 圖B顯示來自患有腦炎的患者之一的血清的DPPX反應(yīng)性，小圖C顯示來自健康受試者的血 清缺乏反應(yīng)性。需要注意的是，DPPX主要表達(dá)于腸肌叢的大簇神經(jīng)元的細(xì)胞質(zhì)膜，并且還在 粘膜下神經(jīng)叢所位于的CM和SM中以細(xì)縱模式（finelongitudinalpattern)被檢測到。 小棒=20ym。（圖 2B)
[0061] 圖3:采用基于細(xì)胞的測定分析DPPX抗體
[0062] 表達(dá)DPPX-L的HEK293細(xì)胞（參見實施例4,見下文）用患者的血清（A、D、G、J) 和抗DPPX的小鼠單克隆抗體（B、E、H、K)進(jìn)行免疫染色。合成（merged)的反應(yīng)性示于相 應(yīng)的小圖（C、F、I、L)中。比較健康個體的血清和DPPX單克隆抗體的類似研宄示于M和N 中，并且合成的反應(yīng)性示于0中。需要注意的是，患者的抗體與表達(dá)DPPX的細(xì)胞發(fā)生免疫 反應(yīng)。小棒=10ym。
[0063] 圖4:采用DPPX無效突變體和野生型小鼠的大腦對比患者的血清反應(yīng)性
[0064] 患者血清與野生型小鼠海馬的反應(yīng)性示于A、C、E和G中。兔多克隆DPPX抗體與 野生型小鼠海馬的反應(yīng)性示于I中。右側(cè)小圖顯示了類似實驗的結(jié)果，但采用的是DPPX無 效小鼠的海馬。需要注意的是，前三位患者的血清（表1的病例1、2和3)和兔多克隆DPPX 抗體的反應(yīng)性在DPPX無效小鼠的海馬中被消除了（小圖B、D、F、J)。沒有被包括在表中的 患者4 (小圖G和H)顯示與DPPX無效小鼠的海馬有剩余的反應(yīng)性，表明該患者具有兩種抗 體，一種抗DPPX，另一種抗未知抗原。小棒=200iim。
[0065] 圖5 :用患者的血清對大鼠大腦免疫染色
[0066] 大鼠腦的矢狀（sagittal)切片用患者（A)和健康個體⑶的CSF免疫染色。需 要注意的是，患者的CSF顯示出與大腦的神經(jīng)纖維（主要是海馬和小腦）強烈的反應(yīng)性，而 對照CSF不產(chǎn)生反應(yīng)性。小棒=500ym。
[0067] 圖6:采用表達(dá)缺失了DPPX細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的突變體（DPPXed-myc)的基于細(xì)胞的 測定分析患者的抗體
[0068] 表達(dá)突變的DPPXed-myc構(gòu)建體的HEK293細(xì)胞用患者的血清（A、D、G、J)和1:500 稀釋的小鼠單克隆Myc標(biāo)簽抗體（B、E、H、K)進(jìn)行免疫染色。合成的反應(yīng)性示于相應(yīng)的小圖 (C、F、I、L)中。采用健康個體的血清和抗Myc標(biāo)簽的抗體的類似研宄示于M和N中，并且 合成的圖示于〇中。需要注意的是，兩位患者（圖A和J)具有不與該構(gòu)建體反應(yīng)的抗體， 表明革G表位僅存在于細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域中（圖3);相反，兩位患者具有與該構(gòu)建體反應(yīng)的抗體， 表明除在DPPX完全構(gòu)建體（圖3)中和活神經(jīng)元培養(yǎng)物中存在的細(xì)胞外表位之外，它們還 識別細(xì)胞內(nèi)表位〇)和G)。小棒=10ym。
[0069] 圖7 :采用表達(dá)Kv4. 2的基于細(xì)胞的測定分析患者的抗體
[0070] 表達(dá)Kv4. 2的HEK293細(xì)胞用患者的血清（A、D、G、J)和抗Kv4. 2的兔多克隆抗體 (八1〇111〇1^1&匕8，#4?(：-023)(8、￡、11、1()進(jìn)行免疫染色。合成的反應(yīng)性示于相應(yīng)的小圖（(：、 F、I、L)中。比較健康個體的血清和兔多克隆抗體的類似研宄示于M和N中，并且合成的圖 示于0中。需要注意的是，患者的抗體不識別Kv4. 2。小棒=10ym。 實施例
