0095]或者，可使用任何合適的啟動子從重組環(huán)形或線性DNA質(zhì)粒表達(dá)miR基因產(chǎn)物。用于從質(zhì)粒表達(dá)RNA的合適的啟動子包括例如U6或HI RNA pol III啟動子序列或巨細(xì)胞病毒啟動子。其它合適啟動子的選擇在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi)。本發(fā)明的重組質(zhì)粒還可包括用于在癌細(xì)胞中表達(dá)miR基因產(chǎn)物的誘導(dǎo)型或可調(diào)控的啟動子。
[0096]可通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從培養(yǎng)的細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)分離從重組質(zhì)粒表達(dá)的miR基因產(chǎn)物。還可將從重組質(zhì)粒表達(dá)的miR基因產(chǎn)物遞送至癌細(xì)胞并且在其中直接表達(dá)。下面更詳細(xì)地論述重組質(zhì)粒將miR基因產(chǎn)物遞送至癌細(xì)胞的用途。
[0097]miR基因產(chǎn)物可從分開的重組質(zhì)粒表達(dá)，或它們可從相同的重組質(zhì)粒表達(dá)。在一個(gè)實(shí)施方案中，miR基因產(chǎn)物從單個(gè)質(zhì)粒表達(dá)為RNA前體分子，然后通過合適的加工系統(tǒng)(包括但不限于癌細(xì)胞中現(xiàn)有的加工系統(tǒng))將該前體分子加工成功能性miR基因產(chǎn)物。其它合適的加工系統(tǒng)包括例如體外果蠅細(xì)胞裂解物系統(tǒng)(例如，如屬于Tuschl等人的美國公開專利申請2002/0086356中所描述的，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文)和大腸桿菌RNA酶III系統(tǒng)(例如，如屬于Yang等人的美國公開專利申請2004/0014113中所描述的，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文)。
[0098]適合用于表達(dá)miR基因產(chǎn)物的質(zhì)粒的選擇、用于將核酸序列插入質(zhì)粒以表達(dá)基因產(chǎn)物的方法以及將重組質(zhì)粒遞送至目的細(xì)胞的方法在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi)。參見，例如，Zeng 等人(2002)，Molecular Cell 9:1327-1333 ；Tuschl (2002), Nat.B1technol, 20:446-448 ；Brummelkamp 等人(2002), Science 296:550-553 ；Miyagishi 等人(2002)，Nat.B1technol.20:497-500 ;Paddison 等人(2002), Genes Dev.16:948-958 ；Lee 等人(2002)，Nat.B1technol.20:500-505 ;和 Paul 等人(2002)，Nat.B1technol.20:505-508,其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0099]在一個(gè)實(shí)施方案中，表達(dá)miR基因產(chǎn)物的質(zhì)粒包含在CMV立即早期啟動子(intermediate-early promoter)控制下編碼miR前體RNA的序列。如本文中所使用的，“在啟動子的控制下”是指編碼miR基因產(chǎn)物的核酸序列位于啟動子的3’端，以便啟動子可起始miR基因產(chǎn)物編碼序列的轉(zhuǎn)錄。
[0100]miR基因產(chǎn)物還可從重組病毒載體表達(dá)。預(yù)期miR基因產(chǎn)物可從兩個(gè)分開的重組病毒載體或從相同的病毒載體表達(dá)。可通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從培養(yǎng)的細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)分尚從重組病毒載體表達(dá)的RNA或所述RNA可在癌細(xì)胞中直接表達(dá)。下面更詳細(xì)地論述重組病毒載體將miR基因產(chǎn)物遞送至癌細(xì)胞的用途。
