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保衛(wèi)細(xì)胞表達(dá)盒組成及其使用方法

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保衛(wèi)細(xì)胞表達(dá)盒組成及其使用方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】保衛(wèi)細(xì)胞表達(dá)盒組成及其使用方法 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及植物功能基因組學(xué)、分子生物學(xué)、基因工程和植物中基因表達(dá)的選擇 性調(diào)節(jié)的領(lǐng)域。具體地,本發(fā)明描述了能夠賦予保衛(wèi)細(xì)胞可調(diào)型表達(dá)的人工轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)多核 苷酸。
[0002] 關(guān)于序列表的電子提交的聲明
[0003] 作為紙質(zhì)副本的替代提供了一個(gè)ASCII文本格式的序列表,該序列表在37C. F.R. § 1,821 下提交,名稱(chēng)為 73701-TO-REG-0RG-P-l_Sequence_Listing_ST25.txt,大小 為55. 1KB字節(jié),生成于2014年2月18日并且經(jīng)由EFS-Web提交。這個(gè)序列表在此通過(guò)引 用以其披露內(nèi)容結(jié)合到本說(shuō)明書(shū)中。
[0004] 發(fā)明背景
[0005] 在農(nóng)業(yè)生物技術(shù)中,可以根據(jù)人們的需要修飾植物。用來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)的一個(gè)方式 是通過(guò)使用現(xiàn)代基因工程技術(shù)。例如,通過(guò)將感興趣的基因引入植物,植物可以被特異性地 修飾為表達(dá)希望的表型性狀。為此,最通常是用包括啟動(dòng)子區(qū)、編碼區(qū)和終止區(qū)的異源基因 來(lái)轉(zhuǎn)化植物。當(dāng)對(duì)異源基因進(jìn)行基因工程化以用于在植物中表達(dá)時(shí),啟動(dòng)子的選擇通常是 一個(gè)因素。雖然會(huì)希望組成性地表達(dá)某些基因,即貫穿植物終生并且在多數(shù)組織和器官中, 但是更希望其他基因僅響應(yīng)具體刺激才表達(dá)或限于特定細(xì)胞或組織。
[0006] 已經(jīng)示出,某些啟動(dòng)子能夠以高于其他的速率指導(dǎo)RNA合成。這些被稱(chēng)為"強(qiáng)啟動(dòng) 子"。已經(jīng)示出,某些其他啟動(dòng)子僅在具體類(lèi)型的細(xì)胞或組織中以更高水平指導(dǎo)RNA合成, 并且通常稱(chēng)為"組織特異性啟動(dòng)子",或如果啟動(dòng)子在某些組織中優(yōu)先指導(dǎo)RNA合成(在其 他組織中,會(huì)以降低的水平發(fā)生RNA合成),則稱(chēng)為"組織優(yōu)先啟動(dòng)子"。因?yàn)槭褂脝?dòng)子控 制引入植物、植物組織或植物細(xì)胞的感興趣核酸的表達(dá)模式,所以在分離能夠在特定組織 類(lèi)型或特定植物發(fā)育階段以某些水平控制感興趣核酸的表達(dá)的新穎啟動(dòng)子方面,存在持續(xù) 的興趣。
[0007] 在植物葉子的表皮中的氣孔使得能夠控制植物水損失和氣體交換,包括二氧化碳 從大氣進(jìn)入植物的流入。吸取二氧化碳以用于光合固碳,并且水是通過(guò)蒸騰作用的過(guò)程通 過(guò)氣孔損失。每一個(gè)氣孔由專(zhuān)門(mén)的一對(duì)保衛(wèi)細(xì)胞組成,保衛(wèi)細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞膨壓來(lái) 控制氣孔的大小。植物的水分利用效率是植物生物技術(shù)應(yīng)用和農(nóng)業(yè)的重要方面。水分利用 效率限定了植物可以平衡通過(guò)氣孔的水損失與用于光合作用導(dǎo)致生物質(zhì)積累的進(jìn)入葉子 中的凈〇)2攝取的良好程度。若干生物的和非生物的因子影響氣孔孔徑,由此調(diào)節(jié)給定條 件下的植物的水利用。例如,C02的濃度調(diào)節(jié)氣孔孔徑,其中高水平的C02減小氣孔孔徑,并 且低水平的C02增大氣孔孔徑。因此,對(duì)于C02流入植物和植物蒸騰作用,外部大氣0)2發(fā) 揮了一些控制作用。