[0071] 本文報道的是具有突出神經(jīng)精神癥狀（之前，在3位中之前有強烈的腹瀉）的4位 患者的臨床和免疫性特征和抗新型細(xì)胞表面抗原一一二肽基肽酶樣蛋白_6(DPP6或DPPX) (KV4. 2鉀通道的細(xì)胞表面輔助亞基）的抗體。除了已知在海馬和小腦中DPPX的強勁表達(dá) 之外，發(fā)明人顯示了DPPX也表達(dá)于腸肌叢中。
[0072] 患有神經(jīng)精神癥狀的亞急性發(fā)作的4位患者和與嚙齒類海馬和小腦的神經(jīng)纖維 的免疫染色以及分離的培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的細(xì)胞表面的免疫標(biāo)記顯示具有類似模式的血清 或CSF抗體的觀察結(jié)果導(dǎo)致免疫沉淀靶抗原。包括患有自身免疫性炎癥性和非炎癥性腦病 的患者以及正常個體的149位受試者的血清或CSF用作對照。
[0073] 實施例1 :患者
[0074] 下文詳細(xì)描述患者（病例1至3)，并總結(jié)于表1中。第四個病例是76歲的男子， 其發(fā)展了突出的腹瀉和體重減輕，伴隨快速進(jìn)展的神志不清、認(rèn)知下降、癲癇、步態(tài)不穩(wěn)和 鞘內(nèi)IgG產(chǎn)生跡象（IgG指數(shù)1.49);由于信息有限和缺乏隨訪，他沒有被列入表中。
[0075]患者 1 :
[0076] 61歲的男性，有肥胖、高血壓和成年發(fā)作的糖尿病史，由于腹痛和腹瀉四周接著 精神狀態(tài)的亞急性變化（特征在于抑郁、攻擊性、撤退（withdrawal)、幻視、緘默癥、肌陣 攣和夸張的驚嚇反應(yīng)）而住院。腹部MRI顯示脂肪肝，但沒有腫瘤跡象，廣泛的GI后處理 (extensiveGIworkup)顯示奠便白細(xì)胞、艱難梭菌、寄生蟲和卵為陰性。胃、小腸和結(jié)腸內(nèi) 窺鏡活檢僅顯示慢性胃炎（血清幽門螺旋桿菌IgG陽性，無組織學(xué)上的細(xì)菌）。腹瀉持續(xù)超 過一個月，沒有植物神經(jīng)功能紊亂的其它癥狀。
[0077] CSF、MRI和EEG研宄描述于表 1 中。針對HSV、VZV、Tropherymawhippelii和腸病 毒的CSFPCR為陰性。風(fēng)濕病、副腫瘤和神經(jīng)元細(xì)胞表面抗體組（panel)(其也包括甘氨酸 受體）為陰性。全身CT和PET掃描和睪丸超聲檢查未發(fā)現(xiàn)癌癥。
[0078]由于惡化的精神狀態(tài)，患者被短暫插管（intubated)，并用靜脈注射甲潑尼龍 (lOOOmg/天X5天）治療，具有明顯神經(jīng)學(xué)改善。然后他被安排為延長的口服類固醇逐漸 減量方案超過4個月，并出院至專業(yè)護理機構(gòu)。四個月之后，他由于惡化的精神狀態(tài)和尿路 感染再次入院。用抗生素接著IVIg(在5天中2克/kg)治療導(dǎo)致短暫的神經(jīng)功能改善。隨 后，他發(fā)展成敗血癥并被轉(zhuǎn)移至ICU，需要氣管切開術(shù)和PEG管。重復(fù)的IVIg并未改善他的 精神狀態(tài)。然后，用利妥昔單抗對他進(jìn)行治療（l〇〇〇mg靜脈注射X2劑量，相隔15天），并 且每隔一天潑尼松被逐漸給藥（titrated)至5mg。臨床進(jìn)程（clinicalcourse)是尿路 感染和肺炎并發(fā)，并且5個多月他的精神狀態(tài)一直很差。他最好的時候能夠張嘴說幾個詞 并遵循簡單的命令。在該疾病階段檢查的一個驚人發(fā)現(xiàn)是對于聲音和觸摸有夸張的驚嚇反 應(yīng)。此外，他表現(xiàn)出頻繁的發(fā)作性肌陣攣、口腔運動障礙和伸展過度（paratonia);肌肉力 量正常。
[0079] 最終用血漿交換對他進(jìn)行治療。在首次交換之后，他能夠與他的檢查人員容易地 交談并回答問題，但還不足以參加正式的認(rèn)知測試。隨后，他每月接受環(huán)磷酰胺的靜脈內(nèi)脈 沖治療，在認(rèn)知方面得到穩(wěn)定的但不完整的改善。他能夠在癥狀出現(xiàn)后15個月回家。在癥 狀出現(xiàn)后21個月的隨訪時和已接受9個每月劑量的靜脈內(nèi)環(huán)磷酰胺之后，他還與家人呆在 家中，但日常生活的許多活動需要協(xié)助。認(rèn)知測試時，定向有相對保留但在注意力和集中注 意、執(zhí)行功能、抽象、視覺空間功能和音位流暢性方面還有些障礙?？陬^記憶測試顯示成功 編碼（需要提示）。關(guān)于蒙特利爾認(rèn)知評估（MOCA)，他在30點中得分為9點。在疾病過程 中他體重已經(jīng)減輕45kg。
