一種抑制激肽釋放酶klk7的化合物、制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是指一種抑制激肽釋放酶KLK7的化合物、制備方 法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 特應(yīng)性皮炎（AtopicDermatitis,AD)是一種廣泛傳播的慢性炎癥性皮膚病，特點(diǎn) 是干燥、鱗狀皮膚、炎癥、皮膚滲透性增加，AD病人的皮膚對(duì)環(huán)境中常見的而對(duì)正常人無害 的因素也會(huì)很敏感從而易于受到表面感染。在過去的30年間工業(yè)化國家的特應(yīng)性皮炎的 發(fā)病率增長了 2到3倍，據(jù)估計(jì)兒童的特應(yīng)性皮炎患病率達(dá)到了 15-30%，成人的特應(yīng)性皮 炎患病率達(dá)到了 2-10%。由于發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，對(duì)AD的發(fā)病機(jī)制了解得不多，但皮膚屏 障功能紊亂已經(jīng)被證實(shí)是AD發(fā)展過程中的關(guān)鍵因素之一。皮膚屏障的穩(wěn)定依賴于顆粒層 的角質(zhì)形成細(xì)胞分化為角質(zhì)細(xì)胞和皮膚表層角質(zhì)細(xì)胞脫落（即脫肩）之間的平衡，皮膚的 脫肩過程包括由KLKs參與的橋粒的降解，由于橋粒是角質(zhì)細(xì)胞的粘連蛋白，橋粒的降解則 會(huì)導(dǎo)致角質(zhì)細(xì)胞脫落而致皮膚脫肩。證據(jù)顯示，局部或暫時(shí)性的KLKs活性控制的失調(diào)，是 AD病人皮膚屏障穩(wěn)定缺失的主要原因之一。
[0003] KLKs(Kallikreins，激肽釋放酶）是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特異性的絲氨 酸蛋白酶，其編碼基因定位于19ql3. 4,編碼15個(gè)分泌型絲氨酸蛋白酶KLK1-KLK15。已 經(jīng)證明，KLKs存在于正常人的角質(zhì)層細(xì)胞中，目前發(fā)現(xiàn)，至少有8種KLK(KLK5,KLK6,KLK 7，KLK8,KLK10,KLK11，KLK13和KLK14)存在于人的角質(zhì)層和汗液中，其中KLK7占總量 的40 %。KLK7可能是皮膚損傷的一個(gè)關(guān)鍵酶，而且在AD病人中它可能參與一個(gè)系統(tǒng)性炎 癥反應(yīng)，在AD的角質(zhì)層KLK7升高最為突出，這提示KLK7在AD的發(fā)病機(jī)制上可能是至關(guān)重 要的，因此，抑制KLK7的活性對(duì)于AD的治療顯得最為重要。
[0004] LEKTI(Lympho-epithelialKazal-type-relatedinhibitor,淋巴上皮組織 Kazal型相關(guān)蛋白抑制劑）是由SPINK5基因編碼的絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員，LEKTI 前體包含一個(gè)信號(hào)肽和彼此隔開的15個(gè)絲氨酸蛋白酶抑制域（D1-D15)，表達(dá)后迅速被弗 林蛋白酶水解為幾個(gè)蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳 蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的內(nèi)源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14,它們共 同參與皮膚的脫肩過程。在AD病人，LEKTI表達(dá)水平嚴(yán)重降低，導(dǎo)致了KLK7活性的異常升 高。盡管LEKTI是表皮內(nèi)KLK7的天然抑制劑，但作為治療AD的外用藥，其不能透過皮膚角 質(zhì)層，而且其大分子蛋白質(zhì)的特性也會(huì)導(dǎo)致吸收擴(kuò)散速度過慢、降解速度過快的問題，因而 作用非常有限。到目前為止，還沒有一種有效的KLK7抑制劑應(yīng)用于臨床。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種抑制激肽釋放酶KLK7的化合物、制備方法 和用途，抑制激肽釋放酶KLK7的化合物能夠有效的抑制KLK7的活性，加入適當(dāng)?shù)妮o料和助 劑可制備成抑制KLK7活性的藥物制劑。
[0006] 基于上述目的本發(fā)明提供的一種抑制激肽釋放酶KLK7的化合物，具有式I所示結(jié) 構(gòu)：
[0007]
[0008] 式I所示化合物的的制備方法包括以下步驟：
[0009] 步驟1，取式II所示化合物與鹵代丙烷在第一溶劑、第一催化劑和加熱回流條件 下發(fā)生親核取代反應(yīng)生成式III所示化合物；
[0010] 步驟2,取式III所示化合物與鹵化試劑在溶劑和溫度條件下發(fā)生鹵化反應(yīng)，式 III所示化合物的鹵化產(chǎn)物在堿性條件下發(fā)生水解反應(yīng)得到式IV所示化合物；