[0008] 本領(lǐng)域中保衛(wèi)細(xì)胞特異性的或保衛(wèi)細(xì)胞優(yōu)先的啟動(dòng)子的數(shù)目是非常有限的 (EP-A11111051 ;普勒施(PleSch)2001)。有利的是具有多種不同啟動(dòng)子的選擇,這樣使得 針對(duì)具體基因、構(gòu)建體、細(xì)胞、組織、植物或環(huán)境可以選擇最適合的啟動(dòng)子。此外,在用多個(gè) 植物轉(zhuǎn)錄單位轉(zhuǎn)化植物方面的與日倶增的興趣和與出于這些目的使用常用調(diào)節(jié)序列關(guān)聯(lián) 的潛在問(wèn)題值得使多種啟動(dòng)子序列可用。在保衛(wèi)細(xì)胞中能夠控制異源基因的特異性表達(dá)的 調(diào)節(jié)元件會(huì)在植物生物技術(shù)和農(nóng)業(yè)方面具有顯著用途。例如,可以表達(dá)基因來(lái)更緊密地調(diào) 節(jié)氣孔的孔徑,以便改進(jìn)植物中的水利用。
[0009] 發(fā)明概述
[0010] 本發(fā)明提供了用于在植物保衛(wèi)細(xì)胞中調(diào)芐基因表達(dá)的組合物和方法。因此,在一 個(gè)方面,本發(fā)明提供了一個(gè)重組多核苷酸,該多核苷酸包括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由 以下項(xiàng)組成:選自下組的一個(gè)核酸,該組由以下項(xiàng)組成:(a)SEQIDN0:1的核酸;以及(b) 與(a)的核酸至少95% -致的一個(gè)核酸。可替代地,本發(fā)明提供了一種重組多核苷酸,該多 核苷酸包括一種以下核酸,該核酸與SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQID N0:13、SEQIDN0:14、SEQIDN0:15、SEQIDN0:16、SEQIDN0:17、SEQIDN0:18、SEQID NO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQID 勵(lì):25、3£〇10勵(lì):26、3£〇10勵(lì):27、3£〇10勵(lì):28的全長(zhǎng)上具有至少90%-致性。此外, 本發(fā)明提供了一種重組多核苷酸,該多核苷酸包括一種選自下組的核酸,該組由以下各項(xiàng) 組成:SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQIDN0:13、SEQIDN0:14、SEQID NO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQID NO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQID NO:27 和SEQIDNO:28。
[0011] 在一些方面,本發(fā)明的重組多核苷酸(例如SEQIDNO: 1)可以被可操作地連接至 至少一個(gè)感興趣的多核苷酸。在其他方面,本發(fā)明的重組多核苷酸(例如SEQIDNO: 1)可 以被可操作地連接至至少一個(gè)內(nèi)含子。仍在其他方面,本發(fā)明的重組多核苷酸可以被可操 作地連接至至少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子。仍在另外的方面,可操作地連接至至少一 個(gè)內(nèi)含子或連接至至少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子的本發(fā)明的重組多核苷酸可以被任 選地進(jìn)一步可操作地連接至至少一個(gè)增強(qiáng)子,例如TMVQ翻譯增強(qiáng)子和/或Kozak序列。在 其他方面,可操作地連接至至少一個(gè)內(nèi)含子或連接至至少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子, 并且任選地進(jìn)一步連接至TMVQ翻譯增強(qiáng)子和/或Kozak序列的本發(fā)明的重組多核苷酸可 以被進(jìn)一步可操作地連接至至少一個(gè)感興趣的多核苷酸。
[0012] 在一個(gè)另外的方面,本發(fā)明提供了一種表達(dá)盒,該表達(dá)盒包括、或基本上由以下項(xiàng) 組成、或由以下項(xiàng)組成:本發(fā)明的一種重組多核苷酸。在一個(gè)另外的方面,本發(fā)明的表達(dá)盒 可以包括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:可操作地連接至至少一個(gè)感興趣的多 核苷酸的本發(fā)明的重組多核苷酸。仍在其他方面,本發(fā)明提供了一種表達(dá)盒,該表達(dá)盒包 括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:可操作地連接至至少一個(gè)內(nèi)含子或連接至至 少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子的本發(fā)明的重組多核苷酸。