br>[0129]將母液濃縮至干得到固體，取約Ig，用40%乙臘/水溶解，上柱，梯度洗脫，根據(jù)出 峰情況，分段收集洗脫液，每次純化完成后，純化柱用5 %乙臘水溶液重新平衡后，可重復(fù)進(jìn) 樣純化。將多批次純化得到的含各組份純度>98%的洗脫液分別合并。濃縮除去大部分乙 臘，水層用乙酸乙醋提取，濃縮乙酸乙醋至干，分別得到雜質(zhì)固體。每批次純化可得雜質(zhì)A約 為5mg，雜質(zhì)B約為lOmg，雜質(zhì)C約為5mg，雜質(zhì)D約為15mg，雜質(zhì)E約為5mg，雜質(zhì)F約為5mg，雜質(zhì) G約為5mg，雜質(zhì)Η約為15mg，雜質(zhì)I約為5mg，雜質(zhì)J約為lOmg，雜質(zhì)K約為5mg。其中雜質(zhì)D和E為 已知化合物。其中，所得新化合物雜質(zhì)B(即化合物B)、C(即化合物C)的結(jié)構(gòu)分別為：
[0130]
[0131] 所述雜質(zhì)B，分子式:仿皿〇〇6
[0132] 分子量:414.49
[0133] 化學(xué)名：3，17α-二乙酷氧基-19-去甲孕醬-3(4),5(6)-二締-11,20-二酬
[0134] MS:415.17[M+扣+,437.16[M+Na]+，453.13[M+K]+
[01巧]儀器型號(hào):B抓邸R BV-500型核磁共振儀
[0136] 雜質(zhì)B的1H-NMR譜、13C-NMR譜、DEPT譜、COSY譜、HSQC譜和HMBC譜歸屬如下表所示
[0137]
[013 引
[0139]
[0140]
[0141 ] 所述雜質(zhì)C，分子式:〔22出8〇5
[0142]分子量:372.45
[01創(chuàng)化學(xué)名：17α-乙酷氧基-19-去甲孕醬-4-締-3,11，20-;酬
[0144] MS:373.16[M+扣+
[0145] 儀器型號(hào):B抓邸R AV-500型核磁共振儀
[0146] 雜質(zhì)C的1H-NMR譜、13C-NMR譜、DEPT譜、COSY譜、HSQC譜和HMBC譜歸屬如下表所示
[0147]
[0149]
[0151]實(shí)施例3:醋酸烏利司他及其雜質(zhì)的檢測(cè)方法
[0152] 醋酸烏利司他有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)的方法采用液相色譜檢測(cè)，HPLC檢測(cè)條件如下：
[0153] 固定相：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑
[0154] 流動(dòng)相:0.2%Ξ乙胺(憐酸調(diào)抑3.0)緩沖液：乙臘= 40:60 [01 巧]檢測(cè)波長(zhǎng)：DAD 302nm、258nm、237nm
[0156]流速：1 .Oml/min;
[0157]柱溫：25°C
[0158] 實(shí)驗(yàn)操作；
[0159] 分別稱(chēng)取醋酸烏利司他對(duì)照品及各雜質(zhì)對(duì)照品各適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成 每1ml中分別含醋酸烏利司他、各雜質(zhì)各約20U g的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。精 密量取系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液lOul注入液相色譜儀，記錄色譜圖（如圖1所示），醋酸烏利司他 及各雜質(zhì)峰相互間的分離度應(yīng)符合要求，理論板數(shù)按醋酸烏利司他峰計(jì)算應(yīng)不小于2000。
[0160] 測(cè)定法：
[0161] 精密稱(chēng)取醋酸烏利司他lOmg，置20ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解，并稀釋至刻度，搖勻， 作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1ml置100ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作 為對(duì)照溶液。量取對(duì)照溶液1〇μ1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度使主成分色譜峰的峰高 為滿(mǎn)量程的10-20%。再精密量取供試品溶液10μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分 峰保留時(shí)間的3倍，色譜圖如圖2所示。
[0162] 各雜質(zhì)重點(diǎn)研究檢測(cè)波長(zhǎng)：
[0163]
[0164] 供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，W峰面積計(jì)算，與各雜質(zhì)相對(duì)應(yīng)的峰各不得 大于對(duì)照溶液的0.15倍(即雜質(zhì)含量不超過(guò)0.15% );其他任一單個(gè)雜質(zhì)峰均不得大于對(duì)照 溶液的0.15倍（即雜質(zhì)含量不超過(guò)0.15%)，總雜質(zhì)不得超過(guò)1.0倍（即總雜質(zhì)含量不超過(guò) 1.0 % )，小于對(duì)照溶液主峰面積0.05倍(即含量小于0.05 %)的峰忽略不計(jì)。
[01化]方法學(xué)驗(yàn)證：
[0166]雜質(zhì)測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果如下：
[0167]
[016 引