[0101 ] 本發(fā)明的重組病毒載體包含編碼miR基因產(chǎn)物的序列和用于表達(dá)RNA序列的任何合適的啟動子。合適的啟動子包括、但不限于U6或HI RNA pol III啟動子序列，或巨細(xì)胞病毒啟動子。其它合適的啟動子的選擇在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi)。本發(fā)明的重組病毒載體還可包含用于在癌細(xì)胞中表達(dá)miR基因產(chǎn)物的誘導(dǎo)型或可調(diào)控的啟動子。
[0102]可使用能夠接受miR基因產(chǎn)物的編碼序列的任何病毒載體；例如，來源于腺病毒(AV)、腺伴隨病毒(AAV)、逆轉(zhuǎn)錄病毒(例如，慢病毒(LV)、彈狀病毒(Rhabdoviruses)、鼠白血病病毒)、皰疹病毒等的載體?？赏ㄟ^用來自其它病毒的包膜蛋白或其它表面抗原假型化載體或通過置換不同的病毒衣殼蛋白(如果合適)來改變病毒載體的趨向性。
[0103]例如，可用來自水泡性口膜炎病毒(VSV)、狂犬病病毒(rabies)、埃博拉病毒(Ebola)、莫科拉病毒(Mokola)等的表面蛋白假型化本發(fā)明的慢病毒載體?？赏ㄟ^對載體進(jìn)行工程改造以表達(dá)不同的衣殼蛋白血清型來制備本發(fā)明的AAV載體，使之靶向不同的細(xì)胞。例如，表達(dá)血清型2型基因組上的血清型2型衣殼的AAV載體稱為AAV 2/2。AAV 2/2載體中的該血清型2型衣殼基因可用血清型5型衣殼基因替換，從而產(chǎn)生AAV 2/5載體。用于構(gòu)建表達(dá)不同衣殼蛋白血清型的AAV載體的技術(shù)在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi)；參見，例如，Rabinowitz，J.E.，等人(2002)，J.Virol.76:791-801，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0104]適合用于本發(fā)明的重組病毒載體的選擇、用于將用于表達(dá)RNA的核酸序列插入載體的方法、將病毒載體遞送至目的細(xì)胞的方法和表達(dá)的RNA產(chǎn)物的回收在本令頁域技術(shù)人員的能力之內(nèi)。參見，例如，Dornburg(1995)，Gene Therap.2:301-310 ；Eglitis (1988), B1techniques 6:608-614 ；Miller (1990), Hum.Gene Therap.1:5-14 ；和Anderson(1998), Nature 392:25-30,其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0105]特別合適的病毒載體是來源于AV和AAV的載體。用于表達(dá)miR基因產(chǎn)物的合適的AV載體、用于構(gòu)建重組AV載體的方法以及用于將載體遞送至靶細(xì)胞的方法描述于Xia等人(2002)，Nat.B1tech.20:1006-1010，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。用于表達(dá)miR基因產(chǎn)物的合適的AAV載體、用于構(gòu)建重組AAV載體的方法以及用于將載體遞送至靶細(xì)胞的方法描述于 Samulski 等人(1987)，J.Virol.61:3096-3101 ；Fisher 等人(1996)，J.Virol, 70:520-532 ；Samulski 等人(1989), J.Virol.63:3822-3826 ;美國專利 5，252，479 ；美國專利5，139,941 ;國際專利申請W0 94/13788 ;和國際專利申請W0 93/24641，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。在一個(gè)實(shí)施方案中，從包含CMV立即早期啟動子的單個(gè)重組AAV載體表達(dá)miR基因產(chǎn)物。
[0106]在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的重組AAV病毒載體包含在人U6RNA啟動子控制下的與polyT終止序列有效連接的編碼miR前體RNA的核酸序列。如本文中所使用的，“與polyT終止序列有效連接”是指編碼有義或反義鏈的核酸序列以5’方向與polyT終止信號緊密鄰接。在從載體轉(zhuǎn)錄miR序列的過程中，polyT終止信號用于終止轉(zhuǎn)錄。