仍在另外的方面,本發(fā)明提供 了一種表達(dá)盒,該表達(dá)盒包括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:可操作地連接至 至少一個(gè)內(nèi)含子或連接至至少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子的本發(fā)明的重組多核苷酸,該 重組多核苷酸可以被任選地進(jìn)一步可操作地連接至一個(gè)或多個(gè)增強(qiáng)子。任選地,該增強(qiáng)子 可以是TMVQ翻譯增強(qiáng)子和/或Kozak序列。在其他方面,本發(fā)明提供了一種表達(dá)盒,該表 達(dá)盒包括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:可操作地連接至至少一個(gè)內(nèi)含子或連 接至至少一個(gè)內(nèi)含子和至少一個(gè)外顯子,并且任選地進(jìn)一步可操作地連接至被進(jìn)一步可操 作地連接至至少一個(gè)感興趣多核苷酸的TMVQ翻譯增強(qiáng)子和/或Kozak序列的本發(fā)明的重 組多核苷酸。感興趣的多核苷酸包括一種脫落酸受體或一種修飾的脫落酸受體。
[0013] 在一個(gè)另外的方面,本發(fā)明提供了一種表達(dá)盒,該表達(dá)盒包括與SEQIDNO: 1的核 酸至少約95%-致的重組多核苷酸。本發(fā)明還提供了一種表達(dá)盒,該表達(dá)盒包括與SEQID NO:1;SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQID NO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQID NO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQID N0:27、SEQIDN0:28的核酸至少約90% -致的重組多核苷酸。
[0014] 仍在一個(gè)另外的方面,本發(fā)明提供了細(xì)胞、植物或植物部分,該細(xì)胞、植物或植物 部分包括、或基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:本發(fā)明的重組多核苷酸或本發(fā)明的表 達(dá)盒。
[0015] 在一個(gè)另外的方面,本發(fā)明提供了一種在植物的保衛(wèi)細(xì)胞中表達(dá)感興趣的多核苷 酸的方法,該方法包括將本發(fā)明的一種重組多核苷酸和/或本發(fā)明的一種表達(dá)盒引入植物 細(xì)胞,使植物細(xì)胞再生為用本發(fā)明的所述重組多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植 物,其中在所述穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物的保衛(wèi)細(xì)胞中表達(dá)感興趣的多核苷酸。
[0016] 在一個(gè)另外的方面,提供了一種調(diào)節(jié)保衛(wèi)細(xì)胞功能(氣孔打開(kāi)和關(guān)閉)的方法,該 方法包括將本發(fā)明的一種重組多核苷酸和/或本發(fā)明的一種表達(dá)盒引入植物細(xì)胞,使植物 細(xì)胞再生為用本發(fā)明的所述重組多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物,由此調(diào)節(jié) 穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物的保衛(wèi)細(xì)胞的功能。
[0017] 本發(fā)明的一個(gè)另外的方面提供了改進(jìn)植物對(duì)水分虧缺的反應(yīng)和植物水分利用效 率的一種方法,該方法包括將本發(fā)明的重組多核苷酸和/或本發(fā)明的表達(dá)盒引入植物細(xì) 胞,使植物細(xì)胞再生為用本發(fā)明的所述重組多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植 物,由此在穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物中改進(jìn)對(duì)水分虧缺的反應(yīng)和水分利用效率。
[0018] 在一些方面,本發(fā)明提供了一種調(diào)節(jié)光同化率的方法,該方法包括將本發(fā)明的重 組多核苷酸和/或本發(fā)明的表達(dá)盒引入植物細(xì)胞,使植物細(xì)胞再生為用本發(fā)明的所述重組 多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物,由此在穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物中調(diào)節(jié)光同化作 用速率。