[0169]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種化合物或其鹽，所述化合物的結(jié)構(gòu)如下式化合物B或者化合物C所示：2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中所述鹽為無(wú)機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽。3. 權(quán)利要求1 一2所述化合物或其鹽的制備方法，其包括3，20-雙縮酮（中間體VI)在雙 氧水氧化反應(yīng)將5 (11)位的雙鍵環(huán)氧化后通過(guò)后續(xù)的水解反應(yīng)生成其水解產(chǎn)物，通過(guò)互變 發(fā)生雙鍵移位，再通過(guò)乙?；磻?yīng)步驟而制得，其反應(yīng)式如下：4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其中： 所述的雙氧水氧化反應(yīng)為：所述的水解反應(yīng)為：所述的乙酰化反應(yīng)為：5. 權(quán)利要求1 一2所述化合物或其鹽的制備方法，其包括從由3，20-雙縮酮（中間體VI) 制備得到醋酸烏利司他的反應(yīng)產(chǎn)物中經(jīng)分離制備得到所述化合物B或化合物C的步驟。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述的分離制備為制備高壓液相色譜 分離;優(yōu)選地，所述的制備高壓液相色譜條件為：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)反 相填料，流動(dòng)相為三乙胺磷酸溶液一乙腈梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm。7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，從醋酸烏利司他重結(jié)晶所得到的 重結(jié)晶母液中分離制備得到所述的化合物B或化合物C。8. 權(quán)利要求1或2所述化合物或其鹽的檢測(cè)方法，其特征在于所述方法為HPLC法或者 HPLC-MS 法； 優(yōu)選地，所述的HPLC法的檢測(cè)條件為：固定相以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動(dòng) 相為三乙胺磷酸溶液一乙腈梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm;優(yōu)選地，流動(dòng)相為pH2.5~3.5的 三乙胺磷酸溶液-乙腈，體積比為30:70~50:50;更優(yōu)選地，流動(dòng)相為pH3.0的三乙胺磷酸溶 液-乙腈，體積比為40:60; 優(yōu)選地，所述的HPLC-MS法的檢測(cè)條件為:HPLC的色譜條件為固定相以十八烷基硅烷鍵 合硅膠為填充劑，流動(dòng)相為乙腈:0.1%甲酸水=50:50，1^的條件為采用選擇性離子檢測(cè) 法，檢測(cè)化合物B母離子[M+H]+m/z 415.1，或者化合物C母離子[M+H]+m/z373.1。9. 權(quán)利要求1或2所述化合物或其鹽在醋酸烏利司他原料藥或者制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè) 中作為雜質(zhì)對(duì)照品的用途。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途，其中所述的檢測(cè)采用HPLC法或者HPLC-MS法檢測(cè);優(yōu)選 地，所述的檢測(cè)采用HPLC法檢測(cè)；更優(yōu)選地，所述的HPLC法的檢測(cè)條件為：固定相為十八烷 基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為體積比為30:70~50:50的pH2.5~3.5的三乙胺磷酸溶液-乙腈， 檢測(cè)波長(zhǎng)為DAD(二極管陣列檢測(cè)器）237nm，理論板數(shù)按醋酸烏利司他峰計(jì)算應(yīng)不小于 2000;更優(yōu)選地，所述的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)中，供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，以峰面積計(jì) 算，與各雜質(zhì)相對(duì)應(yīng)的峰各不得大于雜質(zhì)對(duì)照品溶液的0.15倍（即雜質(zhì)含量不超過(guò) 0.15%)〇
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供一種醋酸烏利司他的雜質(zhì)化合物及其制備方法，特別是提供了新化合物雜質(zhì)B(化合物B)和雜質(zhì)C(化合物C)，并還提供所述雜質(zhì)的檢測(cè)方法及其用于醋酸烏利司他原料藥及其制劑的質(zhì)量分析的用途。
【IPC分類(lèi)】G01N30/02, C07J7/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105669810
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610092256
【發(fā)明人】陳巍, 孫永強(qiáng), 馮奇志, 嚴(yán)益民, 馮曉暉, 屠永銳, 蔣偉, 錢(qián)明霞, 王菊香, 祁琪, 曹月華
【申請(qǐng)人】常州市第四制藥廠有限公司
【公開(kāi)日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年2月19日