[0107]在本發(fā)明的治療方法的其它實(shí)施方案中，可對受試者施用有效量的至少一種抑制miR表達(dá)的化合物。如本文中所使用的，“抑制miR表達(dá)”是指治療后miR基因產(chǎn)物的前體和/或有活性的成熟形式的產(chǎn)量低于治療前產(chǎn)生的量。通過使用例如本文討論的測定miR轉(zhuǎn)錄物水平的技術(shù)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地確定miR的表達(dá)在癌細(xì)胞中是否已被抑制。抑制可在基因表達(dá)的水平上(即，通過抑制編碼miR基因產(chǎn)物的miR基因的轉(zhuǎn)錄)或在加工的水平上(例如，通過抑制miR前體至成熟的活性miR的加工)發(fā)生。
[0108]如本文中所使用的，抑制miR表達(dá)的化合物的“有效量”是足以在患有癌癥(例如，AML癌)的受試者中抑制癌細(xì)胞的增殖的量。通過考慮因素，例如受試者的大小和體重、疾病侵入的程度、受試者的年齡、健康和性別、施用的途徑以及施用是局部的還是全身性的，本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地確定對給定的受試者施用的抑制miR表達(dá)的化合物的有效量。
[0109]例如，抑制表達(dá)的化合物的有效量可基于待治療的腫瘤塊的近似重量，如本文所述。抑制miR表達(dá)的化合物的有效量也可基于待治療的受試者的大致或估計(jì)的體重，如本文所述。
[0110]本領(lǐng)域技術(shù)人員還可容易地確定用于對給定的受試者施用抑制miR表達(dá)的化合物的合適的給藥方案，如本文所述。
[0111]用于抑制miR基因表達(dá)的合適的化合物包括雙鏈RNA (例如短的或小干擾RNA或“siRNA”)、反義核酸和酶促RNA分子例如核酶。這些化合物中的每一種可被靶向給定的miR基因產(chǎn)物，并且干擾靶miR基因產(chǎn)物的表達(dá)(例如，通過抑制翻譯，通過誘導(dǎo)切割和/或降解)。
[0112]例如，給定的miR基因的表達(dá)可通過用分離的雙鏈RNA( “dsRNA”)分子誘導(dǎo)miR基因的RNA干擾來抑制，所述雙鏈RNA分子與miR基因產(chǎn)物的至少一部分具有至少90%、例如至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同源性。在具體的實(shí)施方案中，dsRNA分子是“短的或小干擾RNA”或“siRNA”。
[0113]用于本方法的siRNA包括長度大約17個(gè)核苷酸至大約29個(gè)核苷酸、優(yōu)選長度大約19至大約25個(gè)核苷酸的短雙鏈RNA。siRNA包含通過標(biāo)準(zhǔn)Watson-Crick堿基配對相互作用(在下文中“堿基配對”)退火在一起的有義RNA鏈和互補(bǔ)反義RNA鏈。有義鏈包含與靶miR基因產(chǎn)物內(nèi)包含的核酸序列大體上同一的核酸序列。
[0114]如本文中所使用的，si RNA中與靶mRNA內(nèi)包含的靶序列“大體上同一”的核酸序列是與靶序列同一的核酸序列或與靶序列相異于1或2個(gè)核苷酸的核酸序列。siRNA的有義和反義鏈可包括兩個(gè)互補(bǔ)的單鏈RNA分子或可包括其中兩個(gè)互補(bǔ)部分堿基配對并且通過單鏈“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”區(qū)域共價(jià)連接的單個(gè)分子。
[0115]siRNA還可以是與天然存在的RNA相異于一個(gè)或多個(gè)核苷酸的添加、缺失、置換和/或改變的經(jīng)改變的RNA。這樣的改變可包括非核苷酸材料的添加，例如至siRNA的末端或至siRNA的一個(gè)或多個(gè)內(nèi)部核苷酸的添加，或使siRNA抵抗核酸酶降解的修飾或用脫氧核糖核苷酸對siRNA中的一個(gè)或多個(gè)核苷酸的置換。