[0011] 步驟3,取式IV所示化合物與水合肼在乙醇和加熱回流條件下發(fā)生縮合反應(yīng)生成 式V所示化合物；
[0012] 步驟4,取式V所示化合物和式VI所示化合物在第二溶劑、第二催化劑和加熱回流 條件下發(fā)生親核取代反應(yīng)生成式VII所示化合物；
[0013] 步驟5,取式VII所示化合物與拆分劑和無機(jī)酸溶液混合，在60_100°C下攪拌1~ 2. 0小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，向?yàn)V出的固體中加堿即得式I所示化合物；
[0014]
[0016] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，式VI所示化合物制備方法包括以下步驟：
[0017] (1)取式VIII所示化合物與三苯基氯甲烷在第三溶劑、第三催化劑和室溫條件下 進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)得到式IX所示化合物，所述有機(jī)堿為三乙胺或吡啶；
[0018] (2)取式IX所示化合物與對(duì)甲基芐氯在第四溶劑、第四催化劑和加熱回流條件下 發(fā)生親核取代反應(yīng)生成式X所示化合物；
[0019] (3)取式X所示化合物在80%醋酸水溶液中加熱回流1~3小時(shí)后加入堿性溶液 反應(yīng)，得到式XI所示化合物；
[0020] (4)取式XI所示化合物溶于第五溶劑、第五催化劑，并緩慢滴加氯乙酰氯，室溫條 件下發(fā)生氮?；磻?yīng)得到式VI所示化合物，反應(yīng)時(shí)間1~3小時(shí)；
[0022] 在本發(fā)明的另一些實(shí)施例中，所述步驟2中，取式III所示化合物和二苯醚加熱至 120~140°C，在光照下通入氯氣，繼續(xù)加熱至160~170°C發(fā)生鹵化反應(yīng)，通完氯氣后冷卻 至100~110°C，加入磷酸鋅和碳酸鈉水溶液在加熱回流條件下發(fā)生水解反應(yīng)得式IV所示 化合物；所述式III所示化合物、氯氣、磷酸鋅、水、氫氧化鈉的摩爾比為1. 〇 :2. 1~2. 5 : 0· 001 ~0· 003 :1· 4 ~1. 8 :0· 3 ~0· 8 ;
[0023] 在本發(fā)明的另一些實(shí)施例中，所述式II所示化合物、1-氯丙烷、第一催化劑的摩 爾比為 1. 0 :1. 1 ~1. 5 :1· 0 ~1. 2 ;
[0024] 所述式IV所示化合物、水合肼的摩爾比為1. 0 :1. 5~2. 0 ;
[0025] 所述式V所示化合物、式VI所示化合物、第二催化劑的摩爾比為1. 0:1. 0~ 1. 4:1. 0 ~2. 0 ;
[0026] 所述式VII所示化合物與拆分劑的摩爾比為1 : 1.0~1.2。
[0027] 所述式VIII所示化合物、三苯基氯甲烷、第三催化劑的摩爾比為1.0:1.1~1.5: 1. 2 ~2. 3 ;
[0028] 所述式IX所示化合物、對(duì)甲基芐氯，第四催化劑的摩爾比為1.0 :1. 1~1.5 : 1. 0 ~2. 0 ;
[0029] 所述式X所示化合物、醋酸的摩爾比為1 :8~11. 0 ;
[0030] 所述式XI所示化合物、氯乙酰氯、第五催化劑的摩爾比為1 :1. 0~1.3 :1. 2~ 2. 3。
[0031] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述拆分劑為右旋二苯甲酰酒石酸（D-DBTA)，反應(yīng)溫 度為60~10(TC，反應(yīng)時(shí)間為1~3小時(shí)；所述無機(jī)酸為鹽酸、硫酸、硝酸或磷酸。
[0032] 所述親核取代反應(yīng)加熱回流溫度為60~140°C，反應(yīng)時(shí)間1~4小時(shí)；
[0033]所述縮合反應(yīng)的加熱回流溫度為78~100°C，反應(yīng)時(shí)間6~12小時(shí)；
[0034] 所述氨基保護(hù)反應(yīng)的溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間1~5小時(shí)；
[0035] 所述氮?；磻?yīng)的溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間1~5小時(shí)。
[0036] 可選地，所述第一溶劑、第二溶劑、第三溶劑、第四溶劑和第五溶劑分別獨(dú)立地任 意選自甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、乙腈、二氧六環(huán)、氯仿、乙醚中的任意一種或一 種以上；
[0037] 所述第一催化劑、第二催化劑、第三催化劑、第四催化劑和第五催化劑分別獨(dú)立地 任意選自無機(jī)堿或有機(jī)堿，所述無機(jī)堿為碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸銫或氫氧化鉀，所 述有機(jī)堿為三乙胺或吡啶。
[0038] 式I所示化合物在抑制激肽釋放酶KLK7活性的藥物的應(yīng)用。
[0039] 從上面所述可以