0043]
[0044] 例如，用冰醋酸、高氯酸或醋酢中任一種或者兩種W上的酷化劑下酷化反應(yīng);優(yōu)選 高氯酸和醋酢中加入冰醋酸;優(yōu)選地，反應(yīng)溫度-40-25 °C，優(yōu)選-10-25 °C ;優(yōu)選地，冰醋酸的 量占冰醋酸、高氯酸、醋酢構(gòu)成的乙酷化試劑體積的1-50%V/V，優(yōu)選10-15%V/V。
[0045] 作為本發(fā)明另一實(shí)施方式，還提供另一種上述所述化合物或其鹽的制備方法，其 包括從由3,20-雙縮酬（中間體VI)制備得到醋酸烏利司他的反應(yīng)產(chǎn)物中經(jīng)分離制備得到所 述化合物B或化合物C的步驟。3,20-雙縮酬（中間體VI)制備得到醋酸烏利司他的反應(yīng)，例如 可W參見現(xiàn)有技術(shù)CN102516345B公開的可工業(yè)化生產(chǎn)醋酸烏利司他的方法。
[0046] 上述所述的制備方法，其中所述的分離制備為制備高壓液相色譜分離;優(yōu)選地，所 述的制備高壓液相色譜條件為：固定相為C18反相填料，流動(dòng)相為Ξ乙胺憐酸溶液一乙臘梯 度洗脫，檢測波長為237nm。
[0047] 優(yōu)選地，上述所述的制備方法，優(yōu)選從醋酸烏利司他重結(jié)晶所得到的重結(jié)晶母液 中分離制備得到所述的化合物B或化合物C。
[0048] 優(yōu)選地，上述所述化合物或其鹽的檢測方法，其中所述方法為HPLC法或者HPLC-MS 法；
[0049] 優(yōu)選地，所述的HPLC法的檢測條件為：固定相W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑， 流動(dòng)相為Ξ乙胺憐酸溶液一乙臘梯度洗脫，檢測波長為237nm;優(yōu)選地，流動(dòng)相為pH2.5~ 3.5的立乙胺憐酸溶液-乙臘，體積比為30: 70~50:50;更優(yōu)選地，流動(dòng)相為抑3.0的立乙胺 憐酸溶液-乙臘，體積比為40:60;優(yōu)選地，檢測波長為237nm;
[0050] 優(yōu)選地，所述的HPLC-MS法的檢測條件為:HPLC的色譜條件為固定相W十八烷基娃 燒鍵合硅膠為填充劑，流動(dòng)相為乙臘:0.1 %甲酸水=50:50，MS的條件為采用選擇性離子檢 測法，檢測化合物B母離子[M+扣+m/z 415.1，或者化合物C母離子[M+H]+m/z 373.1。
[0051 ]作為本發(fā)明另一目的，還提供上述所述化合物或其鹽在醋酸烏利司他原料藥或者 制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測中作為雜質(zhì)對照品的用途。
[0052] 上述所述的用途，其中所述的檢測采用HPLC法或者HPLC-MS法檢測；優(yōu)選地，所述 的檢測采用HPLC法檢測;更優(yōu)選地，所述的HPLC法檢測條件為：固定相為十八烷基硅烷鍵合 硅膠，流動(dòng)相為體積比為30:70~50:50的抑2.5~3.5的Ξ乙胺憐酸溶液-乙臘，更優(yōu)選流動(dòng) 相為0.2%Ξ乙胺(憐酸調(diào)pH 3.0)緩沖液：乙臘= 40:60,檢測波長為DAD(二極管陣列檢測 器)237皿，理論板數(shù)按醋酸烏利司他峰計(jì)算應(yīng)不小于2000;更優(yōu)選地，所述的有關(guān)物質(zhì)檢測 中，供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，W峰面積計(jì)算，與各雜質(zhì)相對應(yīng)的峰各不得大于雜 質(zhì)對照品溶液的0.15倍(即雜質(zhì)含量不超過0.15% )?？傠s質(zhì)含量不得超過1.0%。
[0053] 作為本發(fā)明一個(gè)【具體實(shí)施方式】，上述所述的雜質(zhì)化合物B或雜質(zhì)化合物C具體可通 過W下方法制備得到。
[0054] 1、醋酸烏利司他的制備過程
[005引將3，20-雙縮酬（Imo 1)，二氯甲燒，化晚、立水六氣丙酬，冷卻至-10-0°C，滴加50% 雙氧水，于-5-5 °C反應(yīng)2-化，分出有機(jī)相，水相用二氯甲燒萃取兩次合并，用10%硫代硫酸 鋼水溶液洗涂，有機(jī)相水洗兩次，無水硫酸儀干燥，過濾，減壓濃縮至恒重。