[0116]siRNA的一條或兩條鏈還可包含3’突出端。如本文中所用的，“3’突出端”是指從雙鏈RNA鏈的3’ -末端延伸的至少一個(gè)未配對的核苷酸。因此，在某些實(shí)施方案中，siRNA包含至少一個(gè)長度為1至大約6個(gè)核苷酸(其包括核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸)、長度為1至大約5個(gè)核苷酸、長度為1至大約4個(gè)核苷酸或長度為大約2至大約4個(gè)核苷酸的3’突出端。在具體的實(shí)施方案中，3’突出端存在于siRNA的兩條鏈上，且其長度為2個(gè)核苷酸。例如，siRNA的各條鏈可包含二胸苷酸(“TT”)或二尿苷酸(“uu”)的3’突出端。
[0117]siRNA可通過化學(xué)或生物方法產(chǎn)生，或可從重組質(zhì)?；虿《据d體表達(dá)，如上文對分離的miR基因產(chǎn)物所描述的。用于產(chǎn)生和檢測dsRNA或siRNA分子的示例性方法描述于屬于Gewirtz的美國公開專利申請2002/0173478和屬于Reich等人的美國公開專利申請2004/0018176，二者的全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0118]給定的miR基因的表達(dá)還可通過反義核酸抑制。如本文中所使用的，“反義核酸”是指通過RNA-RNA或RNA-DNA或RNA-肽核酸相互作用與靶RNA結(jié)合的核酸分子，其改變靶RNA的活性。適合用于本方法的反義核酸是通常包含與miR基因產(chǎn)物中的連續(xù)核酸序列互補(bǔ)的核酸序列的單鏈核酸(例如，RNA、DNA、RNA-DNA嵌合物、肽核酸(PNA))。反義核酸可包含與miR基因產(chǎn)物中的連續(xù)核酸序列50-100 %互補(bǔ)、75-100 %互補(bǔ)或95-100 %互補(bǔ)的核酸序列。本文表中提供了特定人miR基因產(chǎn)物的核酸序列。不希望受任何理論束縛，據(jù)信，反義核酸激活RNA酶Η或降解miR基因產(chǎn)物/反義核酸雙鏈體的另一種細(xì)胞核酸酶。
[0119]反義核酸還可包含對核酸主鏈或?qū)μ呛蛪A基部分(或它們的等價(jià)物)的修飾，從而增加靶特異性、核酸酶抗性、遞送或與分子的功效相關(guān)的其它性質(zhì)。此類修飾包括膽固醇部分、雙鏈體插入劑例如吖啶或一種或多種抗核酸酶基團(tuán)。
[0120]反義核酸可通過化學(xué)或生物方法產(chǎn)生，或可從重組質(zhì)?；虿《据d體表達(dá)，如上文對分離的miR基因產(chǎn)物所描述的。用于產(chǎn)生和檢測的示例性方法在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi);參見，例如，Stein和Cheng (1993), Science 261:1004以及屬于Woolf等人的美國專利5，849，902，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0121]給定的miR基因的表達(dá)還可通過酶促核酸(enzymatic nucleic acid)抑制。如本文中所使用的“酶促核酸”是指包含與miR基因產(chǎn)物的連續(xù)核酸序列具有互補(bǔ)性的底物結(jié)合區(qū)并且能夠特異性切割miR基因產(chǎn)物的核酸。酶促核酸底物結(jié)合區(qū)可以例如與miR基因產(chǎn)物中的連續(xù)核酸序列50-100%互補(bǔ)、75-100%互補(bǔ)或95-100%互補(bǔ)。酶促核酸還可包括在堿基、糖和/或磷酸基團(tuán)上的修飾。用于本方法的示例性酶促核酸是核酶。
[0122]酶促核酸可通過化學(xué)或生物方法產(chǎn)生，或可從重組質(zhì)?；虿《据d體表達(dá)，如上文對分離的miR基因產(chǎn)物所描述的。用于產(chǎn)生和檢測dsRNA或siRNA分子的示例性方法描述于 Werner 和 Uhlenbeck (1995), Nucl.Acids Res.23:2092-96 ；Hammann 等人(1999), Antisense and Nucleic Acid Drug Dev.9:25-31 ;以及屬于Cech 等人的美國專利4，987，071，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0123]至少一種miR基因產(chǎn)物或至少一種用于抑制miR表達(dá)的化合物的施用將在患有癌癥(例如，AML)的受試者中抑制癌細(xì)胞的增殖。如本文中所使用的，“抑制癌細(xì)胞的增殖”是指殺死細(xì)胞或永久性或暫時(shí)地阻止或減緩細(xì)胞的生長。如果受試者中癌細(xì)胞的數(shù)目在施用miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物后保持恒定或減少，那么可推斷癌細(xì)胞增殖被抑制。如果癌細(xì)胞的絕對數(shù)目增加但腫瘤生長的速度下降，則也可推斷癌細(xì)胞增殖被抑制。