[0019] 在一個(gè)另外的方面,提供了一種調(diào)節(jié)植物蒸騰作用速率的方法,該方法包括將本 發(fā)明的重組多核苷酸和/或本發(fā)明的表達(dá)盒引入植物細(xì)胞,使植物細(xì)胞再生為用本發(fā)明的 所述重組多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物,由此在穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物中調(diào)節(jié) 蒸騰作用速率。
[0020] 在其他方面,提供了一種產(chǎn)生具有調(diào)節(jié)的保衛(wèi)細(xì)胞功能的植物的方法,該方法包 括將本發(fā)明的重組多核苷酸和/或本發(fā)明的表達(dá)盒引入植物細(xì)胞,使植物細(xì)胞再生為用本 發(fā)明的所述重組多核苷酸和/或所述表達(dá)盒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物和/或植物部分,由此產(chǎn)生 具有經(jīng)調(diào)節(jié)的保衛(wèi)細(xì)胞功能的穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化的植物。
[0021] 另外提供的是包含本發(fā)明的重組多核苷酸和/或本發(fā)明的表達(dá)盒的植物、植物部 分、植物細(xì)胞連同由它們產(chǎn)生的作物和產(chǎn)品。在一些具體方面,本發(fā)明提供了從本發(fā)明的植 物產(chǎn)生的種子和子代植物。
[0022] 現(xiàn)在,就在此所述的其他實(shí)施例例而言,將更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的上述以及其他 方面。應(yīng)當(dāng)理解的是,本發(fā)明可以體現(xiàn)為不同的形式,并且不應(yīng)當(dāng)被解釋為對(duì)在此提出的實(shí) 施例的限制。更確切地說(shuō),提出這些實(shí)施例以使得本披露將是徹底的和完整的,并將向本領(lǐng) 域的普通技術(shù)人員充分傳達(dá)本發(fā)明的范圍。
[0023] 詳細(xì)說(shuō)明
[0024] 本說(shuō)明不旨在是一個(gè)本發(fā)明以其而實(shí)施的所有不同方式,或可以加入本發(fā)明中的 所有特征的詳細(xì)目錄。例如,關(guān)于一個(gè)實(shí)施例所說(shuō)明的特征可以結(jié)合入其他實(shí)施例中,并且 關(guān)于一個(gè)具體實(shí)施例所說(shuō)明的特征可以從那個(gè)實(shí)施例刪除。因此,本發(fā)明考慮了,在本發(fā)明 的一些實(shí)施例中,可以排除或省略在此陳述的任何特征或特征的組合。另外,鑒于本披露內(nèi) 容,對(duì)在此建議的不同實(shí)施例的眾多變體以及附加對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的,這不脫 離本發(fā)明。因此,以下說(shuō)明旨在闡述本發(fā)明的一些具體實(shí)施例,并且并沒(méi)有窮盡地?cái)⑹銎渌?有排列、組合和變化。
[0025] 除非另外定義,在此所使用的全部技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通 技術(shù)人員通常所理解的相同的意思。在此的本發(fā)明的說(shuō)明中使用的術(shù)語(yǔ)僅僅是出于描述具 體實(shí)施例的目的并且不旨在限制本發(fā)明。
[0026] 在此引用的所有的公開(kāi)、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利以及其他參考文件對(duì)于引用中提及的有 關(guān)句子和/或段落的傳授內(nèi)容通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此。在此采用的技術(shù)的參考文獻(xiàn)旨 在參考本領(lǐng)域中通常理解的技術(shù),包括對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言很清楚的那些技術(shù)的 變化或等效技術(shù)的替換。
[0027] 除非上下文另外表明,明確地預(yù)期的是在此所述的本發(fā)明的不同特征可以按任何 組合使用。而且,本發(fā)明還考慮到在本發(fā)明的一些實(shí)施例中,在此提出的任何特征或特征的 組合可以被排除或省略。舉例說(shuō)明,如果該說(shuō)明書(shū)陳述包含組分A、B和C的組合物,它明確 地預(yù)期A、B或C的任何一種或其組合可單一地或以任何組合被省略和放棄。