[0化6] 將Mg( 1.6mol)，1，2-二漠乙燒和THF加入Ξ口燒瓶，滴加4-漠-N，N-二甲基苯胺和 THF，加熱引發(fā)反應(yīng)后回流滴加，加畢，于50-60°C攬拌反應(yīng)化得到格氏試劑，冷卻至25°C，加 入氯化亞銅，25°C攬拌30分鐘后，冷卻下滴加上述環(huán)氧化物的二氯甲燒溶液，保持溫度10- 20°C，加畢保溫?cái)埌杌?，倒入冰的飽和NH4C1水溶液中，攬拌10分鐘，分出有機(jī)相，水相用二 氯甲燒萃取，有機(jī)相合并，加入2N HC1溶液。于25°C下攬拌化，分出有機(jī)相，水相用二氯甲燒 萃取，合并，依次用飽和碳酸氨鋼水溶液，水各洗一次，無水硫酸儀干燥，過濾，濾液轉(zhuǎn)入反 應(yīng)瓶中，加入冰醋酸（1.25mol)，冷卻至-10-0°C，加入70%高氯酸（1.18mol)，然后攬拌下 于-10-0°C滴加醋?。?.96mol)，保溫?cái)埌?0分鐘后，水相用二氯甲燒萃取，合并，依次用飽 和碳酸氨鋼水溶液，水各洗一次，無水硫酸儀干燥，過濾，減壓濃縮至干約1 lOg，經(jīng)用10倍量 異丙醇：乙醇(95:5)重結(jié)晶得到淺黃色結(jié)晶244.8g，重結(jié)晶母液濃縮干得固體，待用。產(chǎn)物 再次用異丙醇：乙醇(95:5)重結(jié)晶，6(TC烘干得到淺黃色結(jié)晶的產(chǎn)物，重結(jié)晶母液濃縮干得 固體，待用。
[0057]上述所得的醋酸烏利司他經(jīng)LC-MS分析，含有多個(gè)雜質(zhì)，其中包括雜質(zhì)B(即化合物 B)和雜質(zhì)C(即化合物C)的MS檢測結(jié)果為:雜質(zhì)A: [M+扣+397.16，雜質(zhì)B: [Μ+Η]+415.1，雜質(zhì)C: [Μ+Η]+373.1，雜質(zhì)D: [Μ+Η]+462.2，雜質(zhì)Ε: [Μ+扣+434.0，雜質(zhì)F: [Μ+Η]+518.2，雜質(zhì)G: [Μ+Η] + 476.2，雜質(zhì)出[]?+扣+441.2，雜質(zhì)1:[]\1+扣+516.2，雜質(zhì)1:[]\1+扣+474.2，雜質(zhì)1(:[]\1+扣+492.3。 [0化引所用的LC-MS條件為：
[0化9 ] HPLC:流動(dòng)相為乙臘:0.1 %甲酸水=50:50
[0060] 柱溫 25 ~35 °C
[0061] 流速 〇.3ml/min
[0062] 檢測波長237nm
[0063] 色譜柱:Agilent Poroshelll20EC-C18 2.7u m 4.6X 50mm
[0064] MS:條件
[00化]ESI，fg = 25，MS2scan。
[0066] 2、雜質(zhì)8、賄]制備過程
[0067] 經(jīng)HPLC分析，醋酸烏利司他成品中雜質(zhì)的含量低于0.1%，但經(jīng)對合成過程中的母 液進(jìn)行分析，其中雜質(zhì)的含量較高，故采用從合成過程中處理過的母液中制備分離雜質(zhì)。
[0068] 將醋酸烏利司他的制備過程中所得重結(jié)晶母液濃縮至干得到固體，此固體中含較 高比例雜質(zhì)，將此固體經(jīng)高壓制備液相純化、處理可得到高純的的雜質(zhì)對照品，具體操作如 下：
[0069] 純化條件：
[0070]
[0074] 具體操作步驟：
[0075] 將母液濃縮至干得到固體，取約1 g，用40 %乙臘/水溶解，上柱，梯度洗脫，根據(jù)出 峰情況，分段收集洗脫液，每次純化完成后，純化柱用5 %乙臘水溶液重新平衡后，可重復(fù)進(jìn) 樣純化。將多批次純化得到的含各組份純度>98%的洗脫液分別合并。濃縮除去大部分乙 臘，水層用乙酸乙醋提取，濃縮乙酸乙醋至干，分別得到雜質(zhì)固體。每批次純化可得雜質(zhì)A約 為5mg，雜質(zhì)B約為lOmg，雜質(zhì)C約為5mg，雜質(zhì)D約為15mg，雜質(zhì)E約為5mg，雜質(zhì)F約為5mg，雜質(zhì) G約為5mg，雜質(zhì)Η約為15mg，雜質(zhì)I約為5mg，雜質(zhì)J約為lOmg，雜質(zhì)K約為5mg。
[0076] 上述純化過程中的分析檢測條件為：
[0077] 流動(dòng)相為抑3.0Ξ乙胺憐酸緩沖液：乙臘=40:60
[0078] 檢測波長237nm
[0079] 柱溫：3(TC
[0080] 流速 l.OmL/min
[0081] 作為本發(fā)明一個(gè)【具體實(shí)施方式】，還提供了雜質(zhì)B、C在醋酸烏利司他原料及其制劑 產(chǎn)品質(zhì)量檢測方法中的用途。優(yōu)選用HPLC和/或HPLC-MS檢測雜質(zhì)B或C及其含量。
[0082] 更優(yōu)選地，所述HPLC所采用的條件為，
[00