[0080]患者 2：
[0081] 2008年4月，45歲的女性，表現(xiàn)為進(jìn)展性腹瀉和體重減輕30kg。內(nèi)窺鏡和活檢未 能查明病因。在隨后的6至8周，她注意到她變得認(rèn)知障礙、工作時越來越多的錯誤。7月， 她由于情緒激動和幻覺住進(jìn)了醫(yī)院。檢查時，她被發(fā)現(xiàn)具有偏執(zhí)、焦慮、失眠并抱怨盜汗。這 些癥狀加上血清抗核抗體的鑒定（ANA>2560)最初導(dǎo)致診斷為紅斑狼瘡。
[0082] 9月，患者被轉(zhuǎn)移到神經(jīng)科（Neurologyunit)。抵達(dá)時，她被發(fā)現(xiàn)具有偶爾的肌陣 攣抽搐、四肢的靜止性震顫、顯著的雙側(cè)水平眼球震顫和具有下行腳趾的全身反射亢進(jìn)。大 腦MRI正常，并且EEG顯示全身慢波0和A活動的間歇性發(fā)作。除了之前注意到的ANA， 針對感染和自身免疫性疾病的廣泛血液檢測結(jié)果為陰性（均勻模式）。CSF分析顯示15個 白細(xì)胞（主要是淋巴細(xì)胞）、正常的蛋白質(zhì)和葡萄糖濃度和無法匹配的寡克隆帶。胸部、腹 部和骨盆的CT顯示附件增厚超聲，得到證實。FDG-PET掃描正常。接下來超過3周，她變得 越來越情緒激動，具有惡化的肌陣攣和四肢的靜息性粗顫（courserestingtremor)。地 西泮提供了一些癥狀的緩解，但在接下來2周內(nèi)她發(fā)展成意識和顏面部運動水平下降的發(fā) 作。重復(fù)的EEG證實低壓全身癲癇樣放電，并且開始抗癲癇藥物治療。重復(fù)的大腦MRI顯 示大腦正常。基于假定的炎癥性腦病，她接受靜脈內(nèi)甲潑尼龍（每天lg，3天），沒有效果。 癲癇頻率惡化，并且她發(fā)展成各種抗癲癇藥物治療難治的癲癇持續(xù)狀態(tài)的頻繁發(fā)作，最終 需要鎮(zhèn)靜、插管和機械通氣支持。任何試圖撤除鎮(zhèn)靜均導(dǎo)致癲癇持續(xù)狀態(tài)的復(fù)發(fā)?；诟?件病變，她接受了子宮及雙側(cè)輸卵管卵巢切除術(shù)。病理學(xué)證實了子宮肌瘤。然后，她開始靜 脈內(nèi)施用免疫球蛋白（IVIg)，帶來緩慢和持續(xù)性的改善，允許拔管和離開ICU。
[0083] 2009年1月，血清和CSF分析顯示新的與神經(jīng)元細(xì)胞表面反應(yīng)的自身抗體。該發(fā) 現(xiàn)和神經(jīng)學(xué)癥狀的持續(xù)導(dǎo)致開始用利妥昔單抗治療，其與更快的恢復(fù)有關(guān)，并且她于2009 年5月出院回家。隨后，她繼續(xù)改善并停止抗癲癇藥物治療。目前，她有正常的認(rèn)知并獨立 生活。她進(jìn)行她的CD19淋巴細(xì)胞計數(shù)的定期監(jiān)測，并且當(dāng)計數(shù)提高到1%時接受利妥昔單 抗的進(jìn)一步治療。有一次治療被延遲了，導(dǎo)致震顫和眼球震顫的復(fù)發(fā)。
[0084]患者3：
[0085] 2006年6月，該58歲慣用右手的女性發(fā)展成幻覺和不穩(wěn)定，并住進(jìn)了醫(yī)院。以下 測試均正常：血細(xì)胞計數(shù)和化學(xué)分析、甲狀腺功能檢測、ANA和dsDNA抗體以及萊姆病、落 基山斑瘆熱、柯薩奇病毒、巴貝斯蟲和丙型肝炎病毒的研宄。ESR略微升高至43。在無對比 度增強情況下大腦MRI顯示非特異性白質(zhì)變化。胸部X射線正常。頸動脈超聲未見顯著狹 窄。EEG顯示輕度放緩。CSF分析顯示llWBC/mm3,均為單個核細(xì)胞，50mg/dl的蛋白質(zhì)和 74mg/dl的葡萄糖。CSFHSVPCR、病毒培養(yǎng)、萊姆滴度、隱球菌抗原均為陰性。有一個寡克 隆帶。來自神經(jīng)病學(xué)、感染性疾病、內(nèi)科和精神病學(xué)的顧問對她進(jìn)行看病，并用利培酮、加巴 噴丁、艾司西酞普蘭和卡維地洛進(jìn)行治療。有了這些藥物治療，她回到了她自己平常的大約 80%并出院回家。
[0086] 到2006年11月，她發(fā)展成增加的