[0028] 如在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)和所附的權(quán)利要求中所使用的,單數(shù)形式"一個(gè)"、"一種"和 "該"旨在也包括復(fù)數(shù)形式,除非上下文清楚地另外表明。
[0029] 如在此使用,"和/或"是指并且涵蓋一個(gè)或多個(gè)相關(guān)的列出項(xiàng)的任何及全部可能 組合,連同當(dāng)以可替代性("或")解釋時(shí)組合的缺少。
[0030] 如在此使用,術(shù)語(yǔ)"約"當(dāng)是指一個(gè)可測(cè)量的值例如劑量或時(shí)間段等時(shí)意在涵蓋 ±20%、±10%、±5%、±1%、±0. 5%、或甚至±0. 1%的指定量的變化。
[0031] 如在此使用,短語(yǔ)例如"在X和Y之間"與"在約X和Y之間"應(yīng)解釋為包括X和 Y。如在此使用,短語(yǔ)例如"在約X和Y之間"是指"在約X和約Y"之間,并且短語(yǔ)例如"從 約X至Y"是指"從約X至約Y"。
[0032] 如此處使用,術(shù)語(yǔ)"包括(comprise、comprises和comprising) "指示所說(shuō)明的特 征、整數(shù)、步驟、操作、要素、和/或組分的存在,但并不排除一個(gè)或多個(gè)其他特征、整數(shù)、步 驟、操作、要素、組分、和/或其組的存在或添加。
[0033] 如在此使用的,過(guò)渡短語(yǔ)"基本上由……組成"是指一項(xiàng)權(quán)利要求的范圍將被解釋 為包括該權(quán)利要求中所提到的指定材料或步驟以及不實(shí)質(zhì)上影響要求保護(hù)的發(fā)明的一個(gè) 或多個(gè)基本特征和新特征的那些材料或步驟。因此,當(dāng)用于本發(fā)明的權(quán)利要求中時(shí),術(shù)語(yǔ) "基本上由……組成"并不意在被解釋為等同于"包括(comprising) "。
[0034] 本發(fā)明提供了用于改變植物保衛(wèi)細(xì)胞中基因表達(dá)的組合物和方法,由此提供了以 下能力,例如操控水和/或二氧化碳(co2)通過(guò)植物氣孔的交換(例如改變凈〇)2攝入和水 分利用效率和/或〇)2傳感基因(例如通過(guò)引用合并在此的WO08134571中描述的基因) 的活性)和調(diào)節(jié)光合同化作用的速率和/或通過(guò)蒸騰作用過(guò)程的水損失。
[0035] 本發(fā)明針對(duì)對(duì)于在保衛(wèi)細(xì)胞優(yōu)先的或保衛(wèi)細(xì)胞特異性的模式中表達(dá)感興趣核酸 (例如蒸騰作用調(diào)節(jié)多核苷酸)有用的重組多核苷酸和核酸構(gòu)建體(例如表達(dá)盒)。因此, 本發(fā)明的核酸構(gòu)建體(例如表達(dá)盒)包括調(diào)節(jié)由SEQIDNO: 1的核酸編碼的多核苷酸的至 少一個(gè)人工轉(zhuǎn)錄。
[0036]因此,在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明提供了一種重組多核苷酸,該多核苷酸包括、或 基本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:選自下組的核酸,該組由以下項(xiàng)組成:(a)SEQID NO: 1的核酸;(b)與(a)的核酸至少約95%-致的核酸;(c)由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性,不同 于(a)或(b)的核酸的核酸;以及(d) (a)、(b)和(c)的任何組合。
[0037] 在另一實(shí)施例中,本發(fā)明提供了一種重組多核苷酸,該重組多核苷酸包括、或基 本上由以下項(xiàng)組成、或由以下項(xiàng)組成:選自下組的核酸,該組由以下項(xiàng)組成:(a)SEQID NO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQID NO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQID NO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQ IDN0:28以及它們的任何組合的核酸;(b)與(a)的核酸至少約75%-致的核酸;(c)由 于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性,不同于(a)或(b)的核酸的核酸;以及(d) (a)、(b)和(c)的任何組 合。在SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQIDN0:13、SEQIDN0:14、SEQID NO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQID NO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQID NO:27 和SEQIDNO:28 中鑒別的重組多核苷酸包含SEQIDNO: 1。SEQIDNO: 10、SEQID NO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQID NO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQID NO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27 和SEQIDNO:28 提供 了與不同的其他核酸元件組合的SEQIDNO: 1,這些元件包括但不限于內(nèi)含子、外顯子、以 及翻譯增強(qiáng)子。