[0124]受試者體內(nèi)的癌細(xì)胞數(shù)目可通過直接測量或通過對原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性腫瘤塊的大小的估計(jì)來確定。例如，受試者中癌細(xì)胞的數(shù)目可通過免疫組織學(xué)方法、流式細(xì)胞術(shù)或經(jīng)設(shè)計(jì)用于檢測癌細(xì)胞的特征表面標(biāo)記的其它技術(shù)來測量。
[0125]可通過適合用于將此類化合物遞送至受試者的癌細(xì)胞的任何方法來對受試者施用miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物。例如，可通過適合于用此類化合物或用包含編碼此類化合物的序列的核酸轉(zhuǎn)染受試者的細(xì)胞的方法來施用miR基因產(chǎn)物或抑制miR表達(dá)的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，用包含編碼至少一種miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物的序列的質(zhì)?；虿《据d體轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
[0126]用于真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的，包括例如核酸至細(xì)胞的細(xì)胞核或前核(pronucleus)的直接注射、電穿孔、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)移和由親脂材料介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移、受體介導(dǎo)的核酸遞送、基因槍或微粒加速、磷酸鈣沉淀以及由病毒載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。
[0127]例如，細(xì)胞可用質(zhì)脂體轉(zhuǎn)移化合物例如DOTAP (N- [1- (2，3_ 二油酰氧基)丙基]-N, N, N-三甲基-甲基硫酸錢,Boehringer-Mannheim)或等價(jià)物例如LIP0FECTIN進(jìn)行轉(zhuǎn)染。使用的核酸的量對于實(shí)施本發(fā)明不是至關(guān)重要的；可接受的結(jié)果可用0.1-100微克核酸/?ο5個(gè)細(xì)胞來獲得。例如，可使用在3微克D0TAP中的大約0.5微克質(zhì)粒載體/10 5個(gè)細(xì)胞的比例。
[0128]還可通過任何合適的腸內(nèi)或胃腸外施用途徑對受試者施用miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物。用于本方法的合適的腸內(nèi)施用途徑包括例如口服、直腸或鼻內(nèi)給藥。合適的胃腸外施用途徑包括例如血管內(nèi)給藥(例如，靜脈內(nèi)團(tuán)注(bolusinject1n)、靜脈內(nèi)輸注、動脈內(nèi)團(tuán)注、動脈內(nèi)輸注和至脈管系統(tǒng)內(nèi)的導(dǎo)管滴注)；組織外周(per1-tissue)和組織內(nèi)注射(例如，腫瘤外周和腫瘤內(nèi)注射，視網(wǎng)膜內(nèi)注射或視網(wǎng)膜下注射)；皮下注射或沉積，包括皮下輸注(例如通過滲透栗)；對目的組織的直接施用，例如通過導(dǎo)管或其它安置裝置(例如，視網(wǎng)膜丸劑(retinal pellet)或栓劑或包含多孔的、無孔的或凝膠狀材料的植入物)；以及吸入。特別合適的施用途徑是注射、輸注和直接注射進(jìn)腫瘤。
[0129]在本方法中，miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因產(chǎn)物表達(dá)的化合物可以作為裸RNA、與遞送試劑一起或作為包含表達(dá)miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物的序列的核酸(例如，重組質(zhì)?；虿《据d體)對受試者進(jìn)行施用。合適的遞送試劑包括例如MirusTransit ΤΚ0 親脂試劑、LIPOFECTIN、lipofectamine、cellfectin、聚陽離子(例如，多聚賴氨酸)和脂質(zhì)體。
[0130]本文中公開了和/或本領(lǐng)域熟知包含表達(dá)miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物的序列的重組質(zhì)粒和病毒載體、以及用于將此類質(zhì)粒和載體遞送至癌細(xì)胞的技術(shù)。
[0131]在具體的實(shí)施方案中，脂質(zhì)體用于將miR基因產(chǎn)物或抑制miR基因表達(dá)的化合物(或包含編碼它們的序列的核酸)遞送至受試者。脂質(zhì)體還可增加基因產(chǎn)物或核酸的血液半衰期?？蓮臉?biāo)準(zhǔn)的形成小囊泡的脂質(zhì)形成用于本發(fā)明的合適的脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)通常包括中性的或帶負(fù)電荷的磷脂和固醇例如膽固醇。脂質(zhì)的選擇通常通過考慮因素例如期望的脂質(zhì)體大小和脂質(zhì)體在血流中的半衰期來進(jìn)行指導(dǎo)。已知許多用于制備脂質(zhì)體的方法，例如如 Szoka 等人(1980), Ann.Rev.B1phys.B1eng.9:467 ;和美國專利 4，235, 871、4，501, 728,4, 837，028和5，019, 369 (其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文)中所描述的方法。
[0132]用于本方法的脂質(zhì)體可包含將脂質(zhì)體靶向癌細(xì)胞的配體分子。結(jié)合癌細(xì)胞中普遍的受體的配體例如結(jié)合腫瘤細(xì)胞抗原的單克隆抗體是優(yōu)選的。
[0133]用于本方法的脂質(zhì)體還可進(jìn)行修飾以避免被單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(“MMS”)和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(“RES”)清除。此類經(jīng)修飾的脂質(zhì)體在表面具有調(diào)理作用-抑制部分或所述部分被整合入脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)。在特別優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的脂質(zhì)體可包含調(diào)理作用-抑制部分和配體。
[0134]用于制備本發(fā)明的脂質(zhì)體的調(diào)理作用-抑制部分通常是與脂質(zhì)體膜結(jié)合的巨大的親水聚合物。如本文中所使用的，調(diào)理作用-抑制部分，當(dāng)其通過化學(xué)或物理方式(例如通過將脂溶性錨嵌入膜本身或通過與膜脂質(zhì)的活性基團(tuán)直接結(jié)合)附著至膜時(shí)，與脂質(zhì)體膜“結(jié)合”。此類抑制調(diào)理作用的親水聚合物形成了顯著減少脂質(zhì)體被MMS和RES吸收的保護(hù)性表面層；例如，如美國專利4，920，016中所描述的，其全部公開內(nèi)容通過引用合并入本文。
[0135]適合于修飾脂質(zhì)體的調(diào)理作用-抑制部分優(yōu)選是具有大約500至大約40，000道爾頓，更優(yōu)選大約2，000至大約20，000道爾頓的數(shù)量平均分子量的水溶性聚合物。此類聚合物包括聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇(PPG)或其衍生物；例如甲氧基PEG或PPG以及PEG或PPG硬脂酸酯；合成的聚合物，例如聚丙烯酰胺或聚N-乙烯基吡咯烷酮；線性的、分支的或樹枝狀聚酰胺胺；聚丙烯酸；多元醇，例如與羧基或氨基化學(xué)連接的聚乙烯醇和聚木糖醇，以及神經(jīng)節(jié)苷脂，例如神經(jīng)節(jié)苷脂GM1。PEG、甲氧基PEG或甲氧基PPG或其衍生物的共聚物也是合適的。此外，抑制調(diào)理作用的聚合物可以是PEG和多聚氨基酸、多