[0038] 因此,在一些實(shí)施例中,本發(fā)明的核酸可以是具有與SEQIDNO: 1、SEQIDN0:10、 SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQIDN0:13、SEQIDN0:14、SEQIDN0:15、SEQIDN0:16、 SEQIDN0:17、SEQIDN0:18、SEQIDN0:19、SEQIDN0:20、SEQIDN0:21、SEQIDN0:22、 SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:28 或它們的任何組合的核酸的實(shí)質(zhì)一致性(例如至少約70%至約100%-致性)的核酸。因 此,在一些實(shí)施例中,與SEQIDN0:1、SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQID NO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQID NO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQID N0:25、SEQIDN0:26、SEQIDN0:27、SEQIDN0:28的核酸實(shí)質(zhì)上一致的本發(fā)明的核酸具 有與對(duì)應(yīng)的核酸(例如SEQIDN0:1 或SEQIDN0:10-28)至少約 70%、71%、72%、73%、 74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81 %、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、 89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、100%、等、或其中任何范 圍的一致性。在具體實(shí)施例中,本發(fā)明的核酸具有與SEQIDNO: 1或SEQIDN0:10-28的 核酸至少約80%的一致性,與SEQIDNO: 1或SEQIDNO: 10-28的核酸至少約85%的一致 性,與SEQIDNO: 1或SEQIDNO: 10-28的核酸至少約90%的一致性,與SEQIDNO: 1或 SEQIDNO: 10-28的核酸至少約95%的一致性。
[0039] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中,重組多核苷酸可以被可操作地連接至感興趣的一個(gè)多 核苷酸。在其他實(shí)施例中,重組多核苷酸可以被包括在一個(gè)表達(dá)盒中。在另外的實(shí)施例中, 當(dāng)可操作地連接至感興趣的一個(gè)多核苷酸時(shí),本發(fā)明的重組多核苷酸可以賦予所述感興趣 的多核苷酸在用所述重組多核苷酸或包括所述重組多核苷酸的所述表達(dá)盒轉(zhuǎn)化的植物或 植物部分的保衛(wèi)細(xì)胞中的特異性的或優(yōu)先的表達(dá)。該感興趣的多核苷酸可以包括提供了 除草劑抗性、真菌抗性、昆蟲(chóng)抗性、疾病抗性、線蟲(chóng)抗性、雄性不育、非生物脅迫抗性的或改 變了油譜、脂肪酸譜、氨基酸譜或種子的其他營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量的轉(zhuǎn)基因。特別感興趣的是涉及非生 物脅迫抗性的轉(zhuǎn)基因。例如,脫落酸(ABA)反應(yīng)通路涉及的轉(zhuǎn)基因,例如ABA受體、PP2C或 SnRKl是可能感興趣的轉(zhuǎn)基因??梢詫BA受體修飾為組成性活性的或修飾為識(shí)別除了ABA 的分子。請(qǐng)參見(jiàn)W0 2010/093954 ;W0 2011/139798(修飾的ABA受體);W0 2013006263(組 成性活性的ABA受體),所有這些都通過(guò)引用結(jié)合在此。
[0040] 如將被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員很好地理解的,包括SEQIDNO: 1的核酸的表達(dá)盒可 以
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